Клітинна лінія RAW 264.7 у дослідженнях макрофагів та імунології

Клітинна лінія RAW 264.7 слугує надійною in vitro моделлю макрофагів мишей, що має фундаментальне значення для галузі імунологічних досліджень. Ці клітини, отримані від самця миші лінії BALB/c, були трансформовані мишачим лейкемічним вірусом Абельсона, в результаті чого утворилася клітинна лінія, схожа на макрофаги. Завдяки функціональній стабільності та вродженій здатності здійснювати як фагоцитоз, так і піноцитоз, клітини RAW 264.7 є незамінними для вивчення взаємодій між хазяїном і патогеном, що робить їх наріжним каменем імунологічних досліджень [1,2].

📋 Клітинна лінія RAW 264.7 — короткі відомості

Середовище для культивування: Див. сторінку продукту
Час подвоєння: Див. сторінку продукту
Тип росту: Адгезивний
Рівень біобезпеки: BSL-1
Доступно у: Cytion — Замовити RAW 264.7

Морфологічні характеристики та особливості росту

При дослідженні клітини RAW 264.7 демонструють напівадгезивний ріст із схильністю до утворення як веретеноподібних адгезивних клітин, так і сферичних плаваючих життєздатних клітин, діаметр яких становить від 10 до 20 мкм. Ця поліморфність та адаптивність до умов культивування роблять клітини RAW 264.7 універсальним інструментом для експериментальних маніпуляцій та спостережень.

Імунологічна функція та презентація антигенів

Як клітини, що презентують антигени, клітини RAW 264.7 відіграють вирішальну роль в імунній системі. Їхня функція виходить за межі простого розпізнавання патогенів і поширюється на обробку та презентацію антигенів Т-клітинам, тим самим координуючи комплексну імунну відповідь. Ця динаміка сприяє глибшому розумінню того, як імунна система ідентифікує та нейтралізує чужорідні об’єкти.

Поляризація макрофагів: парадигма M0, M1 та M2

Клітини RAW 264.7 у своєму базовому стані як макрофаги M0 мають надзвичайну здатність поляризуватися або у прозапальний фенотип M1, або у протизапальний фенотип M2. Ця здатність до поляризації надає дослідникам модель для вивчення впливу та ефектів різних цитокінів і факторів навколишнього середовища на функцію макрофагів та імунні реакції [3,4].

Остеокластогенез та ремоделювання кісткової тканини

Хоча клітини RAW 264.7 самі по собі не є остеокластами, вони відіграють важливу роль у вивченні остеокластогенезу — процесу утворення остеокластів. Ці клітини сприяють дослідженню експресії генів остеокластів та їхньої реакції на активацію рецепторів. Ці дослідження мають велике значення для розуміння патофізіології таких станів, як остеопороз, характерною ознакою якого є порушення регуляції ремоделювання кісткової тканини.

Інформація про клітинну культуру RAW 264.7

Перш ніж розпочинати експерименти, необхідно ознайомитися з деякою базовою інформацією про цю потужну клітинну лінію. Чи знаєте ви, скільки часу займає подвоєння клітин RAW 264.7? Яка щільність висівання цих клітин і чи є вони адгезивними? Крім того, які оптимальні умови росту для RAW 264.7? Продовжуйте читати, щоб дізнатися всі відповіді, необхідні для роботи з цією дивовижною клітинною лінією!

Інформація про клітинну культуру: Клітинна лінія RAW 264.7
Час подвоєння популяції: Від 11 до 30 годин
Адгезивні або у суспензії: Переважно адгезивна, з деякими популяціями клітин у суспензії
Щільність висівання: 4 × 10⁴ клітин/см²
Рекомендоване середовище для культивування: RPMI 1640 з додаванням 10 % сироватки ембріонів великої рогатої худоби та L-глутаміну (2,5 мМ)
Оптимальні умови культивування: Зволожений інкубатор з 5 % CO₂ та температурою 37 °C
Заміна середовища: 2–3 рази на тиждень
Зберігання: Парова фаза рідкого азоту
Середовище для заморожування: CM-1 або CM-ACF
Процес заморожування: Повільне заморожування
Процес розморожування: Швидке перемішування у водяній бані при температурі 37 °C
Рівень біобезпеки: Рекомендується лабораторія рівня BSL-2

RAW 264.7 cells

Мишачі макрофаги лінії RAW 264.7 при різній щільності покриття.

Переваги та недоліки комірок RAW 264.7

Переваги

Простота культивування: клітинну лінію RAW 264.7 легко вирощувати та підтримувати в лабораторних умовах без будь-яких складних вимог.
Добре охарактеризована: RAW 264.7 — це добре охарактеризована клітинна лінія, що означає наявність у неї стабільних фенотипних та функціональних ознак.
Модель макрофагів in vitro: Оскільки клітини RAW 264.7 є макрофагами, вони проявляють основні функції, властиві макрофагам, такі як фагоцитоз та піноцитоз. Тому їх часто використовують як модель макрофагів in vitro.
Диференціація в остеокласти: Клітини RAW 264.7 можна диференціювати в остеокласти за допомогою специфічних молекулярних факторів. Ці диференційовані клітини здатні здійснювати ремоделювання кісткової тканини, подібно до остеокластів.

Недоліки

Недостатнє відтворення властивостей первинних макрофагів: як трансформована клітинна лінія, RAW 264.7 може неточно відображати особливості первинних макрофагів і мати певні відмінності в експресії генів, фенотипі та функції.
Обмеження при скринінгу лікарських препаратів: клітини RAW 264.7 можуть бути непридатними для всіх типів аналізів скринінгу лікарських препаратів, а їхня реакція на деякі препарати може відрізнятися від реакції первинних макрофагів.
Сильна клітинна адгезія: клітини RAW 264.7 міцно прилипають до поверхні культуральної колби, і їх іноді буває складно відокремити.

Застосування клітин RAW 264.7 для імітації макрофагів та імунологічних досліджень

Моделювання клітинних імунологічних реакцій

Клітинна лінія RAW 264.7, що відтворює функціональні можливості справжніх макрофагів, є ключовою моделлю для дослідження клітинних реакцій на патогени та імунологічні стимули. У дослідженні, присвяченому цьому аспекту, оцінювали імуномодулюючі та антиоксидантні ефекти термоубитих молочнокислих бактерій на ці клітини, що дало важливі результати щодо регуляції імунної системи [5 ].

На доповнення до цього, дослідження, проведене у 2019 році, з’ясувало імунологічний вплив на клітини RAW 264.7 полісахаридів рослини Polygonatum sibiricum. У дослідженні зроблено висновок, що ці сполуки запускають імунну реакцію шляхом активації сигнальних шляхів NF-κB/MAPK, що дає глибоке молекулярне розуміння [6].

Дослідження остеокластогенезу

Виступаючи в ролі сурогату для досліджень диференціації остеокластів, клітини RAW 264.7 сприяють з’ясуванню поведінки остеокластів та шляхів їх диференціації. Такі дослідження розширюють наші знання про механізми резорбції кісткової тканини та патогенез остеопорозу. Для моніторингу внутрішньоклітинних змін та аналізу метаболізму гему в цих клітинах часто використовуються сучасні методи візуалізації.

Отримання молекулярних знань про остеокластогенез

Незважаючи на свою основну роль як моделі макрофагів, клітини RAW 264.7 також використовуються для досліджень остеокластогенезу in vitro. Індукуючи в цих клітинах остеокластоподібні характеристики, дослідники отримують уявлення про процес диференціації та поведінку преостеокластів, хоча в цих дослідженнях надзвичайно важливо враховувати властиві клітинній лінії характеристики та її походження.

Скринінг біоактивності природних продуктів

Скринінг біоактивності природних продуктів — ще одна сфера застосування, в якій клітини RAW 264.7 демонструють високу ефективність. Наприклад, їх використання в корейському дослідженні, присвяченому вивченню імуностимулюючих властивостей рослинної суміші, продемонструвало ефективність цієї клітинної лінії в ідентифікації біоактивних сполук у природних речовинах [7 ].

Проведіть свої дослідження з використанням наших клітин RAW 264.7

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 400319

Наукові публікації, в яких використовуються клітини лінії RAW 264.7

Існує багато наукових публікацій, присвячених клітинній лінії макрофагів миші RAW 264.7:

Полісахариди з Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute індукують імунну відповідь у клітинній лінії RAW 264.7 через сигнальний шлях NF-κB/MAPK: У цьому дослідженні було висунуто гіпотезу, що полісахариди, отримані з рослини Polygonatum sibiricum, можуть викликати імунну реакцію в клітинній лінії макрофагів мишей RAW 264.7 шляхом регулювання сигнального каскаду NF-κB/MAPK.
Імуномодулюючі ефекти екстракту Tinospora crispa та його основних сполук на імунні функції макрофагів RAW 264.7: У цій статті, опублікованій у журналі «International Immunopharmacology», описано, що екстракт рослини Tinospora crispa та його основні компоненти мають імуномодулюючий та імуностимулюючий ефект на клітинну лінію макрофагів RAW 264.7.
Термічно інактивовані молочнокислі бактерії пригнічують утворення оксиду азоту через індуковану синтазу оксиду азоту та циклооксигеназу-2 у клітинах RAW 264.7: У цьому дослідженні висунуто припущення, що термоубиті молочнокислі бактерії потенційно можуть використовуватися у синтезі пробіотичних продуктів, оскільки вони мають імуномодулюючі та антиоксидантні властивості. Дослідники використовували клітини RAW 264.7 для вивчення цих біологічних активностей.
Вплив рослинного препарату на посилення імунної відповіді в макрофагах RAW 264.7: У цьому дослідженні використовували клітини RAW 264.7 для вивчення імуностимулюючого ефекту рослинного препарату під назвою KM1608. Результати дослідження вказують на те, що KM1608 є потенційним засобом для посилення імунної відповіді.
Скринінг рослин, що використовуються в традиційній колумбійській медицині, виявив протизапальний потенціал чашечок Physalis angulata: У цій статті, опублікованій у «Saudi Journal of Biological Sciences», досліджували протизапальний потенціал 10 широко використовуваних традиційних колумбійських рослин на клітинах RAW 264.7, стимульованих LPS.

Клітини RAW 264.7: ресурси, протоколи, відео та інше

Клітини RAW 264.7 часто використовуються в дослідженнях з трансфекції. Наведені нижче ресурси містять опис різних методів трансфекції, що застосовуються для клітинної лінії RAW 264.7.

Трансфекція клітин RAW 264.7: На цьому веб-сайті наведено протокол трансфекції макрофагів RAW 264.7 з використанням реагенту ліпофектаміну.
Протокол трансфекції: у цій опублікованій статті описано детальний протокол трансфекції клітин RAW 264.7.
Ефективний метод трансфекції клітин RAW 264.7: у цьому документі описано ще один практичний підхід до трансфекції з використанням клітин RAW 264.7.

Відео, пов’язані з клітинною лінією RAW 264.7

Культивування клітин RAW 264.7: У цьому відео пояснюється протокол пасажування клітин RAW 264.7.
Метод трансфекції: Це відео присвячене трансфекції клітин RAW 264.7 репортерним геном.

Основні питання та відповіді щодо клітинної лінії RAW 264.7: огляд досліджень у сфері імітації макрофагів та остеокластогенезу

Література

Taciak, B. та ін., Оцінка фенотипної та функціональної стабільності клітинної лінії RAW 264.7 під час серійних пасажів. PloS one, 2018. 13(6): с. e0198943.
Wang, S., et al., Запальні макрофаги переривають дозрівання та мінералізацію остеоцитів шляхом регулювання сигнального шляху Notch. Molecular Medicine, 2022. 28(1): с. 102.
Орехов, А.Н. та ін., Диференціація моноцитів та поляризація макрофагів. Vessel Plus, 2019. 3: с. 10.
Хабіпов, А. та ін., Поляризація макрофагів RAW 264.7 під впливом клітин раку підшлункової залози — модель для вивчення макрофагів, що сприяють розвитку пухлин. Anticancer Research, 2019. 39(6): с. 2871–2882.
Канг, Ч.-Х. та ін., Термоінактивовані молочнокислі бактерії пригнічують утворення оксиду азоту через індуковану синтазу оксиду азоту та циклооксигеназу-2 у клітинах RAW 264.7. Probiotics and Antimicrobial Proteins, 2021. 13(6): с. 1530–1538.
Чжан, Ц., та ін., Полісахариди з Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute індукують імунну відповідь у клітинній лінії RAW264.7 через шлях NF-κB/MAPK. RSC Advances, 2019. 9(31): с. 17988–17994.
Трін, Т.А. та ін., Вплив рослинного препарату на посилення імунної відповіді в макрофагах RAW 264.7. Biomolecules, 2020. 10(3): с. 424.