Wilms11 细胞
一般信息
| 说明 | Wilms11 细胞系来源于一名儿科患者的原发性 Wilms 肿瘤(肾母细胞瘤)。与许多其他 Wilms 肿瘤细胞系不同,Wilms11 的特点是存在野生型 WT1,这意味着它不携带 WT1 基因突变,而 WT1 基因突变通常与表现出更具侵袭性或基质表型的 Wilms 肿瘤有关。然而,Wilms11 肿瘤表现出明显的基质分化,有大面积的横纹肌分化,表明肿瘤内有间充质成分。野生型 WT1 的存在加上肿瘤的基质分化,为了解 WT1 突变缺失情况下 Wilms 肿瘤的生物学特性提供了一个独特的模型。 对 Wilms11 的遗传学研究表明,该细胞系的 CTNNB1 基因携带肿瘤特异性突变,该基因编码 β-Catenin,而 β-Catenin 在 Wnt 信号通路中起着至关重要的作用。在 Wilms11 中,这一突变影响到丝氨酸 45,而丝氨酸 45 是β-Catenin 降解过程中的一个关键磷酸化位点。CTNNB1 突变导致β-Catenin 稳定,导致其积累和 Wnt 信号通路的持续激活,而 Wnt 信号通路是细胞增殖和肿瘤发生的驱动因素。这使得 Wilms11 成为研究 Wnt 信号与 Wilms 肿瘤发生之间相互作用的重要模型,尤其是在 WT1 保持不变的情况下。 对 Wilms11 的蛋白质组学分析表明,包括 PDGFRβ 和 AXL 在内的多种受体酪氨酸激酶(RTK)被激活,它们参与驱动肿瘤细胞的生长和存活。Wilms11细胞的下游信号通路,如MAPK和PI3K/AKT通路也被激活,从而导致其致瘤行为。Wilms11 细胞能够进行间质分化,尤其是横纹肌分化,这突显了它们作为研究 Wilms 肿瘤间质成分模型的潜力。总之,Wilms11 是研究在没有 WT1 突变但 Wnt 通路激活的情况下驱动 Wilms 肿瘤发生的分子机制的宝贵工具。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肾脏 |
| 疾病 | Wilms 肿瘤 |
| 应用 | 体外细胞培养模型。生化研究 |
特点
| 年龄 | 22 个月 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 纺锤形 |
| 细胞类型 | Wilms 细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | Wilms11(Cytion 目录号 300420) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A5SM |
生物分子数据
| 突变概况 | WT1 突变状态:同基因 WT1 c.901c>T,p.R301x。LOH: .CTNNB1 突变状态:野生型 |
|---|
处理
| 培养基 | MSCGM 试剂盒(龙沙公司提供) |
|---|---|
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300420-221 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300420 |
| 300420-240226 | 分析证书 | 25. Mar. 2026 | 300420 |