Клітини SiHa - проливають світло на дослідження раку шийки матки
КлітиниSiHa - це клітини раку шийки матки, які широко використовуються в біомедичних дослідженнях. Вони чудово переносять трансфекції і, таким чином, підходять для вивчення експресії генів. Завдяки своєму людському походженню та зв'язку з раком шийки матки, ці клітини в основному використовуються в біології раку, вірусології та дослідженнях з розробки ліків.
Загальні характеристики та походження клітин SiHa
Розуміння походження та загальних характеристик клітинної лінії має вирішальне значення, оскільки це впливає на її використання у ваших дослідженнях. У цій статті ви дізнаєтеся про походження клітинної лінії SiHa, її відмінні характеристики та багато іншого: Що таке лінія ракових клітин SiHa? Що таке ВПЛ клітин SiHa? Яке походження клітинної лінії SiHa? Яка морфологія SiHa?
- Клітинна лінія карциноми шийки матки SiHa була отримана з фрагментів первинної біопсії матки азійської жінки (55 років) з плоскоклітинним раком шийки матки [1].
- Клітинна лінія SiHa має гіпертриплоїдний каріотип. Більшість клітин мають середнє число хромосом від 69 до 72. Однак близько 24% клітин мають модальне число хромосом 71.
- Клітини SiHa є позитивними до вірусу папіломи людини 16. Вони демонструють інтеграцію від 1 до 2 копій геному ВПЛ на клітину [2].
- Ці клітини раку шийки матки мають епітеліальну морфологію.
Клітинна лінія SiHa: Інформація про культивування
Підтримувати культуру клітинної лінії нелегко, якщо ви не знаєте всіх ключових моментів її культивування. Ви повинні знати: Який час подвоєння SiHa? Що таке клітинне середовище SiHa? Як культивувати клітинну лінію SiHa?
Ключові моменти для культивування клітин SiHa
|
Час подвоєння: |
Час подвоєння клітин SiHa становить приблизно 17 годин. |
|
Адгезія або суспензія: |
SiHa є адгезивною клітинною лінією. |
|
Коефіцієнт субкультивування: |
Співвідношення субкультивування для клітин SiHa становить від 1:2 до 1:4. Для пасажування та адгезії клітини промивають 1х PBS. Додають розчин аккутази та інкубують клітини протягом 8-10 хвилин при кімнатній температурі. Потім додають культуральне середовище і клітини центрифугують. Клітинний осад ресуспендують, а клітини переливають у нову колбу для культивування. |
|
Поживне середовище: |
Для ідеального росту клітин SiHa використовується мінімально необхідне середовище Ерла (EMEM), що містить 10% FBS, 2 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO3 і збалансований сольовий розчин Ерла (EBSS). Поживне середовище замінюють 2-3 рази на тиждень. |
|
Умови вирощування: |
Клітини SiHa підтримують у зволоженому інкубаторі при 37°C з 5% подачею CO2. |
|
Зберігання: |
Заморожені ампули з клітинами лінії SiHa раку шийки матки зберігають при температурі нижче -150°C в електричному морозильнику або в паровій фазі рідкого азоту протягом більш тривалого терміну. |
|
Процес заморожування та середовище: |
Для заморожування клітин SiHa використовується середовище CM-1 або CM-ACF. Клітини заморожують методом повільного заморожування, який дозволяє знижувати температуру лише на 1 °C за хвилину, щоб захистити життєздатність клітин. |
|
Процес розморожування: |
Заморожені клітини витримують від 40 до 60 секунд на водяній бані при 37°C до утворення невеликої крижаної грудки. Після цього додають свіже живильне середовище, і клітини центрифугують, щоб видалити компоненти заморожувального середовища. Клітинну гранулу ресуспендують, і клітини вносять у культуральну колбу для росту. |
|
Рівень біобезпеки: |
Для роботи з культурами клітин SiHa потрібна лабораторія з рівнем біобезпеки 1. |
Переваги та недоліки клітинної лінії SiHa
Як і інші клітинні лінії карциноми людини, SiHa також має певні особливості, пов'язані з певними перевагами та недоліками. У цій статті ми обговорили кілька найважливіших з них.
Переваги клітинної лінії раку шийки матки SiHa
- Модель раку шийки матки
- Отримана з плоскоклітинної карциноми шийки матки.
- Використовується для вивчення механізмів, росту та розвитку раку шийки матки.
- Експресує гени p53+ та pRB+, які пов'язані з репарацією ДНК, регуляцією клітинного циклу та пригніченням пухлин.
- Пухлинний потенціал
- Клітини SiHa є туморогенними і можуть індукувати низькодиференційовані епідермоїдні пухлини III ступеня у голих мишей.
- Використовуються для дослідження раку in vivo та тестування протиракових препаратів.
Недоліки клітин SiHa
- Швидкість проліферації
- Клітини SiHa швидко розмножуються, що призводить до надмірного росту.
- Потребують частого пасажування, що збільшує ризик генетичної нестабільності, яка може вплинути на поведінку клітин з часом.
Дослідницькі застосування клітин SiHa
Клітинна лінія SiHa широко використовується в дослідженнях раку шийки матки. Тут розглянуто кілька конкретних застосувань цієї клітинної лінії.
- Дослідження, пов'язані з вірусом папіломи людини (ВПЛ): Клітини SiHa є позитивними до ВПЛ 16, тому вони є цінними об'єктами для вивчення папіломавірусної інфекції людини, її молекулярних механізмів та ролі в розвитку і прогресуванні раку шийки матки. Дослідники також використовують ці клітини для вивчення реплікації, інтеграції вірусу та його впливу на процеси в клітинах-хазяїнах. У дослідженні, проведеному в 2020 році, використовували клітинну лінію SiHa для вивчення ролі онкобілків ВПЛ E6/E7 у розвитку раку шийки матки, націлившись на них за допомогою технології CRISPR. Результати показали, що нокдаун генів E6/E7 спричиняє пригнічення росту та апоптоз клітин SiHa. Таким чином, ці вірусні гени можуть слугувати важливими лікарськими мішенями для розробки терапії проти ВПЛ-асоційованого раку шийки матки [3].
- Біологія раку: Клітини SiHa слугують безцінною моделлю для вивчення біології раку шийки матки, включаючи розвиток, прогресування, метастазування та інвазію раку. Дослідники використовують ці клітини для вивчення генетичних мутацій та основних молекулярних шляхів, що сприяють розвитку та росту раку шийки матки, наприклад, дослідження з використанням клітин SiHa показало, що підвищена регуляція SEC61G (гамма-субодиниця транслокона SEC61) стимулює проліферацію клітин раку шийки матки шляхом активації каскаду MAPK [4].
- Скринінг та тестування лікарських засобів: SiHa - широко використовувана лінія раку шийки матки для оцінки ефективності потенційних протиракових препаратів, специфічних для ВПЛ-асоційованого раку шийки матки. Дослідники вивчають антипроліферативний, апоптотичний та антиметастатичний потенціал препаратів, що використовують ці клітини. Як, наприклад, дослідження, проведене в 2019 році, в якому вивчався цитотоксичний потенціал екстрактів плодів Vatica diospyroides Symington Type SS на клітинній лінії раку шийки матки SiHa [5].
Клітини SiHa для ваших досліджень!
Наукові публікації за участю клітин SiHa
У деяких важливих і часто цитованих наукових публікаціях фігурують клітини лінії SiHa плоскоклітинної карциноми шийки матки.
У цій публікації в журналі OncoTargets and Therapy (2019) висловлено припущення, що природна сполука алое-емодин чинить асоційовану з ВПЛ E6/E7 та метаболізмом глюкози апоптотичну дію на клітини раку шийки матки SiHa.
Ця стаття була опублікована в журналі Future Journal of Pharmaceutical Sciences у 2022 році. У цьому дослідженні вивчали протипухлинну активність екстракту листя рослини Excoecaria agallocha (L.) на клітинній лінії раку шийки матки SiHa.
У цьому дослідженні, опублікованому в Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022), припускається, що молекула 1,10-фенантроліну при з'єднанні з наночастинками сульфату цинку чинить значний антипроліферативний ефект у клітинах SiHa.
Це дослідження було опубліковане в журналі Oncology Reports у 2019 році. Дослідження показало, що астрагалозид IV, натуральний продукт, пригнічує міграцію та інвазію клітин SiHa шляхом модуляції TGF-β1-опосередкованих PI3K та MAPK сигнальних шляхів.
Дослідження в журналі Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) показало, що IFI16 (інтерферон-гамма індуцибельний білок 16) регулює ген PD-L1 шляхом активації шляху STING-TBK1-NF-kB, стимулюючи ріст клітин раку шийки матки SiHa.
Ресурси для клітинної лінії SiHa: Протоколи, відео та інше
Ось кілька онлайн-ресурсів, присвячених клітинам SiHa.
- Трансфекція клітин SiHa: Ця наукова стаття містить протокол для підтримання клітин SiHa раку шийки матки і для трансфекції клітин SiHa.
Наступне посилання містить інформацію про культуру клітин SiHa.
- Клітинна лінія SiHa: Цей веб-сайт містить багато цінної інформації про клітинну лінію SiHa. Сюди входить інформація про живильні середовища, умови культивування, протоколи субкультивування клітин SiHa та поводження з проліферативними і кріоконсервованими культурами.
Поширені запитання щодо клітин карциноми шийки матки SiHa
Посилання
- Мельцер, К., Й. фон дер Охе та Р. Хасс, Короткий огляд: перехресні перешкоди мезенхімальної строми/стовбурових клітин з раковими клітинами забезпечують терапевтичний потенціал. Стовбурові клітини, 2018. 36(7): p. 951-968.
- Островська К.М. та ін., Дослідження впливу вірусу папіломи людини високого ризику на біохімічний склад клітин раку шийки матки за допомогою коливальної спектроскопії. Аналітик, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
- Чен, Ю. та ін., Інгібування росту клітин раку шийки матки людини in vitro та in vivo шляхом розщеплення мРНК вірусу папіломи людини E6/E7 за допомогою системи CRISPR/Cas13a. Антивірусні дослідження, 2020. 178: p. 104794.
- Fan, Y. та ін., SEC61G сприяє проліферації раку шийки матки шляхом активації сигнального шляху MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A. та ін., Протираковий потенціал екстрактів плодів Vatica diospyroides symington type SS та їх вплив на програмну клітинну загибель клітинних ліній раку шийки мат ки. Науковий світовий журнал, 2019. 2019.
