תאי וילמס 3

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300414

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים Wilms3 הוקם מגידול Wilms ראשוני בחולה ילדים, המאופיין במוטציה סומטית WT1. בניגוד לקווי תאים רבים אחרים של גידול וילמס, Wilms3 נושא מוטציה הטרוזיגוטית של שינוי מסגרת בקודון (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87) בגן WT1, המובילה לייצור חלבון WT1 מקוצר. אובדן חלקי זה של תפקוד WT1 קשור להתפתחות גידולים המציגים פנוטיפ סטרומתי או מזנכימלי. עם זאת, המוטציה ב-WT1 ב-Wilms3 אינה הומוזיגוטית, מה שמסבך את מחקרה, שכן היא שומרת על חלק מתפקוד ה-WT1 שיכול להשפיע על הביולוגיה של הגידול באופן שונה בהשוואה לקווי תאים עם אובדן מוחלט של WT1. Wilms3 נושא גם מוטציה בגן CTNNB1, המשפיעה באופן ספציפי על תראונין 41 (p.T41A), הממלא תפקיד קריטי במסלול האיתות Wnt. מוטציה זו מייצבת את β-Catenin, מונעת את פירוקו ומובילה להפעלה קונסטיטוטבית של מסלול Wnt. הפעלה מתמשכת של מסלול Wnt מובילה לשגשוג תאים ותורמת להתפתחות גידולים ב-Wilms3, מה שהופך אותו למודל מרכזי לחקר ההשפעה של מוטציות CTNNB1 בהקשר של רקע WT1 פונקציונלי חלקית. מבחינה פנוטיפית, תאי Wilms3 מציגים מורפולוגיה דמוית מזנכימלית, מבטאים וימנטין וחסרים ציטוקראטין, בהתאם למאפייני הסטרומה שנצפו בגידול המקורי. תאים אלה מציגים פוטנציאל התמיינות מוגבל, עם יכולת לעבור התמיינות מזנכימלית מסוימת בתנאים ספציפיים. ניתוחים פרוטאומיים של Wilms3 חשפו הפעלה של מספר קולטני טירוזין קינאז (RTK), כולל PDGFRβ ו-AXL, התומכים בהישרדות התאים ובהתרבותם. בנוסף, מסלולי איתות במורד הזרם כגון MAPK ו-PI3K/AKT מופעלים, מה שמחזק את התכונות הממאירות של תאי Wilms3. מאפיין ייחודי של Wilms3 הוא תפקודו החלקי של WT1, המספק פרספקטיבה ייחודית על האופן שבו מוטציות WT1 תורמות לביולוגיה של גידול וילמס כאשר המוטציה אינה מלאה. האינטראקציה בין WT1 לאיתות Wnt ב-Wilms3 מציעה הזדמנות חשובה לחקור את התפקידים המורכבים שממלאים מסלולים אלה בהתפתחות הגידול. בסך הכל, Wilms3 משמש מודל חשוב לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס גידול וילמס בנוכחות אובדן חלקי של WT1 והפעלה קונסטיטוטבית של מסלול Wnt.
אורגניזם	אדם
רקמה	כליה
מחלה	גידול וילמס
יישומים	מודל תרבית תאים במבחנה. מחקרים ביוכימיים

גיל	11-12 חודשים
מגדר	זכר
מוצא אתני	קווקזי
מורפולוגיה	בצורת ציר
סוג התא	תאי וילמס
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	Wilms3 (מספר קטלוגי Cytion 300414)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SF

פרופיל מוטציוני	סטטוס מוטציה WT1: הומוזיגוטי c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, סטטוס מוטציה CTNNB1: סוג בר

תרבית ביניים	ערכת MSCGM (מבית Lonza)
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
אללים HLA	A: 03:01:01 B: '35:01:01, '35:03:01 C: 04:01:01 DRB1: 04:03:01, 11:04:01 DQA1: 03:01:01, 05:05:01 DQB1: 03:01:01, 03:02:01 DPB1*: '01:01:01, '04:01:01 E: '01:03:02, '01:06:01

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
300414-221	תעודת ניתוח	23. May. 2025	300414

תאי וילמס 3

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA

תעודת ניתוח (CoA)