Wilms3 细胞
一般信息
| 说明 | Wilms3 细胞系是根据一名儿科患者的原发性 Wilms 肿瘤建立的,其特征是体细胞 WT1 基因突变。与许多其他 Wilms 肿瘤细胞系不同的是,Wilms3 的 WT1 基因存在杂合框移突变(c.1293-1294insA, p.V432SfsX87),导致产生截短的 WT1 蛋白。这种 WT1 功能的部分缺失与肿瘤的发生有关,肿瘤表现为基质或间充质表型。然而,Wilms3 中的 WT1 突变并非同源,这增加了研究的复杂性,因为与 WT1 完全缺失的细胞系相比,Wilms3 保留了部分 WT1 功能,这可能对肿瘤生物学产生不同的影响。 Wilms3 还携带 CTNNB1 基因突变,特别是影响苏氨酸 41(p.T41A),该基因在 Wnt 信号通路中起着关键作用。这一突变稳定了 β-Catenin,阻止了它的降解,导致 Wnt 通路的持续激活。Wnt信号的持续激活推动了Wilms3的细胞增殖并导致肿瘤发生,使其成为在部分功能性WT1背景下研究CTNNB1突变影响的关键模型。 从表型上看,Wilms3 细胞呈现间质样形态,表达波形蛋白,缺乏细胞角蛋白,这与原始肿瘤中观察到的基质特征一致。这些细胞显示出有限的分化潜能,在特定条件下能够进行一些间充质分化。Wilms3 的蛋白质组分析表明,包括 PDGFRβ 和 AXL 在内的多个受体酪氨酸激酶(RTK)被激活,从而支持细胞的存活和增殖。此外,MAPK 和 PI3K/AKT 等下游信号通路也被激活,从而加强了 Wilms3 细胞的恶性特性。 Wilms3 的一个独特方面是它的部分 WT1 功能,这提供了一个独特的视角,让我们了解当 WT1 突变不完全时,WT1 突变是如何促进 Wilms 肿瘤生物学的。Wilms3 中 WT1 和 Wnt 信号之间的相互作用为研究这些通路在肿瘤发生中的微妙作用提供了宝贵的机会。总之,Wilms3 是研究 WT1 部分缺失和组成型 Wnt 通路激活情况下 Wilms 肿瘤分子机制的重要模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肾脏 |
| 疾病 | Wilms 肿瘤 |
| 应用 | 体外细胞培养模型。生化研究 |
特点
| 年龄 | 11-12 个月 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 纺锤形 |
| 细胞类型 | Wilms 细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | Wilms3(Cytion 目录号 300414) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A5SF |
生物分子数据
| 突变概况 | WT1 突变状态:同基因 c.1293-1294insA,p.V432fsx87,LOH:11p11-11pter,CTNNB1 突变状态:野生型 |
|---|
处理
| 培养基 | MSCGM 试剂盒(龙沙公司提供) |
|---|---|
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '03:01:01
B*: '35:01:01, '35:03:01
C*: '04:01:01
DRB1*: '04:03:01, '11:04:01
DQA1*: '03:01:01, '05:05:01
DQB1*: '03:01:01, '03:02:01
DPB1*: '01:01:01, '04:01:01
E: '01:03:02, '01:06:01
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300414-221 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300414 |