Клітинна лінія BxPC-3
BxPC-3 — це клітинна лінія раку підшлункової залози, отримана з людини. Вона широко застосовується в дослідженнях раку. Дослідники використовують ці клітини переважно для вивчення біології раку підшлункової залози, визначення терапевтичних мішеней та розробки протиракових препаратів.
- Середовище для культивування
- Для культивування клітинної лінії BxPC-3 використовується середовище RPMI 1640. Для досягнення ідеального росту клітин його доповнюють 10 % сироваткою ембріонів великої рогатої худоби, 2,1 мМ стабільним глутаміном та 2,0 г/л NaHCO3. Середовище слід замінювати 2–3 рази на тиждень.
- Час подвоєння
- Час подвоєння клітин BxPC-3 становить від 48 до 60 годин.
- Тип росту
- BxPC-3 — це адгезивна клітинна лінія.
- Рівень біобезпеки
- BSL-3
- Доступно у
- Cytion — Замовити BxPC-3
Ця стаття містить важливу інформацію про клітинну лінію BxPC-3, яка може значно допомогти вам у роботі з нею. В основному в ній розглядаються:
- Загальна інформація та походження клітинної лінії BxPC-3
- Культивування клітин BxPC-3
- Клітинна лінія BxPC-3: переваги та обмеження
- Застосування клітин BxPC-3 у наукових дослідженнях
- Наукові публікації про клітини BxPC-3
- Ресурси щодо клітинної лінії BxPC-3: протоколи, відео та інше
- Загальна інформація та походження клітинної лінії BxPC-3
- Культивування клітин BxPC-3
- Клітинна лінія BxPC-3: переваги та обмеження
- Застосування клітин BxPC-3 у наукових дослідженнях
- 5. Наукові публікації про клітини BxPC-3
- Ресурси щодо клітинної лінії BxPC-3: протоколи, відео та інше
- Поширені запитання
Загальна інформація та походження клітинної лінії BxPC-3
Знання про походження клітинної лінії має вирішальне значення для її застосування в дослідженнях. Знання її характеристик, включаючи морфологію, розмір клітин та плоїдність, робить її використання простішим та зручнішим. У цій статті ви дізнаєтеся про походження та загальні характеристики клітин BxPC-3: Що таке клітини BxPC-3? Що таке клітинна лінія BxPC-3? Яке походження клітинної лінії BxPC-3? Яка морфологія клітин BxPC-3?
- BxPC-3 — це клітини карциноми підшлункової залози людини, отримані у 1986 році від 61-річної європейської жінки з аденокарциномою підшлункової залози. Ці клітини підтвердили як пухлиногенні навіть після того, як пацієнтка пройшла кілька сеансів радіо- та хіміотерапії. Таким чином, створена клітинна лінія є безцінною моделлю для вивчення розвитку та прогресування раку.
- Клітини BxPC-3 мають морфологію, схожу на епітеліальні клітини.
- Модальна кількість хромосом для BxPC-3 становить 59. Ці клітини мають гомозиготну делецію на хромосомі 18q, яка кодує білок SMAD4/DPC4. Крім того, у клітинній лінії відсутня мутація BxPC-3 kras, поширена серед пухлин підшлункової залози. У цих клітинах раку підшлункової залози також виявлено делецію BxPC-3 braf.
У чому полягає різниця між BxPC3 та PANC-1?
Клітини BxPC-3 PADC (аденокарцинома проток підшлункової залози) та PANC-1 є первинними клітинними лініями раку підшлункової залози з епітеліальною морфологією. При цьому перші клітини мають більше епітеліальних властивостей, тоді як другі виявляють більше мезенхімальних ознак [1].
Культивування клітин BxPC-3
Клітинна лінія BxPC-3 широко використовується в лабораторіях, що займаються дослідженнями раку. Для ефективного культивування цієї клітинної лінії раку підшлункової залози необхідно знати наступні ключові моменти. Ви дізнаєтеся: Який час подвоєння для bxpc3? Як культивувати клітинну лінію BxPC-3?
Ключові моменти культивування клітин BxPC-3
Час подвоєння популяції:
Час подвоєння клітин BxPC-3 становить від 48 до 60 годин.
Адгезивні або в суспензії:
BxPC-3 — це адгезивна клітинна лінія.
Коефіцієнт поділу:
Клітини BxPC-3 субкультурують у співвідношенні 1:2 до 1:4. Клітини промивають 1 x PBS та інкубують із розчином для пасажування, який називається Accutase. Через 8–10 хвилин до клітин додають свіже середовище, а клітини центрифугують. Осад знову суспендують у середовищі, а клітини переносять у нову культуральну посудину для росту.
Середовище для росту:
Для культивування клітинної лінії BxPC-3 використовується середовище RPMI 1640. Воно доповнюється 10% ембріональною сироваткою бика, 2,1 мМ стабільною глутаміном та 2,0 г/л NaHCO3 для досягнення ідеального росту клітин. Середовище слід замінювати 2–3 рази на тиждень.
Умови вирощування:
Культури клітин BxPC-3 утримують у зволоженому інкубаторі при температурі 37 °C, підключеному до джерела 5% CO2.
Зберігання:
Заморожені клітини зазвичай зберігають при температурі нижче -150 °C або у паровій фазі рідкого азоту для збереження життєздатності клітин.
Процес заморожування та середовище:
Для заморожування клітинних культур BxPC-3 можна використовувати CM-1 або CM-ACF. Щоб запобігти шоку клітин, застосовується процес повільного заморожування, який дозволяє знижувати температуру лише на 1 °C.
Процес розморожування:
Заморожені клітини BxPC-3 розморожують у водяній бані, нагрітій до 37 °C, протягом 40–60 секунд. Після того, як залишається невеликий шматок льоду, до клітин додають свіже культуральне середовище та центрифугують для видалення елементів середовища заморожування. Потім осад клітин ресуспендують, а клітини розливають у колбу для росту.
Рівень біобезпеки:
Культури клітин BxPC-3 утримуються в лабораторіях 1-го рівня біобезпеки.
Клітинна лінія BxPC-3: переваги та обмеження
BxPC-3 — це добре відома клітинна лінія аденокарциноми підшлункової залози, що має низку переваг та обмежень. Нижче наведено основні переваги та недоліки цієї клітинної лінії.
Переваги
Основними перевагами клітин BxPC-3 є:
-
Модель раку підшлункової залози in vitro
Клітини BxPC-3, отримані від пацієнтів з аденокарциномою підшлункової залози, демонструють відповідні характеристики, що робить їх придатною моделлю для вивчення поведінки раку підшлункової залози in vitro.
-
Туморогенна клітинна лінія
Клітини BxPC-3 мають пухлиногенні властивості та можуть утворювати пухлини при введенні в організм голих або імунокомпрометованих мишей. Ці пухлини дуже схожі на первинні пухлини аденокарциноми підшлункової залози, що робить модель ксенотрансплантата BxPC-3 ідеальною для вивчення росту та прогресування раку.
Обмеження
Обмеження, пов'язані з клітинною лінією BxPC-3, такі:
-
Перехресне забруднення
Клітинна лінія BxPC-3, як і будь-яка інша, несе ризик перехресного забруднення. Дослідники повинні бути обережними та дотримуватися суворих протоколів запобігання забрудненню під час роботи з цими клітинами.
-
Низька швидкість росту
Клітини BxPC-3 мають відносно повільну швидкість проліферації, час подвоєння становить від 48 до 60 годин. Ця характеристика може вимагати більш тривалих періодів інкубації для конкретних експериментів, що потенційно може спричинити затримки в просуванні досліджень.
Застосування клітин BxPC-3 у дослідженнях
Клітини BxPC-3 мають широке застосування в дослідженнях раку. Найпоширеніші сфери застосування:
- Дослідження раку підшлункової залози: клітини BxPC-3 імітують аденокарциному підшлункової залози і тому використовуються для вивчення генетичних та молекулярних механізмів, що лежать в основі розвитку та росту пухлин. Крім того, дослідники виявляють нові біомаркери та терапевтичні мішені за допомогою цих клітин. Крім того, клітини BxPC-3 значно експресують ангіогенні фактори, а саме інтерлейкін-8 (IL-8), простагландин E2 (PGE2) та фактор росту ендотелію судин (VEGF), що робить їх придатними для вивчення ангіогенезу. Ангіогенез є важливим процесом, пов'язаним із ростом раку та метастазуванням. У дослідженні, опублікованому в 2022 році, було встановлено, що надмірна експресія ламініну-5 гамма-2 (LAMC2) у BxPC3 PDAC (аденокарцинома протоків підшлункової залози) посилює пухлиноутворення шляхом регулювання сигнального шляху BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR [2].
- Відкриття та розробка ліків: клітинна лінія BxPC-3 слугує безцінною моделлю для тестування протиракових препаратів. Дослідники вивчають цитотоксичні, антиметастатичні та апоптотичні ефекти потенційних ліків на BxPC3 PDAC. У дослідженні, проведеному Александрією Тернер та колегами у 2020 році, вивчалися апоптотичні властивості екстрактів плодів Elaeocarpus reticulatus на клітинах раку підшлункової залози BxPC-3 [3]. Аналогічно, у 2020 році було проведено дослідження, яке визначило протираковий потенціал метанольного екстракту рослини під назвою Oxialis obtriangulata на клітинах BxPC-3. Крім того, дослідники також вивчили механізм клітинної дії, за допомогою якого рослинний екстракт чинив терапевтичний ефект [4].
5. Наукові публікації про клітини BxPC-3
У цьому розділі наведено перелік найбільш цитованих та цікавих публікацій, присвячених клітинній лінії BxPC-3.
У цій публікації в журналі Chemico-Biological Interactions (2020) досліджували апоптотичний вплив природного продукту, лікокумарону, на клітини раку підшлункової залози BxPC-3.
Ця наукова стаття була опублікована в журналі Anticancer Research (2022). У дослідженні висловлено припущення, що гідроксихлорохін спричиняє загибель клітин BxPC3 шляхом інгібування гена BCL-XL.
Це дослідження було опубліковано в 2020 році в журналі «Journal of Cellular Biochemistry». У дослідженні стверджується, що природна сполука, салідрозид, виявляє протиракову активність у клітинах BxPC-3 шляхом регулювання сигнального каскаду HIF-1α (фактор, індукований гіпоксією) та LOXL2.
Ця стаття в журналі «Biomedicine & Pharmacotherapy» припускає, що ібрутиніб може бути використаний як ефективний радіосенсибілізатор у пацієнтів з раком підшлункової залози. Дослідження in vitro на клітинах BxPC-3 показує, що він зменшує фосфорилювання EGFR у BxPC3 та експресію pAKT і генів нижчого рівня, експресія яких підвищується під впливом радіотерапії.
Хелідонін індукує апоптоз через регуляцію GADD45a-p53 у клітинах раку підшлункової залози людини
Це дослідження, опубліковане в журналі «Integrative Cancer Therapies», припускає, що натуральний продукт, хелідонін, проявляє апоптотичну активність у клітинах підшлункової залози людини BxPC-3 шляхом регулювання сигнальних шляхів BxPC3 p53 та GADD45a.
Ресурси для клітинної лінії BxPC-3: протоколи, відео та інше
Клітинна лінія BxPC-3 має багато привабливих переваг, що роблять її придатною для використання в дослідженнях. Багато онлайн-ресурсів про клітинну лінію BxPC-3 згадують протоколи її обробки, утримання та трансфекції.
- Трансфекція BxPC3: це відео є покроковим посібником з вивчення протоколу трансфекції клітин BxPC-3.
Цей розділ статті містить кілька посилань, що пояснюють протоколи культивування клітин BxPC3.
- Культура клітин BxPC3: Цей веб-сайт допоможе вам ознайомитися з протоколами субкультурування та роботи з кріоконсервованими та проліферативними культурами BxPC-3.
Посилання
- Kim, Y., et al., Порівняльний протеомний аналіз клітинних ліній аденокарциноми протоків підшлункової залози. Mol Cells, 2014. 37(12): с. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Надмірна експресія ламініну-5 гамма-2 сприяє пухлиноутворенню аденокарциноми протоків підшлункової залози через каскад EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): с. 362.
- Тернер, А. та ін., Екстракти плодів Elaeocarpus reticulatus знижують життєздатність та індукують апоптоз у клітинах раку підшлункової залози in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: с. 2073–2084.
- An, E.-J. та ін., Протираковий потенціал Oxialis obtriangulata у клітинах раку підшлункової залози через регуляцію шляху, опосередкованого ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): с. 2301.