Клітини Раджі — нові відкриття у вивченні лімфоми

Вперше виділені в 1963 році Р. Дж. В. Пулвертафтом із зразка лімфоми Беркітта, клітини Раджі стали наріжним каменем у дослідженні лімфоми та імунології. Ці клітини, що характеризуються лімфобластоподібним виглядом та високою експресією CD19 — ключового регулятора сигналізації рецепторів В-клітин — відіграють вирішальну роль у вивченні складнощів лімфоми та випробуванні нових терапевтичних стратегій. Як неадерзивні клітини, що проліферують у вільноплаваючих агрегатах, клітини Раджі особливо відомі своєю корисністю в оцінці імунотерапевтичних підходів, зокрема їх застосування у дослідженні біспецифічних антитіл, спрямованих на лікування неходжкінської В-клітинної лімфоми. Крім того, експресія BCMA робить їх незамінними в дослідженнях множинної мієломи, що підкреслює їх широку застосовність та вирішальну роль у просуванні досліджень раку.

Огляд характеристик та походження клітинної лінії Raji

Перед початком досліджень надзвичайно важливо зрозуміти основні властивості та походження клітинної лінії. У цьому розділі наведено інформацію про клітини Раджі, зокрема про їхнє походження, морфологію та основні особливості.

• Клітинна лінія Raji, отримана з лівої верхньої щелепи 11-річного нігерійського хлопчика з лімфомою Беркітта, була створена Р. Дж. В. Пулвертафтом у 1963 році та надає унікальну можливість для вивчення В-клітинних лімфом.
• Клітини Raji добре розмножуються у суспензійних культурах, зазвичай утворюючи скупчення, розмір і щільність яких можуть варіюватися, що свідчить про їхню адаптивність in vitro.
• Ці клітини відрізняються невеликим діаметром (5–8 мкм), об’ємною цитоплазмою та ядром з характерним вм’ятинчастим контуром, що зумовлює їхню характерну лімфобластоподібну морфологію.
• Маючи стабільний каріотип і диплоїдне число хромосом, клітини Raji слугують надійною моделлю для генетичних досліджень у галузі онкології.

Культивування клітин Raji

Опанування методів культивування клітинної лінії, такої як клітини Раджі, вимагає знання їхніх специфічних вимог до культивування. До основних аспектів, які слід враховувати, належать час подвоєння клітин, рекомендовані культуральні середовища, характер росту (у суспензії або на поверхні), оптимальна щільність висівання та необхідні заходи біобезпеки.

Ключові моменти культивування клітин Raji

• Час подвоєння популяції: Час подвоєння популяції клітин Раджі становить приблизно 23,2 години, що вимагає регулярного моніторингу для підтримання оптимального стану клітин.

• Характер росту: Як правило, клітини Раджі проліферують у суспензії, утворюючи динамічні скупчення, що підкреслює їх лімфобластоподібну природу.

• Щільність висівання: Для оптимального росту початкову щільність висівання підтримують на рівні 1–2 × 10⁵ клітин/мл. Оскільки клітини Раджі ростуть у суспензії, вони не потребують розчинів для відшарування, а розводяться безпосередньо у культуральному середовищі до бажаної щільності.

• Культуральне середовище: Рекомендованим середовищем для клітин Raji є RPMI 1640, збагачене 2,0 мМ L-глутаміну, 2,0 г/л L-глюкози, 2,0 г/л NaHCO₃ та 10 % сироватки ембріонів великої рогатої худоби (FBS) для забезпечення інтенсивного росту клітин.

• Оптимальні умови росту: Клітини Раджі добре ростуть у контрольованому середовищі при температурі 37 °C та вмісті 5 % CO₂ у зволоженому інкубаторі, що відтворює їхні фізіологічні умови.

• Зберігання клітин: Для довгострокового зберігання клітини Раджі зберігають у паровій фазі рідкого азоту при температурі нижче -150 °C, що забезпечує тривалу життєздатність клітин.

• Протокол заморожування: Використовуючи CM-1 або CM-ACF як середовища для заморожування, клітини Раджі найкраще зберігаються за допомогою процесу поступового охолодження, що дозволяє мінімізувати клітинний стрес та зберегти життєздатність.

• Розморожування клітин Раджі: Розморожування полягає у короткочасному нагріванні клітин у водяній бані при температурі 37 °C доти, доки не залишиться невеликий шматок льоду. Після розморожування клітини обережно ресуспендують у свіжому культуральному середовищі та або центрифугують для видалення середовища для заморожування, або безпосередньо переносять у нові колби з подальшою заміною середовища через 24 години для видалення залишків середовища для заморожування.

• Питання біобезпеки: Культивування клітин Раджі вимагає дотримання вимог 1-го рівня біобезпеки, що забезпечує безпеку поводження з клітинами та дотримання відповідних процедур у лабораторії.

Розуміння та дотримання цих ключових методів культивування сприятиме успішному росту та підтримці клітин Раджі, що дозволить ефективно використовувати їх у дослідженнях лімфом та в інших сферах.

Раджі: Новітні досягнення в наукових дослідженнях

• Інсайти з досліджень раку: Клітини Раджі, що походять з лімфоми Беркітта, є незамінними в галузі досліджень раку, особливо для розшифрування складнощів злоякісних новоутворень В-клітин. Ці клітини відіграють ключову роль у вивченні наслідків мутацій гена p53, що є характерною ознакою прогресування багатьох видів раку. Ці дослідження мають вирішальне значення для виявлення потенційних механізмів резистентності до сучасних методів лікування та відкриття шляху до нових терапевтичних стратегій. Універсальність клітин Раджі розширює їхнє застосування за межі лімфоми Беркітта, надаючи ширшу перспективу на гематологічні злоякісні новоутворення та збагачуючи наш арсенал онкологічних методів лікування.
• Інновації в імунології: У імунології важко переоцінити значення клітин Раджі, що пояснюється експресією ними ключових поверхневих молекул, які є невід’ємною частиною імунної функції. Використовувані у відомому аналізі на клітинах Raji, ці клітини дають змогу зазирнути у взаємодію між імунними комплексами та В-клітинами. Розуміння цих взаємодій є необхідним для розкриття механізмів уникнення імунної відповіді раковими клітинами, що, у свою чергу, сприяє розробці революційних імунотерапій та вакцин, спрямованих проти лейкемії та інших захворювань В-клітин.

Реалізація науково-дослідного потенціалу: найкращі клітинні лінії Raji для вашої лабораторії

Вибрані дослідження з використанням клітин Raji

• Дослідження протиракового потенціалу мелоксикаму на клітинах Raji: Дослідження 2022 року, опубліковане в International Journal of Dentistry, вивчає вплив мелоксикаму на клітини лімфоми Raji, демонструючи його ефективність у пригніченні проліферації клітин та індукції апоптозу.
• Об’єднання сил: CAR-T-клітини CD19 та ібрутиніб проти клітин Raji: У цій статті, опублікованій у 2020 році в журналі «Cancer Science», детально розглядаються синергетичні ефекти терапії CAR-T-клітинами CD19 та препарату ібрутиніб на клітини Raji, що демонструє посилену протилімфомальну дію.
• Націлювання на lncRNA PVT1 у клітинах Raji: стратегія стримування проліферації. У дослідженні, висвітленому у публікації журналу «Oncology Letters» за 2019 рік, показано, як пригнічення lncRNA PVT1 може ефективно зменшити проліферацію клітин Raji, що дає уявлення про регуляцію клітинного циклу.
• Порушення шляху JAK2/STAT3 у клітинах Raji: шлях до інгібування проліферації Дослідження, опубліковане у 2018 році в журналі «Medical Science Monitor», зосереджується на впливі інгібування шляху JAK2/STAT3 у клітинах Raji, що має значення для проліферації, апоптозу та управління окислювальним стресом.
• Розшифровка проникнення вірусу Епштейна-Барра в NK-клітини: висновки з кокультури клітин Raji та NK-клітин У цікавій публікації 2018 року в журналі «Cellular Immunology» досліджується проникнення вірусу Епштейна-Барра в NK-клітини незалежно від рецептора CD21; для цього використовуються кокультури клітин Raji та NK-клітин, що дозволяє пролити світло на динаміку взаємодії вірусу та клітин.