Перейти на головну сторінку

Клітинна лінія Neuro-2a

Neuro-2a — це клітинна лінія нейронів миші, яка широко використовується в дослідженнях у галузі нейронауки. В основному ці клітини застосовуються для вивчення розвитку та диференціації нейронів, нейротоксичності, сигнальних шляхів клітин та росту аксонів. Крім того, їх використовують для розробки та скринінгу лікарських препаратів.

Ця стаття присвячена важливим аспектам клітин нейробластоми Neuro-2a, які можуть стати у нагоді перед початком роботи з ними. У ній, головним чином, розглядаються:

  1. Загальні характеристики та походження клітин Neuro-2a
  2. Інформацію щодо культивування клітинної лінії Neuro-2a
  3. Переваги та недоліки клітинної лінії Neuro-2a
  4. Наукові застосування клітинної лінії Neuro-2a
  5. Наукові публікації, присвячені клітинам Neuro-2a
  6. Ресурси щодо клітин Neuro-2a: протоколи, відео та інше

Загальні характеристики та походження клітин Neuro-2a

У цій частині статті розглядаються передумови та основні характеристики клітинної лінії Neuro-2a, які необхідно знати перед початком роботи з нею. Тут ви дізнаєтеся: Що таке клітинна лінія Neuro-2a? Яке походження має клітинна лінія Neuro-2a ? У чому полягає диференціація клітин Neuro-2a? Який розмір клітини Neuro-2a? Яка морфологія клітин Neuro-2a?

  • Клітини Neuro-2a походять із спонтанної пухлини (нейробластоми) миші-альбіноса (лінія A). Клітинну лінію створили Р. Дж. Клебе та Ф. Г. Раддл.
  • Клітини нейробластоми Neuro-2a мають морфологію нейронів та амебоїдних стовбурових клітин.
  • Розмір клітин Neuro-2a становить 12 мікрометрів у висоту [1].
  • Кількість хромосом у клітинах Neuro-2a може коливатися від 59 до 193, при цьому модальне значення становить 95. Каріотип цих клітин нейробластоми нестабільний у межах від 94 до 98 хромосом.

Ілюстрація нейронної сигналізації: 3D-модель вивільнення нейромедіатора в синаптичну щілину пресинаптичним нейроном, що спричиняється припливом Ca2+, що, у свою чергу, призводить до активації іонних каналів та припливу Na+ у постсинаптичному нейроні.

Інформація щодо культивування клітинної лінії Neuro-2a

Клітини Neuro-2a широко використовуються в наукових лабораторіях, що займаються дослідженнями в галузі нейронауки. Перед початком роботи з цими клітинами слід ознайомитися з наведеною нижче важливою інформацією щодо культивування клітин. Це допоможе вам полегшити процес роботи. Ви дізнаєтеся: Що таке Neuro-2a — середовище для культивування клітин? Як культивувати клітини Neuro-2a? Який час подвоєння клітин Neuro-2a? Яка щільність висівання клітин Neuro-2a ? Який протокол культивування клітин Neuro-2a? Яке середовище для культивування клітин Neuro-2a?

Ключові моменти культивування клітин Neuro-2a

Час подвоєння:

Час подвоєння клітин Neuro-2a становить приблизно 70 годин.

Адгезивні чи у суспензії:

Neuro-2a — це адгезивна клітинна лінія.

Щільність висівання:

Оптимальна щільність висівання клітин для клітинної лінії Neuro-2a становить 1 × 10 клітин/см². Перед висіванням клітини промивають фосфатно-буферним розчином без магнію та кальцію (1x). Потім додають розчин для пасажування (Accutase) і інкубують клітини протягом 8–10 хвилин при кімнатній температурі. Після дисоціації клітин додають свіже середовище, а клітини центрифугують. Зібраний осад клітин обережно ресуспендують, а клітини переносять у культуральну посудину для росту.

Середовище для вирощування:

Для культивування клітин Neuro-2a використовують EMEM. Вона містить 10 % FBS, 2 мМ L-глутаміну, 1,5 г/л NaHCO₃, EBSS, 1 мМ пірувату натрію та NEAA для забезпечення ідеальних умов росту клітин. Середовище слід замінювати 1–2 рази на тиждень.

Умови вирощування:

Культури Neuro-2a утримують у зволоженому інкубаторі при температурі 37 °C, підключеному до джерела 5 % CO₂.

Зберігання:

Для тривалого зберігання клітини слід зберігати при температурі нижче -150 °C в електричному морозильнику з ультранизькою температурою або у паровій фазі рідкого азоту.

Процес заморожування та середовище:

Для заморожування клітин Neuro-2a використовують середовища CM-1 або CM-ACF. Клітини заморожують методом повільного заморожування, що забезпечує зниження температури лише на 1 °C за хвилину. Це захищає клітини від шоку та зберігає їх життєздатність.

Процес розморожування:

Для розморожування заморожених культур флакон поміщають у водяну баню з температурою 37 °C на 40–60 секунд, доки не залишиться лише невеликий шматок льоду. Потім додають культуральне середовище, і клітини піддають центрифугуванню. Цей крок допомагає видалити компоненти середовища для заморожування. Після цього осад клітин ресуспендують, а клітини переносять у нову колбу, наповнену культуральним середовищем. Далі клітини поміщають в інкубатор при температурі 37 °C мінімум на 24 години.

Рівень біобезпеки:

Для роботи з культурами Neuro-2a та їх утримання обов’язковим є використання лабораторних умов рівня біобезпеки 1.

Neuro 2a cells

Мікроскопічне зображення клітин нейробластоми Neuro 2a на ранній стадії культивування, що ілюструє їхню морфологію при 10-кратному та 20-кратному збільшенні.

Переваги та недоліки клітинної лінії Neuro-2a

Клітини Neuro-2a мають певні переваги та недоліки, що відрізняють їх від інших нейрональних клітинних ліній. Деякі найважливіші переваги та недоліки цих клітин наведено нижче.

Переваги

Перевагами мишачої клітинної лінії нейробластоми Neuro-2a є:

  • Простота утримання:

    Клітинна лінія Neuro-2a не вимагає складних або заплутаних процедур культивування клітин. Їх легко культивувати та підтримувати в дослідницьких лабораторіях.

  • Модель нейрональних клітин in vitro:

    Neuro-2a — це зручна модель нейрональних клітин, яка широко використовується дослідниками у дослідженнях розвитку та диференціації нейронів.

 

Недоліки

Недоліками клітин Neuro-2a є:

  • Мишаче походження:

    Клітини Neuro-2a мають мишаче походження, тому дослідникам слід бути обережними при екстраполяції результатів досліджень на мишах на здоров’я та захворювання людини, оскільки біологія мишей та людини може суттєво відрізнятися.

 

Застосування клітинної лінії Neuro-2a в наукових дослідженнях

Клітини Neuro-2a мають широке застосування в галузі нейробіологічних досліджень. Нижче розглянуто кілька перспективних напрямків використання цієї клітинної лінії:

  • Нейророзвиток: Neuro-2a — це модель нейрональних клітин in vitro, яка широко використовується для вивчення нейророзвитку та пов’язаних з ним процесів, таких як диференціація, ріст аксонів та формування синапсів. У дослідженні, проведеному у 2020 році, клітини Neuro-2a використовували для вивчення ролі мікроРНК-124 у диференціації нейрональних клітин, індукованій ретиноєвою кислотою [2]. В іншому дослідженні вивчалася експресія гамма-рецептора ретиноєвої кислоти (RARG) та miRNA-124 у клітинній лінії нейробластоми (N2A). У цьому дослідженні було висунуто гіпотезу, що RARG є мішенню для miR-124 і пригнічує ріст нейритів [3].
  • Нейротоксичність: клітини Neuro-2a також використовують для оцінки токсичного впливу лікарських препаратів, хімічних речовин або екологічних факторів на нервові клітини. Наприклад, у дослідженні, проведеному Чжіхон Інь та його колегами, за допомогою клітин Neuro-2a вивчалася нейротоксичність бісфенолу А (BPA) — хімічної речовини, що міститься в навколишньому середовищі. Вчені виявили, що BPA пригнічує диференціацію та проліферацію нейронів, порушуючи цілісність їх клітин та синапсів [4].
  • Скринінг лікарських засобів: Клітини Neuro-2a також використовують для оцінки терапевтичної активності різних лікарських засобів, сполук та природних продуктів. Наприклад, у одному дослідженні з використанням клітин Neuro-2a вивчався антиоксидантний потенціал екстракту рослини Гінкго білоба. Крім того, автори дослідження припустили, що він сприяє зменшенню агрегації Аβ і може стати потенційним засобом лікування хвороби Альцгеймера [5].

5. Наукові публікації, присвячені клітинам Neuro-2a

Ось кілька цікавих наукових статей, присвячених клітинній лінії Neuro-2a.

Алкаміди, подібні до піперину, з Piper nigrum індукують промотор BDNF та сприяють росту нейритів у клітинах Neuro-2a

У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Journal of Natural Medicines» у 2018 році, вивчалися терапевтичні ефекти алкамідів, виділених із білого перцю (P. nigrum), на нейрональні клітини Neuro-2a.

Зниження експресії Nkx2.1 пов’язане з аномаліями розвитку мозку, спричиненими надлишком ретиноєвої кислоти

У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Acta Biochimica et Biophysica Sinica» у 2020 році, висунуто гіпотезу, що ген Nkx2.1 відіграє важливу роль у розвитку мозку мишей шляхом регуляції сигнального каскаду Shh.

Вплив бісфенолу А викликає нейротоксичність, пов’язану з порушенням роботи синапсів та цитоскелету в клітинах Neuro-2a

Ця стаття, опублікована в журналі «Toxicology and Industrial Health» (2023), припускає, що хімічна речовина навколишнього середовища — бісфенол А — викликає нейротоксичність у клітинах Neuro-2a та порушує функцію їхніх синапсів і цитоскелету.

Модуляція гексареліном шляхів MAPK та PI3K/Akt у клітинах Neuro-2A пригнічує апоптотичну токсичність, індуковану перекисом водню

У цій статті, опублікованій у журналі «Pharmaceuticals» (2021), висунуто гіпотезу, що лікарський засіб гексарелін модулює каскади PI3K/AKT та MAPK у клітинах нейробластоми (Neuro-2a) та пригнічує апоптоз клітин Neuro-2a, індукований перекисом водню.

Етанольний екстракт плодів Emblica officinalis пригнічує нейрозапалення в мікроглії та сприяє росту нейритів у клітинах Neuro-2A

У цій науковій статті, опублікованій у журналі «Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine» (2021), висловлено припущення, що екстракт плодів Emblica officinalis пригнічує нейрозапалення в клітинах Neuro-2a і, отже, може бути корисним при нейрозапальних захворюваннях.

Ресурси щодо клітин Neuro-2a: протоколи, відео та інше

Нижче наведено онлайн-ресурси, присвячені клітинам Neuro-2a. Вони включають протокол культивування та трансфекції клітин Neuro-2a. 

  • Протокол трансфекції клітин Neuro-2a: Клітини Neuro-2a є придатним господарем для трансфекції. За цим посиланням ви знайдете інструкції щодо протоколу трансфекції цієї клітинної лінії. Ефективність трансфекції клітин Neuro-2a варіюється залежно від використовуваного реагенту.

За цим посиланням міститься протокол культивування клітин Neuro-2a.

  • Протокол культивування клітин Neuro-2a: за цим посиланням ви зможете ознайомитися з протоколом субкультивування клітин Neuro-2a.
  • Клітини Neuro-2a: На веб-сайті міститься вичерпна інформація про середовища для клітин Neuro-2a, щільність висівання, а також протоколи субкультурування та роботи з кріоконсервованими та проліферативними культурами.

Література

  1. Lulevich, V. та ін., Механіка одиночних клітин забезпечує чутливий та кількісний засіб для дослідження взаємодій пептиду бета-амілоїду та нейрональних клітин. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): с. 13872–7.
  2. You, Q., et al., Роль miR-124 у регуляції диференціації клітин Neuro-2A, індукованої ретиноєвою кислотою. Neural Regen Res, 2020. 15(6): с. 1133–1139.
  3. Су, X., та ін., Рецептор ретиноєвої кислоти гамма є мішенню мікроРНК-124 та інгібує ріст нейритів. Neuropharmacology, 2020. 163: с. 107657.
  4. Yin, Z., та ін., Вплив бісфенолу А індукує нейротоксичність та пов’язаний із синапсами й цитоскелетом у клітинах Neuro-2a. Toxicology in Vitro, 2020. 67: с. 104911.
  5. Чен, Л. та ін., Екстракт гінкго білоба (EGb) пригнічує окислювальний стрес у клітинах Neuro 2A з надмірною експресією APPsw. «BioMed Research International», 2019. 2019.

 

Ми виявили, що ви перебуваєте в іншій країні або використовуєте іншу мову браузера, ніж обрана в даний момент. Бажаєте прийняти запропоновані налаштування?

Закрити