Wilms1 细胞
一般信息
| 说明 | Wilms1 细胞系来源于一个原发性 Wilms 肿瘤样本,该样本取自一名患有双侧肾脏大肿瘤的患者,表明该患者患有 Wilms 肿瘤(一种小儿肾母细胞瘤)。该细胞系的 WT1 基因存在同卵无义突变(c.149 C>A,p.S50X),导致 WT1 蛋白截短并失去功能。WT1 基因对肾脏的发育和功能至关重要,在 Wilms 肿瘤中经常发生突变,尤其是在那些表现出异位间质分化的基质亚型中。因此,Wilms1 细胞是研究肿瘤生物学中 WT1 功能缺失后果的独特体外模型。 Wilms1 细胞系保持稳定的核型,没有明显的染色体异常,可以进行可靠的长期培养。这些细胞表现出间质表型,其特点是表达波形蛋白,而不表达细胞角蛋白等上皮标志物,这与其基质来源一致。此外,该细胞系还表现出有限但显著的间充质分化能力,包括在适当条件下分化成肌肉样细胞的能力。这使得 Wilms1 成为研究间质分化分子机制及其在 Wilms 肿瘤发病机制中失调的宝贵工具。 Wilms1 还被用于研究参与肿瘤进展的关键信号通路的激活状态。蛋白质组分析表明,Wilms1 细胞表现出多种受体酪氨酸激酶的磷酸化和激活,包括表皮生长因子受体和表皮生长因子受体β,以及下游的 MAPK 信号通路。这些发现凸显了 Wilms1 细胞系在探索 Wilms 肿瘤靶向治疗方法中的重要性,因为它能剖析这些通路在癌细胞存活、增殖和分化中的作用。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肾脏 |
| 应用 | 体外细胞培养模型。生化研究 |
| 同义词 | Wilms1-2l |
特点
| 年龄 | 2 年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 纺锤形 |
| 细胞类型 | Wilms 细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | Wilms1(Cytion 目录编号 300411) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A5SC |
生物分子数据
| 表达的受体 | 受体酪氨酸激酶 表皮生长因子受体、EphA7、表皮生长因子受体α、表皮生长因子受体1、表皮生长因子受体β、AxL |
|---|---|
| 致肿瘤性 | 是,在裸鼠体内。形成与 Wilms 肿瘤一致的带有小细胞的肿瘤(异种移植物可能并不完全代表 Wilm 肿瘤,参见 E. Kunce Stroup,2017 年) |
| 病毒 | HIV-1: 阴性、HBV: 阴性、HCV: 阴性 |
| 突变概况 | WT1 突变状态:同基因 c. 149 C>A, p.S50x, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1 突变状态:异基因 TCT>TTT, p.S45F |
| 核型 | 46、正常 |
处理
| 培养基 | MSCGM 试剂盒(龙沙公司提供) |
|---|---|
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 24 小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 1 至 2 次 |
| 解冻后恢复 | 快速 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '03:01:01, '24:02:01
B*: '35:03:01, '38:01:01
C*: '12:03:01
DRB1*: '07:01:01, '14:54:01
DQA1*: '01:04:01, '02:01:01
DQB1*: '02:02:01, '05:03:01
DPB1*: '02:01:02G,'04:02:01G
E: '01:03:01, '01:03:02
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300411-221 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300411 |
| 300411-130524 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300411 |