Клітини 4T1 — важливі відомості про дослідження клітин раку молочної залози та їх застосування
4T1 — це трансплантована лінія клітин раку молочної залози мишей. Вона широко використовується як генетично ідентична модель пухлини in vitro для дослідження раку молочної залози у людини. Клітини 4T1 мають високу інвазивність та пухлиногенність; вони схильні до метастазування з первинного вогнища пухлини в молочній залозі в інші органи, зокрема печінку, лімфатичні вузли, легені, кістки та мозок, тому ідеально підходять для вивчення метастазування раку молочної залози [1].
- Середовище для культивування
- Для культивування клітин 4T1 використовується середовище RPMI 1640. Для ідеального росту клітин до культурального середовища додають 10% ембріональної сироватки бика (FBS), 2,0 г/л NaHCO3 та 2,1 мМ стабільного глутаміну.
- Час подвоєння
- Середній час подвоєння популяції клітин раку молочної залози 4T1 становить 14 годин.
- Тип росту
- 4T1 — це адгезивна клітинна лінія.
- Рівень біобезпеки
- BSL-1
- Доступно у
- Cytion — Замовити 4T1
- Загальні характеристики та походження клітин 4T1
- Інформація про культивування клітинної лінії 4T1
- Клітинна лінія T1: переваги та недоліки
- Придбати клітинну лінію 4T1: високоякісна модель раку молочної залози
- Клітинна лінія T1: застосування в дослідженнях раку
- Клітини 4T1: наукові публікації
- Ресурси для клітинної лінії 4T1: протоколи, відео та інше
- Поширені запитання про клітинну лінію 4T1
- Посилання
- Поширені запитання
Загальні характеристики та походження клітин 4T1
Перед початком роботи з клітинною лінією необхідно ознайомитися з її походженням та загальними характеристиками. У цьому розділі ми розглянули основні відомості про клітини раку молочної залози 4T1. Наприклад, що таке клітини 4T1? Які характеристики має клітинна лінія 4T1? Яке походження клітинної лінії 4T1? Яка морфологія клітинної лінії 4T1?
- 4T1 — це клітинна лінія пухлин молочної залози, що походить від пухлини молочної залози, яка спонтанно виникла у мишей лінії BALB/c. Ці високоінвазивні та онкогенні клітини дуже нагадують поведінку раку молочної залози людини з точки зору росту та метастатичного поширення. Зокрема, модель пухлини 4T1 досліджує потрійно-негативний рак молочної залози (TNBC).
- Клітини 4T1 є адгезивними та мають морфологію, схожу на епітеліальні клітини.
Клітинна лінія 4T1 проти EMT-6
4T1 та EMT-6 — це неімуногенні мишачі клітинні моделі для досліджень потрійного негативного раку молочної залози. У цьому випадку клітини 4T1 є більш агресивними та інвазивними пухлинними клітинами, ніж клітини EMT-6, які мають менш інвазивні властивості [2].
Клітини 4T1 проти 4T07
4T07 також є лінією ракових клітин мишей. Основна відмінність між клітинами 4T1 та 4T07 полягає в тому, що клітини 4T1 можуть залишати місце первинної пухлини та поширюватися, утворюючи видимі вторинні метастази, тоді як клітини 4T07 не можуть утворювати видимі метастази, незважаючи на те, що залишають місце первинної пухлини [3].
Інформація щодо культивування клітинної лінії 4T1
Клітинна лінія раку молочної залози 4T1 має широке застосування в біомедичних дослідженнях. Для культивування цих клітин слід ознайомитися з наступними ключовими моментами: що таке час подвоєння 4T1? Як культивуються клітини 4T1? Яка щільність висівання клітин для 4T1?
Ключові моменти культивування клітин 4T1
Час подвоєння:
Середній час подвоєння популяції клітин раку молочної залози 4T1 становить 14 годин.
Адгезивні або в суспензії:
4T1 — це адгезивна клітинна лінія.
Коефіцієнт субкультури:
Для клітинної лінії 4T1 тринегативного раку молочної залози рекомендується коефіцієнт поділу 1:6 та 1:8. Для поділу клітини промивають PBS та інкубують з ферментом Accutase протягом 8–10 хвилин. Дисоційовані клітини збирають шляхом центрифугування та ресуспендують у свіжому середовищі. Ресуспендовані клітини розливають у нову колбу для росту.
Середовище для росту:
Для культивування клітин 4T1 використовується середовище RPMI 1640. Для ідеального росту клітин у культуральне середовище додають 10% ембріональної сироватки бика (FBS), 2,0 г/л NaHCO3 та 2,1 мМ стабільного глутаміну.
Умови росту:
Пухлинні клітини 4T1 утримують у зволоженому інкубаторі при температурі 37 °C з подачею 5 % CO2.
Зберігання:
Клітини 4T1 слід зберігати при температурі нижче -150 °C, тобто в електричній морозильній камері або в паровій фазі рідкого азоту, для збереження життєздатності клітин.
Процес заморожування та середовище:
Для клітинної лінії 4T1 рекомендується використовувати CM-1 або CM-ACF. Перевага надається методу повільного заморожування, оскільки він захищає життєздатність клітин, забезпечуючи поступове зниження температури на 1 °C.
Процес розморожування:
Флакон із замороженими клітинами тримають у водяній бані при температурі 37 °C протягом декількох секунд, доки клітини не розморозяться і не залишиться лише невеликий шматок льоду. Ці клітини ресуспендують у свіжому середовищі та переливають у колбу для культивування. Після 24 годин інкубації середовище замінюють, щоб видалити компоненти середовища для заморожування.
Рівень біобезпеки:
Для культивування клітин раку молочної залози 4T1 рекомендується лабораторія рівня біобезпеки 1.
Клітинна лінія T1: переваги та недоліки
У цьому розділі статті розглядаються переваги та недоліки, пов'язані з метастатичною моделлю 4T1.
Переваги
Основними перевагами клітинної лінії 4T1 є:
- Онкогенність:
4T1 — це клітинна лінія з високою пухлиногенністю. Ці клітини мають здатність утворювати сингенну мишачу модель 4T1 для дослідження раку молочної залози при введенні мишам. Тому модель 4T1 ідеально підходить для вивчення розвитку, росту та метастазування пухлин. Крім того, вона корисна для скринінгу та оцінки лікарських препаратів.
- Модель метастазування in vitro:
Модель 4T1 має природну схильність до метастазування, що дозволяє дослідникам ефективно вивчати основні механізми та шляхи, залучені до процесу метастазування. Більше того, клітини 4T1 є резистентними до 6-тіогуаніну. Це сприяє ефективному виявленню мікрометастатичних клітин з підвищеною точністю порівняно з іншими моделями, оскільки усуває необхідність зважування органів-мішеней та підрахунку вузлів.
Недоліки
Недоліком клітинної лінії 4T1 є:
- Агресивність/висока швидкість росту:
Клітинна лінія 4T1 є високоагресивною клітинною лінією потрійного негативного раку молочної залози. Через швидкі темпи росту використання цієї клітинної лінії в довгострокових експериментах та контроль експериментальних змінних стає складним завданням.
Придбати клітинну лінію 4T1: високоякісна модель раку молочної залози
Клітинна лінія 4T1: застосування в онкологічних дослідженнях
Клітинна лінія мишачої моделі 4T1 є цінним дослідницьким інструментом для вивчення біології раку та оцінки нових методів лікування. Основні сфери застосування клітин 4T1 наведені нижче:
Біологія раку
Клітинна лінія 4T1 широко використовується для вивчення розвитку та росту раку. Це ідеальна модель in vitro для дослідження та вивчення різних клітинних і молекулярних механізмів, що беруть участь у прогресуванні пухлини та метастазуванні. Крім того, вона може розкрити роль сигнальних шляхів клітин, мікросередовища та експресії генів у цих процесах. У дослідженні, проведеному в 2019 році, клітини 4T1 використовували для виявлення механізмів, що лежать в основі інвазії та міграції ракових клітин. Результати показали, що в цих процесах беруть участь гени STAT3, MMP2 та MMP9, а інгібування цих генів може значно обмежити міграцію та інвазію ракових клітин [4]. Подібні дослідження також вказали на кілька інших сигнальних шляхів, що беруть участь у розвитку пухлин та метастазуванні.
Крім того, модель 4T1 відіграє важливу роль у розумінні мікросередовища раку молочної залози, включаючи інфільтрацію імунних клітин та ріст первинної пухлини. Дослідження, зосереджені на мікросередовищі пухлини 4T1, дали значні уявлення про роль імунних клітин та цитокінів, таких як експресія CXCL13, у прогресуванні пухлини. Модель також допомагає у дослідженні ніш метастазування та метастазування пухлин, особливо на пізніх стадіях раку молочної залози, де переважає колонізація карциноми молочної залози.
Дослідження в галузі терапії раку
Клітинна лінія 4T1 широко застосовується в дослідженнях терапії раку для скринінгу та оцінки нових методів лікування. В одному дослідженні вивчався цитотоксичний потенціал наночастинок заліза, синтезованих «зеленим» методом з екстракту розмарину (Rosemary-FeNPs), та чистого екстракту розмарину на клітинній лінії 4T1. Результати дослідження показали, що Rosemary-FeNPs є більш перспективними, ніж чистий екстракт [5]. Аналогічно, у дослідженні, проведеному в 2021 році, вивчався протипухлинний потенціал екстракту імбиру на клітинах раку молочної залози 4T1 та мишачій моделі 4T1 [6].
Окрім натуральних екстрактів, клітинна лінія 4T1 використовується для оцінки ефективності традиційних хіміотерапевтичних препаратів. Наприклад, дослідження, що передбачали поєднання цисплатину з іншими методами лікування, продемонстрували посилення загибелі пухлинних клітин та уповільнення прогресування пухлини на моделі 4T1. Введення люциферази світлячка в клітини 4T1 дозволило проводити візуалізацію росту пухлини та метастатичного фенотипу в режимі реального часу, що спростило оцінку впливу різних методів лікування.
Крім того, резистентність клітинної лінії 4T1 до 6-тіогуаніну сприяла дослідженню мікрометастатичних клітин, покращивши виявлення та аналіз метастазування. Ця клітинна лінія також відіграє вирішальну роль у вивченні протипухлинного імунітету та ефектів імунотерапії, особливо в контексті ортотопічних мишачих моделей, де дослідники можуть точно імітувати рак у людини.
Загалом клітинна лінія 4T1 залишається незамінним інструментом в онкологічних дослідженнях — від розуміння фундаментальних механізмів біології раку до розробки та випробування нових терапевтичних стратегій.
Клітини 4T1: Наукові публікації
У цьому розділі статті розглядаються кілька цікавих і найбільш цитованих публікацій про клітини 4T1.
Ця стаття була опублікована в 2018 році в журналі «Journal of Photochemistry and Photobiology». У дослідженні було висунуто гіпотезу, що наночастинки срібла, синтезовані з Madhuca longifolia, чинять антипроліферативний ефект на пухлинні клітини 4T1 шляхом деградації клітинної стінки та генерації АФК.
Цитотоксичність та апоптотичні ефекти вербаскозиду на клітинній лінії раку молочної залози 4T1
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі BMC Pharmacology and Toxicology (2021), було висунуто гіпотезу, що вербаскозид, природна сполука, індукував апоптотичні ефекти в клітинах раку молочної залози 4T1 через TLR4-сигналізацію.
Це дослідження було опубліковано в журналі «Integrative Cancer Therapies» у 2020 році. У цьому дослідженні використовували клітини 4T1 для створення сингенної мишачої моделі 4T1 та досліджували протираковий потенціал еупаторину за її допомогою. Еупаторин уповільнював розвиток пухлини в мишачій моделі 4T1.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Iranian Journal of Pharmaceutical Research» (2018), було висунуто припущення, що лікарська рослина Viola odorata має потенційний цитотоксичний ефект на клітини 4T1.
У цьому дослідженні було висунуто припущення, що тверді ліпідні наночастинки, наповнені доцетакселом (DTX-loaded SLNs), можуть бути перспективним засобом для лікування раку молочної залози та запобігання метастазуванню, оскільки вони обмежують ріст пухлини та метастазування в легені клітин 4T1.
Ресурси щодо клітинної лінії 4T1: протоколи, відео та інше
Нижче наведено кілька ресурсів щодо клітин 4T1:
- Посібник з трансфекції 4T1: це відео є покроковим керівництвом щодо проведення трансфекції клітинної лінії 4T1.
- Субкультурування клітинної лінії: це відео пояснює протокол субкультурування адгезивних клітинних ліній.
Наступне посилання містить протокол культивування клітин 4T1:
- Клітинна лінія 4T1: Це посилання на веб-сайт містить всю корисну інформацію щодо роботи з культурами 4T1. Воно містить інформацію про культуральні середовища, протоколи роботи з кріоконсервованими культурами та проліферуючими культурами.
Часті запитання про клітинну лінію 4T1
Блог 4T1 містить аналітичні матеріали, новини про дослідження та опис експериментальних методів, пов’язаних із клітинною лінією 4T1 раку молочної залози, яка широко використовується в дослідженнях росту та метастазування раку молочної залози.
Лінія клітин раку молочної залози, зокрема модель 4T1, має важливе значення для вивчення росту пухлини та метастазування, а також інфільтрації імунних клітин у мікросередовищі раку молочної залози.
Експресія CXCL13 відіграє ключову роль у дослідженнях раку молочної залози, оскільки вона бере участь в інфільтрації імунних клітин та формуванні ніш для метастазування, що дозволяє краще зрозуміти механізми прогресування пухлини та метастазування.
Модель пухлини залози, така як модель 4T1, використовується для моделювання пізніх стадій раку молочної залози та колонізації карциноми молочної залози, що допомагає дослідникам зрозуміти перебіг захворювання та можливі методи лікування.
Ріст первинної пухлини є ключовим фактором у дослідженнях метастазування раку, створюючи основу для вивчення механізмів поширення пухлин на інші органи, як, наприклад, у моделі внутрішньопротокового раку у мишей.
Модель раку молочної залози 4T1 у мишей використовується для дослідження протипухлинного імунітету, комбінованої терапії з використанням цисплатину та загибелі пухлинних клітин, що дає комплексне уявлення про ефективність лікування раку молочної залози.
Ортотопічні мишачі моделі, зокрема модель 4T1, відіграють ключову роль у дослідженні мікросередовища пухлини, імунної відповіді та метастазування в умовах, що максимально наближені до перебігу раку молочної залози у людини.
Модель 4T1, придатна для візуалізації, дозволяє дослідникам спостерігати за ростом пухлини та метастазуванням у режимі реального часу, що сприяє вивченню кісткових метастазів, об’єму пухлин 4T1 та ефективності таких методів лікування, як цисплатин.
Імунотерапія раку спрямована на ніші метастазування шляхом посилення здатності імунної системи боротися з раковими клітинами; часто її застосовують у поєднанні з іншими методами лікування, такими як цисплатин, для підвищення загальної ефективності.
Люцифераза світлячка використовується при трансформації клітин 4T1 для моніторингу росту пухлини та метастатичного фенотипу, стаючи потужним інструментом для дослідників у вивченні прогресування раку та терапевтичних втручань.
Література
- Pulaski, B.A. та S. Ostrand-Rosenberg, Модель пухлини молочної залози миші 4T1. Curr Protoc Immunol, 2001. Розділ 20: с. 20.2.
- Максвелл, К.Г., Імуномодуляція клітин раку молочної залози для вакцинації цілої пухлини. 2016.
- Walker, I. та ін., Пухлини молочної залози індукують центральну експресію прозапальних цитокінів, але не викликають поведінкових порушень у мишей Balb/C. Scientific Reports, 2017. 7(1): с. 1-13.
- Лі, Ю. та ін., Інгібування сигнального шляху Stat3 природним продуктом пектолінарігеніном послаблює метастазування раку молочної залози. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: с. 1195.
- Farshchi, H.K., et al., «Зелений синтез наночастинок заліза за допомогою екстракту розмарину та оцінка цитотоксичного ефекту на лініях ракових клітин». Biocatalysis and agricultural biotechnology, 2018. 16: с. 54–62.
- Gholizadeh, A.P., et al., Вплив екстракту імбиру на клітинну лінію раку молочної залози 4T1 у мишей Balb/c. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): с. 43-49.