Клітини NCI-H460 — дослідження раку легенів на основі даних про клітинну лінію NCI-H460
NCI-H460 — це клітини недрібноклітинного раку легенів людського походження, які широко використовуються в дослідженнях карциноми легенів та токсикології. Ця клітинна лінія є цінним інструментом для вивчення різних аспектів біології раку, пов’язаних із розвитком пухлини, її ростом та резистентністю до ліків. Крім того, клітини NCI-H460 є підходящою моделлю для розробки протиракових препаратів.
- Середовище для культивування
- Як культуральне середовище для NCI-H460 використовується RPMI 1640. До нього додають 10 % сироватки ембріонів великої рогатої худоби, 2,1 мМ стабільного глутаміну та 2,0 г/л NaHCO3. Середовище слід замінювати 2–3 рази на тиждень.
- Час подвоєння
- Час подвоєння клітин NCI-H460 становить приблизно 33 години.
- Тип росту
- Клітини раку легенів NCI-H460 є адгезивними.
- Рівень біобезпеки
- BSL-4
- Надається компанією
- Cytion — Замовити клітини NCI-H460
Клітини NCI-H460: походження та загальні характеристики
Походження та загальні характеристики клітинної лінії значною мірою визначають її застосування в наукових дослідженнях. Цей розділ статті допоможе вам дізнатися про походження та основні особливості клітин раку легенів NCI-H460. Ви дізнаєтеся: Що таке клітини NCI-H460? Який тип клітинної лінії NCI-H460? Яка морфологія клітин NCI-H460?
- Клітинна лінія NCI-H460 походить із плеврального випоту європейського чоловіка з великоклітинним раком легенів. Вона була створена в 1982 році А. Ф. Газдаром та його колегами.
- Клітини раку легенів NCI-H460 мають епітеліальну морфологію.
- NCI-H460 — це пухлиногенна клітинна лінія з гіпотриплоїдним каріотипом. Модальна кількість хромосом для цих клітин становить 57. Клітини NCI-H460 також мають 58 модальних хромосом з порівнянною частотою.
- Ці клітини раку легенів мають багато мутацій, характерних для недрібноклітинних пухлин легенів, таких як мутація KRAS у NCI-H460, які беруть участь у проліферації, рості, інвазії та метастазуванні клітин.
Інформація щодо культивування клітин NCI-H460
Для правильного поводження та утримання клітинної лінії NCI-H460 слід знати наступні ключові моменти. Тут наведено інформацію про час подвоєння клітин NCI-H460, культуральне середовище для NCI-H460 та основні процедури культивування клітин раку легенів NCI-H460.
Ключові моменти культивування клітин NCI-H460
Час подвоєння:
Час подвоєння клітин NCI-H460 становить приблизно 33 години.
Адгезивні або у суспензії:
Клітини раку легенів NCI-H460 є адгезивними.
Коефіцієнт поділу:
Рекомендований коефіцієнт поділу для клітинної лінії NCI-H460 становить 1:2 та 1:4. Після видалення старого середовища адгезивні клітини промивають 1× фосфатно-буферним сольовим розчином. Потім клітини інкубують із розчином для пасажування Accutase протягом 8–10 хвилин при кімнатній температурі. Дисоційовані клітини ресуспендують у культуральному середовищі та центрифугують. Зібрані клітини знову ресуспендують і переносять у нову колбу для культивування.
Середовище для культивування:
В якості культурального середовища для NCI-H460 використовують RPMI 1640. Його доповнюють 10 % сироваткою ембріонів великої рогатої худоби, 2,1 мМ стабільним глутаміном та 2,0 г/л NaHCO₃. Середовище слід замінювати 2–3 рази на тиждень.
Умови культивування:
Культури NCI-H460 утримують при температурі 37 °C у зволоженому інкубаторі з безперервною подачею 5 % CO₂.
Зберігання:
Клітини раку легенів NCI-H460 можна довгостроково зберігати у паровій фазі рідкого азоту або при температурі нижче -150 °C в електричному ультранизькотемпературному морозильнику.
Процес заморожування та середовище:
Для заморожування та зберігання клітин NCI-H460 використовують середовище CM-1 або CM-ACF. Для забезпечення максимальної життєздатності клітин рекомендується застосовувати метод повільного заморожування.
Процес розморожування:
Заморожені клітини NCI-H460 розморожують у попередньо нагрітій водяній бані (при температурі 37 °C) протягом 40–60 секунд, доки не залишиться невеликий шматок льоду. До розморожених клітин додають свіже середовище та центрифугують для видалення компонентів середовища для заморожування. Отриманий осад клітин знову ресуспендують, а клітини переносять у нові колби, що містять середовище для росту. Клітини NCI-H460 можуть прикріпитися до поверхні колби майже за 24 години.
Рівень біобезпеки:
З клітинами раку легенів NCI-H460 працюють та їх утримують у лабораторіях 1-го рівня біобезпеки.
Опубліковано: 2023 | Останній перегляд: травень 2026
Переваги та недоліки клітин NCI-H460
NCI-H460 — це клітинна лінія, яка широко використовується в дослідженнях раку легенів. У цьому розділі розглядаються загальні переваги та недоліки клітин раку легенів NCI-H460.
Переваги
Перевагами клітинної лінії NCI-H460 недрібноклітинного раку легенів є:
-
Походження пухлини
Клітинна лінія NCI-H460 була отримана від пацієнта з великоклітинною карциномою легенів, що є представником саме цього типу раку легенів. Ці клітини використовуються як модель для вивчення біології раку легенів та розробки нових ефективних методів лікування. Клітини NCI-H460 мають пухлиногенний потенціал і можуть бути введені імунодефіцитним мишам для створення in vivo моделей пухлин з метою вивчення росту та розвитку пухлин, а також ефективності потенційних лікарських засобів.
-
Високі темпи проліферації
Клітини NCI-H460 демонструють вищі темпи росту, ніж інші клітинні лінії недрібноклітинного раку легенів, такі як A549. Ця перевага збільшує їхню доступність та допомагає дослідникам проводити відтворювані експерименти, що вимагають оперативного реагування.
Недоліки
Недоліки, пов’язані з клітинами раку легенів NCI-H460, такі:
-
Однорідність
Клітини NCI-H460 є однорідними, оскільки були отримані з пухлини одного пацієнта. Тому їм, як правило, бракує складності та гетерогенності, що спостерігаються в пухлинах пацієнтів.
Застосування клітин NCI-H460 у наукових дослідженнях
Клітини раку легенів NCI-H460 широко використовуються в дослідженнях, пов’язаних із карциномою легенів. Ось деякі з важливих напрямків застосування клітин NCI-H460 у наукових дослідженнях:
- Дослідження раку легенів: Клітини NCI-H460 є безцінною моделлю для вивчення клітинних та молекулярних механізмів, що беруть участь у розвитку, рості та метастазуванні пухлин. Крім того, їх використовують для вивчення ключових сигнальних шляхів, молекулярних мішеней та різних генетичних мутацій, пов’язаних із прогресуванням раку легенів. Для ефективного вивчення цих факторів було проведено низку досліджень на клітинах NCI-H460. У дослідженні, проведеному в 2019 році, було висунуто гіпотезу, що гіперекспресований ядерний субстрат убіквітарного казеїну та циклін-залежних кіназ (NUCKS) бере участь у рості пухлинних клітин шляхом регуляції сигнального шляху PI3K/AKT [1]. Аналогічно, в дослідженні in vitro та in vivo з використанням клітин NCI-H460 вивчалася роль гена eIF4E. Результати показали, що ген eIF4E бере участь у рості карциноми легенів та ангіогенезі, і його можна використовувати як мішень для розробки перспективних препаратів проти раку легенів [2].
- Відкриття та розробка лікарських засобів: клітинна лінія NCI-H460, що походить від раку легенів людини, широко використовується в дослідженнях з відкриття та розробки лікарських засобів. Дослідники використовують ці клітини для вивчення токсичності та ефективності нових потенційних лікарських засобів, цільових терапій та методів лікування, спрямованих переважно на мутації гена KRAS у клітинах NCI-H460. У дослідженні, проведеному Хаоюе Ху та колегами у 2023 році, клітини NCI-H460 використовували для вивчення протиракових ефектів препарату анлотиніб. Результати показали, що анлотиніб частково впливав на ріст клітин раку легенів із мутацією KRAS шляхом інгібування сигнального каскаду MEK/ERK [3]. Аналогічно, фенольна сполука — карнозинова кислота — була протестована на антипроліферативну та проапоптотичну активність з використанням клітин NCI-H460 [4].
- Лікарська резистентність: Клітинна лінія NCI-H460 є ідеальною для вивчення механізмів лікарської резистентності при раку легенів. Дослідники використовують ці клітини для розробки моделей лікарської резистентності з метою виявлення відповідних генів, молекулярних факторів та сигнальних шляхів. Наприклад, у рамках одного з досліджень було створено резистентні до пеметрекседу — багатоцільового антифолатного препарату — клітини NCI-H460 для вивчення молекулярних механізмів резистентності до пеметрекседу в клітинах недрібноклітинного раку легенів [5].
Придбайте клітинну лінію NCI-H460: ваш крок до досліджень раку легенів
Наукові публікації, присвячені клітинам NCI-H460
Ось кілька цікавих наукових публікацій про клітинну лінію NCI-H460, що походить з карциноми легенів.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Molecules» (2023), висунуто гіпотезу, що природний α-1,6-глюкан BBWPW, отриманий з чорної квасолі, пригнічує проліферацію клітин NCI-H460 шляхом регуляції шляху PI3K/AKT/MAPK.
У цій статті, опублікованій у журналі «Phytomedicine» (2019), було досліджено, що діосцин-6′-О-ацетат, нова природна сполука, чинить антипроліферативний ефект на клітини раку легенів NCI-H460.
miRNA-425-5p посилює ріст раку легенів через сигнальний шлях PTEN/PI3K/AKT
Дослідження, опубліковане в журналі «BMC Pulmonary Medicine» (2020), свідчить, що мікроРНК-425-5p сприяє онкогенезу раку легенів через сигнальний шлях PTEN/PI3K/AKT.
У цій статті, опублікованій у журналі «Molecular Medicine Reports» (2017), було висунуто гіпотезу щодо протипухлинного потенціалу та механізмів дії сполуки хіналізарину на клітини NCI-H460 та інші клітини раку легенів.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Food and Function» (2019), підкреслюється потенційний протираковий ефект екстракту Eucalyptus globulus Labill. на клітинах NCI-H460. Результати показали, що рослинний екстракт проявляє ці ефекти завдяки підвищенню експресії p53 у клітинах NCI-H460 та модуляції профілю клітинного циклу.
Ресурси щодо клітинної лінії NCI-H460: протоколи, відео та інше
Ось кілька онлайн-ресурсів, присвячених клітинам раку легенів NCI-H460.
- Трансфекція клітин NCI-H460: Цей відеоурок є покроковим керівництвом щодо трансфекції клітин NCI-H460 плазмідною ДНК.
Наведені нижче посилання містять важливу інформацію щодо культивування клітин H460.
- Клітини NCI-H460: Цей веб-сайт надає важливу інформацію про середовища для клітин NCI-H460, а також про процедури субкультурування, заморожування та розморожування.
- Пасажування клітин NCI-H460: Цей документ містить інструкції щодо пасажування та субкультурування клітинної лінії NCI-H460. Крім того, він допоможе вам ознайомитися з протоколом трансфекції клітин NCI-H460.
Дослідження клітинної лінії NCI-H460: поширені запитання та цікаві факти
Клітинна лінія NCI-H460 походить від пацієнта з великоклітинною карциномою легень, що робить її цінною моделлю для вивчення цього типу раку легень.
Клітини NCI-H460 використовуються для дослідження біології раку легенів, розробки нових методів лікування та оцінки ефективності потенційних ліків. Їх також можна вводити імунодефіцитним мишам для створення моделей пухлин in vivo для вивчення росту і розвитку пухлин.
Клітинні лінії NCI-H460 і A549 отримані з карцином легень, але NCI-H460 представляє великоклітинну карциному, а A549 - аденокарциному. Ця різниця в гістологічному підтипі впливає на їхні характеристики та поведінку.
Так, клітини NCI-H460 мають пухлинний потенціал і можуть бути імплантовані імунодефіцитним мишам для створення моделей ксенотрансплантатів, що полегшує вивчення великоклітинної карциноми легень in vivo.
Поєднання паклітакселу з іншими сполуками може посилити його цитотоксичну дію на клітини NCI-H460, потенційно покращуючи результати лікування раку легенів.
Так, клітини NCI-H460 експресують гіпоксантин-гуанін-фосфорибозилтрансферазу, яка необхідна для метаболізму нуклеотидів і проліферації клітин.
Клітини NCI-H460 широко використовуються в онкологічних і токсикологічних дослідженнях для вивчення росту пухлин, оцінки цитотоксичної дії сполук і вивчення механізмів резистентності до ліків.
Клітини NCI-H460 зазвичай експресують триплетні білки нейрофіламентів, які беруть участь у підтримці цитоскелетної структури і можуть відігравати певну роль у міграції та інвазії ракових клітин.
Шлях κB, серед іншого, залучений до регуляції проліферації та виживання клітин NCI-H460, пропонуючи потенційні мішені для терапевтичного втручання при раку легенів.
Так, клітини NCI-H460 широко використовуються в моделях in vitro для оцінки цитотоксичної дії хіміотерапевтичних препаратів, включаючи паклітаксел і карбоплатин, що допомагає в розробці ефективних методів лікування раку.
Література
- Hu, C. та ін., NUCKS сприяє проліферації, міграції та інвазії клітин раку легенів через сигнальний шлях Pi3k/Akt. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): с. E55–61.
- Qi, X. та ін., EGPI-1, новий інгібітор взаємодії eIF4E/eIF4G, пригнічує ріст клітин раку легенів та ангіогенез через сигнальний шлях Ras/MNK/ERK/eIF4E. «Хіміко-біологічні взаємодії», 2022. 352: с. 109773.
- Ху, Х., та ін., Анлотиніб чинить протиракову дію на клітини раку легенів із мутацією KRAS шляхом пригнічення сигнального шляху MEK/ERK. «Cancer Management and Research», 2020: с. 3579–3587.
- Corveloni, A.C. та ін., Карнозинова кислота виявляє антипроліферативну та проапоптотичну дію в пухлинних клітинах NCI-H460 та непухлинних клітинах легенів IMR-90. Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A, 2020. 83(10): с. 412–421.
- Xu, Y.-L. та ін., Створення та характеристика клітин NCI-H460/PMT, резистентних до пеметрекседу. «Протипухлинні засоби в медичній хімії» (раніше «Сучасна медична хімія — протипухлинні засоби»), 2019. 19(6): с. 731–739.