תאי Wilms11

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300420

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים Wilms11 נגזר מגידול Wilms ראשוני (נפרובלסטומה) בחולה ילדים. בניגוד לקווי תאים רבים אחרים של גידול Wilms, Wilms11 מאופיין בנוכחות WT1 מסוג בר, כלומר הוא אינו מכיל מוטציות בגן WT1, אשר קשורות בדרך כלל לגידולי Wilms המציגים פנוטיפים אגרסיביים יותר או סטרומליים. עם זאת, הגידול Wilms11 הפגין בידול סטרומתי משמעותי, עם אזורים נרחבים של בידול רבדומיומטי, המעידים על אלמנטים מזנכימליים בתוך הגידול. נוכחותו של WT1 מסוג בר, בשילוב עם הבידול הסטרומתי של הגידול, מספקת מודל ייחודי להבנת הביולוגיה של גידולי וילמס במקרים שבהם אין מוטציות ב-WT1. מחקרים גנטיים של Wilms11 הראו כי קו תאים זה נושא מוטציה ספציפית לגידול ב-CTNNB1, הגן המקודד ל-β-Catenin, הממלא תפקיד מכריע במסלול האיתות Wnt. ב-Wilms11, מוטציה זו משפיעה על סרין 45, אתר פוספורילציה מרכזי המעורב בפירוק β-Catenin. המוטציה ב-CTNNB1 גורמת לייצוב של β-Catenin, מה שמוביל להצטברותו ולהפעלה קונסטיטוטבית של מסלול האיתות Wnt, המניע את התרבות התאים ואת התפתחות הגידול. זה הופך את Wilms11 למודל חשוב לחקר האינטראקציה בין איתות Wnt להתפתחות גידול וילמס, במיוחד במקרים שבהם WT1 נשאר שלם. ניתוחים פרוטאומיים של Wilms11 חשפו הפעלה של מספר קולטני טירוזין קינאז (RTK), כולל PDGFRβ ו-AXL, המעורבים בהנעת צמיחת תאי הגידול והישרדותם. מסלולי איתות במורד הזרם, כגון מסלולי MAPK ו-PI3K/AKT, מופעלים גם הם בתאי Wilms11, ותורמים להתנהגותם הסרטנית. היכולת של תאי Wilms11 לעבור התמיינות מזנכמית, במיוחד התמיינות רבדומיומטית, מדגישה את הפוטנציאל שלהם כמודל לחקר המרכיבים המזנכמיים של גידול וילמס. בסך הכל, Wilms11 משמש ככלי חשוב לחקר המנגנונים המולקולריים המניעים את התפתחות הגידול וילמס בהיעדר מוטציות WT1, אך בהקשר של הפעלת מסלול Wnt.
אורגניזם	אדם
רקמה	כליה
מחלה	גידול וילמס
יישומים	מודל תרבית תאים במבחנה. מחקרים ביוכימיים

גיל	22 חודשים
מגדר	זכר
מוצא אתני	קווקזי
מורפולוגיה	בצורת ציר
סוג התא	תאי וילמס
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	Wilms11 (מספר קטלוגי Cytion 300420)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SM

פרופיל מוטציוני	סטטוס מוטציה WT1: הומוזיגוטי WT1 c.901c>T, p.R301x. LOH: . סטטוס מוטציה CTNNB1: סוג בר

תרבית ביניים	ערכת MSCGM (מבית Lonza)
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
300420-221	תעודת ניתוח	23. May. 2025	300420
300420-240226	תעודת ניתוח	25. Mar. 2026	300420

תאי Wilms11

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA

תעודת ניתוח (CoA)