Wilms2 细胞
一般信息
| 说明 | Wilms2 细胞系来源于一名患有种系 WT1 基因突变的儿科患者的原发性 Wilms 肿瘤。该细胞系的特征是 WT1 基因发生了同卵无义突变(c.1084 C>T,p.R362X),导致产生截短的、无功能的 WT1 蛋白。WT1 是肾脏发育所必需的基因,功能性 WT1 的缺失是 Wilms 肿瘤某些亚型的特征,尤其是与间质或基质分化相关的亚型。Wilms2 细胞系是研究 WT1 缺失驱动的致瘤过程的重要模型,尤其是在 Wilms 肿瘤保留其他关键遗传特征的情况下。 Wilms2 细胞还携带 CTNNB1 基因突变,该基因编码 Wnt 信号通路的关键成分 β-Catenin。这些突变,特别是影响丝氨酸 45 的突变,会导致 β-Catenin 的稳定和积累,从而导致 Wnt 通路的构成性激活。这种激活是 Wilms 肿瘤细胞增殖和肿瘤发生的已知驱动因素,因此 Wilms2 成为了解 Wnt 信号异常如何导致 WT1 突变肿瘤发生和发展的宝贵模型。 在表型方面,Wilms2 细胞表现出间质样形态,表达波形蛋白,缺乏细胞角蛋白等上皮标记物。这与肿瘤的基质特征一致,并强调了WT1在肾脏发育过程中调节间质-上皮转换的作用。对 Wilms2 进行的蛋白质组学分析确定了几种受体酪氨酸激酶(RTK)的激活,包括 PDGFRβ 和 AXL,众所周知,这些激酶支持肿瘤细胞的存活和增殖。此外,MAPK 和 PI3K/AKT 等下游通路也被激活,从而进一步促进了 Wilms2 细胞的恶性特性。 总之,Wilms2 细胞系是探索由 WT1 缺失和 Wnt 信号异常驱动的 Wilms 肿瘤分子机制的重要工具。它的遗传和表型特征为研究潜在的治疗靶点和了解具有间质成分的 Wilms 肿瘤病理学中关键信号通路的作用提供了一个强大的平台。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肾脏 |
| 疾病 | Wilms 肿瘤 |
| 应用 | 体外细胞培养模型。生化研究 |
特点
| 年龄 | 1 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 纺锤形 |
| 细胞类型 | Wilms 细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | Wilms2(Cytion 目录号 300413) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A5SE |
生物分子数据
| 突变概况 | WT1 突变状态:同基因 c.149C>A,p.R326x,LOH:11p11-11pter,CTNNB1 突变状态:异基因 del TCT>TAT,p.S45Y |
|---|
处理
| 培养基 | MSCGM 试剂盒(龙沙公司提供) |
|---|---|
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '01:01:01, '02:01:01
B*: '15:01:01, '57:01:01
C*: '03:03:01, '07:01:01
DRB1*: '04:01:01, '07:01:01
DQA1*: '02:01:01, '03:01:01
DQB1*: '03:02:01, '03:03:02
DPB1*: '04:01:01G、'04:02:01G
E: '01:01:01, '01:03:02
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300413-221 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300413 |
| 300413-130226 | 分析证书 | 13. Mar. 2026 | 300413 |
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