Клітини U87MG — дослідження гліобластоми з використанням клітин U87MG та їхній вплив на дослідження раку мозку
U-87 MG, лінія первинних клітин гліобластоми людини, широко використовується в біологічних дослідженнях. Зокрема, ці клітини застосовуються в галузі нейронауки та імуноонкології.
- Середовище для культивування
- Клітинну лінію U-87 MG культивують у середовищі EMEM (мінімальне есенційне середовище Ігл) з додаванням 1,0 г/л L-глюкози, 2,0 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 мМ пірувату натрію та 10 % розчину FBS. Середовище слід оновлювати кожні 2–3 дні.
- Час подвоєння
- Час подвоєння популяції клітин U 87 MG становить від 18 до 38 годин.
- Тип росту
- U 87 MG — це адгезивна клітинна лінія. Клітини мають видовжену форму та ростуть у вигляді моношарів.
- Рівень біобезпеки
- BSL-1
- Доступно у
- Cytion — Замовити U-87 MG
- Загальні характеристики та походження клітинної лінії U-87 MG
- Інформація щодо культивування клітин U-87 MG
- Переваги та недоліки клітин U-87 MG
- Наукові дослідження з використанням клітин U-87 MG
- Замовте клітинну лінію гліоми U-87 MG вже сьогодні
- Клітинна лінія U-87 MG: наукові публікації
- Ресурси щодо клітин U-87 MG: протоколи, відео та інше
- Інформація про дослідження гліоми U-87 MG: поширені запитання
- Посилання
- Поширені запитання
Загальні характеристики та походження клітинної лінії U-87 MG
У цьому розділі розглядаються походження та загальні характеристики клітинної лінії U87. Ви дізнаєтеся: що таке клітини U-87 MG? Звідки походять клітини U87? Що означає абревіатура U-87 MG? Який розмір клітин U87? Яка морфологія клітинної лінії U87?
- Клітинна лінія U87 — це клітинна лінія гліобластоми, астроцитоми. Вона була створена в 1966 році в Уппсальському університеті. Клітини було отримано від 44-річного чоловіка європейської раси, який страждав на гліобластому. Ця клітинна лінія офіційно називається U 87 MG, що розшифровується як «Uppsala 87 Malignant Glioma» (злоякісна гліома Уппсали 87).
- Клітини U 87 MG мають морфологію, схожу на епітеліальні клітини.
- Діаметр клітин U 87 MG становить від 12 до 14 мкм.
- Ця лінія клітин людської гліобластоми є гіподиплоїдною і має модальне число хромосом 44 приблизно у 48 % клітинної популяції. Однак у 5,9 % клітинної популяції зустрічаються й вищі плоїдії.
Інформація щодо культивування клітин U-87 MG
Перед початком роботи з клітинами U 87 MG слід ознайомитися з наступними ключовими моментами культивування цих клітин гліобластоми. Зокрема, слід знати: Який час подвоєння популяції клітин U 87 MG? Яке середовище використовується для культивування клітин U87? Яка щільність висівання клітинної лінії U-87 MG?
Ключові моменти культивування клітин U-87 MG
Час подвоєння популяції:
Час подвоєння популяції клітин U 87 MG становить від 18 до 38 годин.
Адгезивні або у суспензії:
U 87 MG — це адгезивна клітинна лінія. Клітини мають видовжену форму і ростуть у вигляді моношарів.
Щільність висівання:
Клітинну лінію гліобластоми U 87 MG рекомендується висівати з щільністю 1 × 10⁴ клітин/см². Адгезивні клітини U87 промивають 1×PBS та інкубують з розчином Accutase. Після цього дисоційовані клітини центрифугують та відбирають. Клітини обережно ресуспендують і додають у нові колби, що містять середовище для росту.
Середовище для культивування:
Клітинну лінію U 87 MG культивують у середовищі EMEM (мінімальне есенційне середовище Ігл) з додаванням 1,0 г/л L-глюкози, 2,0 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 мМ пірувату натрію та 10 % розчину FBS. Середовище слід оновлювати кожні 2–3 дні.
Умови культивування:
Для оптимального росту клітин U-87 MG необхідний зволожений інкубатор із подачею 5 % CO₂ та температурою 37 °C.
Зберігання:
Клітини U87 зберігають або у паровій фазі рідкого азоту, або при температурі нижче -150 °C для збереження максимальної життєздатності клітин гліобластоми.
Процес заморожування та середовище:
Для заморожування клітин U 87 MG підходять середовища CM-1 або CM-ACF. Рекомендується повільний процес заморожування, оскільки це запобігає шоку клітин та захищає їх життєздатність.
Процес розморожування:
Заморожені флакони з клітинною лінією U-87 MG розморожують у водяній бані при температурі 37 °C. До клітин додають живильне середовище, ресуспендують їх і переносять для культивування в нові колби. Крім того, клітини U87 можна відцентрифугувати для видалення середовища для заморожування, а потім культивувати.
Рівень біобезпеки:
Для роботи з культурами клітин U 87 MG необхідний рівень біобезпеки 1.
Переваги та недоліки клітин U-87 MG
Коли ми думаємо про клітинну лінію, перше, що спадає на думку, це: які переваги використання клітин U-87 MG? Які недоліки клітин U-87 MG?
Переваги
Клітинні лінії U-87 MG широко використовуються в наукових дослідженнях. Ось кілька переваг, пов’язаних із цією клітинною лінією:
Переваги
- Простота культивування: клітини U-87 MG легко утримувати в культурі. Вони не вимагають вибагливих або складних умов культивування.
- Однорідність: U-87 MG — це однорідна клітинна лінія. Більшість клітин у популяції мають однаковий генетичний склад і, отже, подібні характеристики. Ці клітини використовуються для вивчення клітинних процесів, скринінгу лікарських засобів та тестування.
- Добре охарактеризована: Ця клітинна лінія гліобластоми має чітко визначені характеристики росту, морфології та експресії генів, що робить її цінним інструментом для досліджень.
Недоліки
- Обмежена сфера застосування: U-87 MG — це клітинна лінія гліобластоми, тому її застосування обмежується переважно вивченням гліобластом та відповідних молекулярних механізмів. Вона може не підходити для дослідження інших видів раку.
Наукові застосування клітин U-87 MG
Клітинна лінія гліобластоми U87MG широко використовується в дослідженнях раку, зокрема в дослідженнях гліобластоми. Деякі напрямки застосування клітин U 87 MG у наукових дослідженнях:
- Дослідження біології раку: клітинна лінія U87 використовується для вивчення росту та розвитку раку, відповідних молекулярних механізмів, сигнальних шляхів та мікросередовища пухлини. У дослідженні, опублікованому в 2020 році, використовували in vitro-модель гліобластоми — клітинну лінію U-87 MG — для вивчення гена BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) як терапевтичної мішені. Результати показали, що ген BMAL1 пригнічує проліферацію, міграцію та інвазію клітин гліобластоми шляхом пригнічення експресії генів цикліну B1, металопротеїнази-9 та фосфо-AKT [1]. В іншому дослідженні, проведеному у 2019 році, також використовували клітинну лінію U87 і встановили, що зниження експресії транскрипційного фактора LITAF (ліпополісахарид-індукований фактор некрозу пухлин-альфа) може підвищити радіочутливість клітин гліоми через активацію шляху FOXO-1. LITAF також відомий як ген 7, індукований p53 (PIG7) [2].
- Відкриття та розробка лікарських засобів: клітини U-87 MG можна використовувати для скринінгу та тестування лікарських засобів, що дозволяє дослідникам виявляти нові потенційні протиракові препарати та оцінювати їхню ефективність і токсичність. У ході дослідження використовували клітинну лінію гліобластоми U 87 MG для оцінки протиракової та антиоксидантної активності екстракту Inula helenium (L.) [3]. Аналогічно, в іншій публікації згадувалося використання клітинної лінії U87 для тестування цитотоксичного та апоптотичного ефекту рослинних екстрактів [4]. Крім того, у дослідженні, опублікованому в 2018 році, вивчався цитотоксичний ефект сесквітерпенових алкалоїдів, екстрагованих із рослин роду Nuphar, на чутливі та резистентні до ліків клітинні лінії U-87 MG [5].
Замовте клітинну лінію гліоми U87 MG вже сьогодні
Клітинна лінія U-87 MG: Наукові публікації
Ось кілька відомих наукових публікацій, присвячених клітинній лінії U-87 MG.
У цій статті, опублікованій у журналі «Neuroreport» у 2018 році, висунуто гіпотезу, що гіпоксія може посилювати міграцію та інвазію клітин гліобластоми людини шляхом регулювання сигнального шляху PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Це дослідження опубліковано у журналі «Frontiers in Pharmacology» у 2020 році. Результати дослідження свідчать, що флавоноїд еріодіктиол чинить протиракову дію на клітинну лінію U87 та пригнічує проліферацію клітин і метастазування. Ця сполука проявляє свої протипухлинні властивості шляхом модуляції сигнального шляху PI3K/Akt/NF-κB.
Це дослідження, опубліковане в журналі «Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine» (2018), свідчить про те, що китайська фітопрепаратна формула під назвою «пігулка Сіхуан» може індукувати апоптоз у клітинах U87 шляхом впливу на каскад Akt/mTOR/FOXO1, активований АФК.
LITAF підвищує радіочутливість клітин гліоми людини через шлях FoxO1
Ця наукова стаття була опублікована в журналі «Cellular and Molecular Neurobiology» у 2019 році. У дослідженні висунуто гіпотезу, що транскрипційний фактор LITAF пригнічує експресію FOXO-1 та підвищує радіочутливість клітин гліоми шляхом регулювання сигнального шляху FOXO-1.
Ця стаття була опублікована в журналі «Biointerface Research in Applied Chemistry» (2019). Дослідники використовували клітини U87MG для вивчення цитотоксичного ефекту наночастинок PLGA, наповнених куркуміном.
Ресурси щодо клітин U-87 MG: протоколи, відео та інше
Клітинна лінія гліобластоми U87MG використовується в багатьох лабораторіях, що займаються дослідженнями раку. Ось кілька ресурсів, присвячених цій клітинній лінії:
- Трансфекція клітинної лінії U87: У цьому документі описано протокол трансфекції клітин U87MG.
- Трансфекція клітинної лінії U 87 MG: це відео є покроковим посібником, що пояснює протокол трансфекції клітин U87.
Ресурс із протоколом культивування клітин U87 наведено нижче:
- Клітини U87 MG: Це посилання містить основну інформацію про клітинну лінію U87 MG. Воно включає короткі протоколи поділу, заморожування та розморожування клітин.
Погляди на дослідження гліоми U87 MG: Поширені запитання
Клітинні лінії гліом, такі як клітини гліобластоми U87, - це культивовані клітини, отримані з людських гліом, які широко використовуються в дослідженнях раку для вивчення біології пухлин, генетики та реакції на лікування. Вони слугують моделями для розуміння поведінки пухлини та тестування терапевтичних стратегій.
Ізогенна клітинна лінія - це клітини, отримані з однієї клітини, що забезпечує генетичну однорідність. У дослідженнях гліоми ізогенні лінії забезпечують послідовну модель для вивчення генетичних змін та їх впливу на ріст пухлини і відповідь на лікування.
ДНК-профіль клітинних ліній гліоми має вирішальне значення для виявлення генетичних змін, розуміння еволюції пухлини та розробки таргетованої терапії. Він допомагає класифікувати пухлини на основі генетичних маркерів, таких як мутації IDH1.
Сироватка в середовищі для культивування клітин забезпечує клітини гліоми необхідними факторами росту, гормонами та поживними речовинами. Однак її склад може впливати на відтворюваність експерименту, тому все частіше використовують безсироваткові середовища або середовища з певним вмістом сироватки.
Цитотоксичність клітинних ліній гліоми оцінюється за допомогою таких аналізів, як проточна цитофлуориметрія, яка вимірює здоров'я, життєздатність і загибель клітин після лікування препаратами або імунними клітинами, такими як природні кілери (NK-клітини).
Цитотоксичність NK-клітин відіграє важливу роль у дослідженнях лікування гліоми, оскільки NK-клітини можуть розпізнавати і вбивати пухлинні клітини без попередньої сенсибілізації. Вивчення взаємодії NK-клітин з клітинами гліоми допомагає розробити стратегії для посилення кліренсу пухлини за допомогою NK-клітин.
Пухлина походження надає контекст про початкове біологічне середовище і характеристики пухлини. Розуміння цього допомагає співвіднести результати досліджень клітинних ліній з фактичною поведінкою пухлини та прогнозом для пацієнта.
Електронна мікроскопія забезпечує детальну візуалізацію клітинних і субклітинних структур клітинних ліній гліоми, що має вирішальне значення для вивчення морфології клітин, стану органел і змін після лікування.
Ліганд NKG2D експресується на пухлинних клітинах і зв'язується з рецептором NKG2D на NK-клітинах, запускаючи цитотоксичну відповідь. Вивчення цієї взаємодії допомагає зрозуміти та потенційно посилити імунну відповідь проти гліоми.
3D-моделі клітинних культур точніше імітують мікрооточення пухлини, забезпечуючи краще розуміння росту, міграції та резистентності гліоми до лікарських препаратів. Ця методика має вирішальне значення для більш релевантних досліджень в галузі трансляційної онкології.
Література
- Gwon, D.H. та ін., BMAL1 пригнічує проліферацію, міграцію та інвазію клітин U87MG шляхом зниження експресії цикліну B1, фосфо-AKT та металопротеїнази-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Хуан, Ц. та ін., LITAF підвищує радіочутливість клітин гліоми людини через шлях FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): с. 871–882.
- Koc, K. та ін., «Антиоксидантна та протиракова активність екстракту Inula helenium (L.) у клітинній лінії гліобластоми людини U-87 MG». J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): с. 658–661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh та A. Ghasempour, «Цитотоксичність та індукція апоптозу в клітинах раку молочної залози, раку шкіри та гліобластоми під дією рослинних екстрактів». Mol Biol Rep, 2019. 46(5): с. 5131–5142.
- Фукая, М. та ін., Цитотоксичність сесквітерпенових алкалоїдів рослин роду Nuphar щодо чутливих та резистентних до ліків клітинних ліній. Food Funct, 2018. 9(12): с. 6279–6286.