תאי Wilms2
800.00 $*
המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 6 תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 106 תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).
מידע כללי
| תיאור | קו התאים Wilms2 נגזר מגידול Wilms ראשוני בחולה ילדים עם מוטציה בגן WT1. קו תאים זה מאופיין במוטציה הומוזיגוטית חסרת משמעות בגן WT1 (c.1084 C>T, p.R362X), הגורמת לייצור חלבון WT1 מקוצר ולא תפקודי. אובדן ה-WT1 התפקודי, גן חיוני להתפתחות הכליות, הוא סימן היכר של תת-סוגים מסוימים של גידול וילמס, במיוחד אלה הקשורים להבחנה מזנכמלית או סטרומלית. קו התאים Wilms2 הוא מודל משמעותי לחקר תהליכים טומורגניים המונעים על ידי אובדן WT1, במיוחד בהקשר של גידולי וילמס השומרים על מאפיינים גנטיים קריטיים אחרים. תאי Wilms2 נושאים גם מוטציות בגן CTNNB1, המקודד ל-β-Catenin, מרכיב מרכזי במסלול האיתות Wnt. מוטציות אלה, המשפיעות באופן ספציפי על סרין 45, מובילות לייצוב ולהצטברות של β-Catenin, וכתוצאה מכך להפעלה קונסטיטוטבית של מסלול Wnt. הפעלה זו היא גורם ידוע להתרבות תאים וליצירת גידולים בגידולי וילמס, מה שהופך את Wilms2 למודל חשוב להבנת האופן שבו איתות Wnt חריג תורם להתפתחות ולהתקדמות של גידולים עם מוטציות WT1. מבחינת הפנוטיפ, תאי Wilms2 מציגים מורפולוגיה דמוית מזנכימלית, מבטאים וימנטין וחסרים סמנים אפיתלליים כגון ציטוקראטין. זה תואם את מאפייני הסטרומה של הגידול ומדגיש את תפקידו של WT1 בוויסות מעברים מזנכימליים-אפיתלליים במהלך התפתחות הכליה. ניתוחים פרוטאומיים של Wilms2 זיהו הפעלה של מספר קולטני טירוזין קינאז (RTK), כולל PDGFRβ ו-AXL, הידועים כתומכים בהישרדות ובהתרבות של תאי הגידול. בנוסף, מסלולים במורד הזרם כגון MAPK ו-PI3K/AKT מופעלים גם הם, ותורמים עוד יותר לתכונות הממאירות של תאי Wilms2. בסך הכל, קו התאים Wilms2 משמש ככלי חיוני לחקר המנגנונים המולקולריים של גידול וילמס המונע על ידי אובדן WT1 ואיתות Wnt חריג. המאפיינים הגנטיים והפנוטיפיים שלו מספקים פלטפורמה איתנה לחקר מטרות טיפוליות פוטנציאליות ולהבנת תפקידם של מסלולי איתות מרכזיים בפתולוגיה של גידולי וילמס עם מרכיב מזנכימלי. |
|---|---|
| אורגניזם | אדם |
| רקמה | כליה |
| מחלה | גידול וילמס |
| יישומים | מודל תרבית תאים במבחנה. מחקרים ביוכימיים |
מאפיינים
| גיל | שנה אחת |
|---|---|
| מגדר | זכר |
| מוצא אתני | קווקזי |
| מורפולוגיה | בצורת ציר |
| סוג התא | תאי וילמס |
| תכונות צמיחה | דבק |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | Wilms2 (מספר קטלוגי Cytion 300413) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A5SE |
נתונים ביו-מולקולריים
| פרופיל מוטציוני | סטטוס מוטציה WT1: הומוזיגוטי c.149 C>A, p.R326x, LOH: 11p11-11pter, סטטוס מוטציה CTNNB1: הטרוזיגוטי del TCT>TAT, p.S45Y |
|---|
טיפול
| תרבית ביניים | ערכת MSCGM (מבית Lonza) |
|---|---|
| חומר מפרק | אקוטאז |
| תת-תרבות | הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי. |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| ציפוי בקבוק | אף אחד |
| הליך ההקפאה | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
בקרת איכות וניתוח מולקולרי
| עקרות | זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות. |
|---|---|
| אללים HLA |
A*: '01:01:01, '02:01:01
B*: 15:01:01, 57:01:01
C*: '03:03:01, '07:01:01
DRB1*: 04:01:01, 07:01:01
DQA1*: '02:01:01, '03:01:01
DQB1*: 03:02:01, 03:03:02
DPB1*: '04:01:01G, '04:02:01G
E: '01:01:01, '01:03:02
|
תעודת ניתוח (CoA)
| מספר לוט | סוג התעודה | תאריך | מספר קטלוגי |
|---|---|---|---|
| 300413-221 | תעודת ניתוח | 23. May. 2025 | 300413 |
| 300413-130226 | תעודת ניתוח | 13. Mar. 2026 | 300413 |
-
מוצרים קשורים
מוצרים קשורים