Клітини U87MG - дослідження гліобластоми з використанням U87MG та її вплив на дослідження раку мозку
КлітиниU-87 MG, лінії первинної гліобластоми людини, широко використовуються в біологічних дослідженнях. Зокрема, ці клітини застосовуються в неврології та імуноонкології.
Загальна характеристика та походження клітинної лінії U-87 MG
У цьому розділі ми розглянемо походження та загальні характеристики клітинної лінії U87. Ви дізнаєтесь Що таке клітини U-87 MG? Звідки походять клітини U87? Яка повна форма U-87 MG? Наскільки великі клітини U87? Яка морфологія клітинної лінії U87?
- Клітинна лінія U87 - це клітинна лінія гліобластоми, астроцитоми. Вона була створена в 1966 році в Уппсальському університеті. Клітини були отримані від 44-річного чоловіка європеоїдної раси, який страждав на гліобластому. Ця клітинна лінія має офіційну назву U 87 MG, що розшифровується як Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Клітини U 87 MG мають епітеліальну клітинну морфологію.
- Розмір клітин U 87 MG коливається від 12 до 14 мкм в діаметрі.
- Ця клітинна лінія гліобластоми людини є гіподиплоїдною і має модальну хромосому 44 у приблизно 48% клітинної популяції. Однак, більш високі плоїдності також існують у 5,9% клітинної популяції.
Інформація про культивування клітин U-87 MG
Перед початком роботи з клітинами U 87 MG необхідно ознайомитися з наступними ключовими моментами культивування цих клітин гліобластоми. Зокрема, Ви повинні знати: Який час подвоєння популяції клітин U 87 MG? Які середовища використовують для культивування клітин U87? Яка щільність посіву клітин лінії U 87 MG?
Ключові моменти при культивуванні клітин U-87 MG
|
Час подвоєння популяції: |
Час подвоєння популяції клітин U 87 MG становить 18-38 годин. |
|
Адгезія або суспензія: |
U 87 MG є адгезивною клітинною лінією. Клітини мають витягнуту форму і ростуть як моношари. |
|
Щільність посіву: |
Клітинну лінію гліобластоми U 87 MG рекомендується висівати при щільності клітин 1 х104 клітин/см2. Адгезовані клітини U87 відмивають 1 х PBS та інкубують з розчином аккутази. Потім дисоційовані клітини центрифугують і відновлюють. Клітини обережно ресуспендують і додають у нові колби з живильним середовищем. |
|
Поживне середовище: |
Клітини лінії U 87 MG культивують в EMEM (мінімальне основне середовище Eagle), доповнене 1,0 г/л L-глюкози, 2,0 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO3, 1% NEAA, 1 мМ пірувату натрію і 10% розчином FBS. Поживне середовище слід оновлювати кожні 2-3 дні. |
|
Умови вирощування: |
Для оптимального росту клітини U-87 MG потребують зволоженого інкубатора з 5% подачею CO2 і температурою 37°C. |
|
Зберігання: |
Клітини U87 зберігають або в паровій фазі рідкого азоту, або при температурі нижче -150°С для підтримки максимальної життєздатності клітин гліобластоми. |
|
Процес заморожування та середовище: |
Для заморожування клітин U 87 MG підходять заморожувальні середовища CM-1 або CM-ACF. Рекомендується повільний процес заморожування, оскільки він захищає клітини від будь-якого шоку і зберігає їх життєздатність. |
|
Процес розморожування: |
Заморожені пробірки з клітинами лінії U-87 MG розморожують на водяній бані при 37°C. До клітин додають живильне середовище, ресуспендують і розподіляють для культивування в нові колби. На відміну від цього, клітини U87 можна центрифугувати для видалення заморожувальних середовищ, а потім культивувати. |
|
Рівень біобезпеки: |
Для роботи з культурами клітин U 87 MG необхідний рівень біобезпеки 1. |
Переваги та недоліки клітин U-87 MG
Коли ми думаємо про клітинну лінію, перше, що спадає нам на думку: які переваги використання клітин U-87 MG? Які недоліки мають клітини U87?
Переваги
Клітинні лінії U 87 MG широко використовуються в дослідженнях. Нижче наведено декілька переваг, пов'язаних з цією клітинною лінією:
Переваги
- Легкість у вирощуванні: Клітини U 87 MG легко підтримувати в культурі. Вони не потребують вибагливих або складних вимог до культивування клітин
- Однорідність: U-87 MG - це однорідна клітинна лінія. Більшість клітин в популяції мають однаковий генетичний склад і, таким чином, мають схожі характеристики. Ці клітини використовуються для вивчення клітинних процесів, скринінгу лікарських препаратів і тестування
- Добре охарактеризована: Ця клітинна лінія гліобластоми добре охарактеризована за характеристиками росту, морфологією та експресією генів, що робить її цінним дослідницьким інструментом
Недоліки
- Обмежене застосування: U 87 MG - це клітинна лінія гліобластоми, тому її застосування в першу чергу обмежується вивченням гліобластом і молекулярних механізмів, що лежать в їх основі. Вона може не підходити для дослідження інших типів раку.
Дослідження з використанням клітин лінії U-87 MG
Клітинна лінія гліобластоми U87MG широко використовується в дослідженнях раку, особливо в дослідженнях гліобластоми. Деякі з дослідницьких застосувань клітин U 87 MG є наступними:
- Дослідження біології раку: Клітинна лінія U87 використовується для вивчення росту і розвитку раку, молекулярних механізмів, що лежать в його основі, сигнальних шляхів і мікрооточення пухлини. Дослідження, опубліковане в 2020 році, використовувало модель гліобластоми in vitro, клітинну лінію U-87 MG, для вивчення гена BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) в якості терапевтичної мішені. Результати показали, що ген BMAL1 пригнічує проліферацію, міграцію та інвазію клітин гліобластоми шляхом пригнічення експресії генів цикліну B1, металопротеїнази-9 та фосфо-AKT [1]. В іншому дослідженні, проведеному в 2019 році на лінії клітин U87, було встановлено, що знижена експресія транскрипційного фактора фактора некрозу пухлин-альфа (LITAF), індукованого ліпополісахаридами, може підвищувати радіочутливість клітин гліоми через посилення регуляції шляху FOXO-1. LITAF також відомий як p53-індукований ген 7 (PIG7) [2].
- Відкриття та розробка ліків: Клітини U-87 MG можна використовувати для скринінгу та тестування ліків, що дозволяє дослідникам виявляти нові потенційні протиракові препарати та оцінювати їх ефективність і токсичність. В якості дослідження використовували клітинну лінію гліобластоми U 87 MG для оцінки протиракового потенціалу антиоксидантної та протиракової активності екстракту Inula helenium (L.) [3]. Аналогічно, в іншій публікації згадується використання клітинної лінії U87 для перевірки цитотоксичної та апоптотичної дії рослинних екстрактів [4]. Крім того, в роботі, опублікованій у 2018 році, досліджували цитотоксичну дію сесквітерпенових алкалоїдів, виділених з рослин нуфар, на чутливі та резистентні до лікарських препаратів клітинні лінії U 87 MG [5].
Замовте клітинну лінію гліоми U87 MG вже сьогодні
Клітинна лінія U-87 MG: Наукові публікації
Нижче наведені деякі відомі наукові публікації за участю клітинної лінії U 87 MG.
Гіпоксія посилює міграцію та інвазію клітин гліобластоми людини U87 через PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α шлях
У статті, опублікованій в Neuroreport 2018, висловлено припущення, що гіпоксія може посилювати міграцію та інвазію клітин гліобластоми людини шляхом регулювання сигнального шляху PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Це дослідження опубліковане в журналі Frontiers in Pharmacology за 2020 рік. Результати дослідження свідчать, що флавоноїд еріодиктиол чинить протиракову дію на клітинну лінію U87 та пригнічує проліферацію і метастазування клітин. Протипухлинні властивості ериодиктиолу реалізуються через модуляцію PI3K/Akt/NF-κB шляху.
Це дослідження в журналі "Доказова комплементарна та альтернативна медицина" (2018) свідчить про те, що китайська рослинна формула під назвою "Сіхуан" може індукувати апоптоз у клітинах U87 шляхом націлювання на каскад Akt/mTOR/FOXO1, що активується АФК.
LITAF підвищує радіочутливість клітин гліоми людини через шлях FoxO1
Ця наукова робота була опублікована в журналі Cellular and Molecular Neurobiology в 2019 році. У дослідженні припускається, що фактор транскрипції LITAF знижує та підвищує радіочутливість клітин гліоми шляхом регуляції сигнального шляху FOXO-1.
Стаття опублікована в журналі Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Дослідники використовували клітини U 87 MG для вивчення цитотоксичної дії наночастинок PLGA, навантажених куркуміном.
Ресурси для клітин U-87 MG: Протоколи, відео та інше
Клітинна лінія гліобластоми U87MG використовується в багатьох лабораторіях з дослідження раку. Ось декілька ресурсів, що містять інформацію про цю клітинну лінію:
- Трансфекція клітинної лінії U87: У цьому документі описано протокол трансфекції клітин лінії U 87 MG.
- Трансфекція клітинної лінії U 87 MG: Це відео є навчальним посібником, що покроково пояснює протокол трансфекції клітин лінії U87.
Ресурс з протоколом культивування клітин лінії U87 наведено нижче:
- Клітини U87 MG: Це посилання містить основну інформацію про клітинну лінію U 87 MG. Вона включає короткі протоколи розщеплення, заморожування та розморожування клітин.
Погляди на дослідження гліоми U87 MG: Поширені запитання
Список літератури
- Gwon, D.H. та ін., BMAL1 пригнічує проліферацію, міграцію та інвазію клітин U87MG шляхом зниження регуляції цикліну B1, фосфо-AKT та металопротеїнази-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C. та ін., LITAF підвищує радіочутливість клітин гліоми людини через шлях FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Коц, К. та ін. Антиоксидантна та протиракова активність екстракту Inula helenium (L.) у клітинній лінії гліобластоми людини U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Резадоост, М.Х., Х.Х. Кумлех та А. Гасемпур, Цитотоксичність та індукція апоптозу в клітинах раку молочної залози, раку шкіри та гліобластоми рослинними екстрактами. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M. та ін., Цитотоксичність сесквітерпенових алкалоїдів з рослин Nuphar щодо чутливих та стійких до лікарських препаратів клітинних ліній. Food Function, 2018. 9(12): p. 6279-6286.