Клітини RBL-2H3 - значення RBL-2H3 в алергічних реакціях та імунологічних дослідженнях
Клітинна лінія RBL-2H3 - це базофільна лейкемія щурів, яка використовується в імунологічних дослідженнях. Вона слугує модельною системою для вивчення фізіології, поведінки та функцій тучних клітин. Ці клітини також використовуються для вивчення алергічних реакцій, імунологічних процесів, тестування та розробки ліків.
У статті ви дізнаєтесь про походження RBL-2H3, загальні характеристики, вимоги до культури та застосування в дослідженнях.
Клітини RBL-2H3: Походження та загальні характеристики
Перш ніж використовувати базофільну клітинну лінію у своїх дослідженнях, необхідно знати її походження та загальні характеристики. Цей розділ статті розповість вам про основи роботи з клітинами RBL-2H3. Наприклад, що таке тучні клітини RBL-2H3? Для чого використовують клітини RBL-2H3? Що таке клітини RBL-2H3 при базофільній лейкемії щурів? Яка морфологія RBL-2H3? Чи є клітини RBL-2H3 безсмертними?
- RBL-2H3 - це клітини базофільної лейкемії, отримані з базофільних клітин щурів лінії Вістар у 1978 році в лабораторії імунології Національного інституту стоматологічних досліджень.
- Клітини RBL-2H3 мають рецептори тирозинкінази c-kit та протеази тучних клітин II (RMCP-II), що робить їх потенційною моделлю тучних клітин. Тому їх зазвичай називають тучними клітинами, незважаючи на те, що вони походять від базофілів щурів [1].
- Вони вивільняють гістамін та інші медіатори при активації та експресують високоафінні рецептори IgE.
- Клітини RBL-2H3 мають фібробластоподібну морфологію.
Клітини RBL-2H3: Інформація про культивування
Цей розділ допоможе вам дізнатися про деякі ключові аспекти культивування клітинної лінії RBL-2H3. Ви дізнаєтесь Який час подвоєння клітин RBL-2H3? Яка щільність посіву клітин RBL-2H3? Що таке протокол культивування клітин RBL-2H3? Що таке середовище для заморожування клітинної лінії RBL-2H3?
Ключові моменти при культивуванні клітин RBL-2H3
|
Час подвоєння популяції: |
Час подвоєння тучних клітин RBL-2H3 становить приблизно 50-60 годин. |
|
Прикріплені або в суспензії: |
RBL-2H3 є адгезивною клітинною лінією. |
|
Коефіцієнт субкультивування: |
Для клітин RBL-2H3 співвідношення поділу підтримується в межах від 1:2 до 1:4. Адгезійні клітини відмивають безмагнієвим і безкальцієвим розчином 1 x PBS. Додають пасивуючий розчин аккутази, і клітини витримують при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, щоб вони відшарувалися від дна культуральної посудини. Додають свіже середовище і центрифугують клітини. Зібрані клітини обережно ресуспендують у свіжому середовищі і переливають у нові колби з живильним середовищем. |
|
Поживне середовище: |
Для культивування клітин RBL-2H3 використовують середовище EMEM, що містить 10% FBS, 2 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO3 і сіль EBSS. Середовище слід замінювати 2-3 рази на тиждень. |
|
Умови культивування: |
Клітини RBL-2H3 культивують у зволоженому інкубаторі, встановленому при температурі 37 °C і підключеному до джерела 5% CO2. |
|
Зберігання: |
Клітини зберігають у паровій фазі рідкого азоту або при температурі нижче -150 °C в електричній морозильній камері, щоб зберегти життєздатність клітин на тривалий термін. |
|
Процес заморожування та середовище: |
Для заморожування клітин RBL-2H3 використовується середовище CM-1 або CM-ACF з використанням повільного процесу заморожування. Коротко кажучи, цей метод дозволяє знижувати температуру на 1 °С за хвилину і захищає клітини від шоку. |
|
Процес розморожування: |
Клітини RBL-2H3 розморожують на попередньо налаштованій водяній бані (37 °C) протягом приблизно 60 секунд. Після цього клітини додають до свіжого культурального середовища і центрифугують. Цей етап необхідний для видалення компонентів заморожувального середовища. Далі клітинну гранулу ресуспендують у живильному середовищі, а клітини переносять у колбу для культивування. |
|
Рівень біобезпеки: |
Клітини RBL-2H3 слід зберігати в лабораторіях з рівнем біобезпеки 1. |
Переваги та обмеження лінії RBL-2H3 Клітинна лінія базофілів
Клітини RBL-2H3 широко використовуються в імунологічних дослідженнях. У цьому розділі описані їх основні переваги та обмеження.
Переваги
- Легкість у культивуванні: Клітини RBL-2H3 можна легко культивувати і підтримувати в лабораторних умовах. Це полегшує проведення економічно ефективних і відтворюваних експериментів, що робить їх популярним вибором для початкових досліджень в імунології.
Обмеження
- Нелюдське походження: Клітини RBL-2H3, отримані з базофілів щурів, не можуть точно імітувати біологічні процеси людини, що може обмежувати їх застосування в специфічних для людини дослідженнях. Це вимагає обережної інтерпретації даних при екстраполяції результатів на людські системи.
- Спрощена модель тучних клітин: Хоча ці клітини є базовою моделлю для вивчення функцій тучних клітин, вони не повністю відображають складну природу взаємодії тучних клітин в імунній системі людини. Отже, вони не можуть адекватно моделювати багатогранну роль тучних клітин в імунних реакціях або захворюваннях in vivo.
Клітинна лінія RBL-2H3: Наріжний камінь в імунологічних дослідженнях
Дослідження базофілів та тучних клітин з використанням клітинної лінії RBL-2H3
Клітинна лінія RBL-2H3, отримана з Rattus norvegicus, слугує ключовою моделлю для вивчення біології базофілів та тучних клітин. Ці опасисті клітини щурів дають важливу інформацію про вивільнення медіаторів опасистими клітинами, що має вирішальне значення для розуміння алергічних станів, таких як алергічний риніт. За допомогою цих клітин дослідники вивчають динаміку клітинних рецепторів і створення імунологічних синапсів, які є центральними для відповіді імунної системи на алергени. Цікаве дослідження, опубліковане в 2019 році, використовувало клітинну лінію RBL-2H3 і досліджувало механізми, що стоять за псевдоалергічними реакціями, спричиненими ін'єкцією цинкайлінгу. Дослідження показало, що сигнальний каскад PI3K-RAC1 частково викликає цю алергічну реакцію в клітинах [2]
Динаміка імунологічних синапсів у дослідженнях алергії
Широко використовувані в імунологічних дослідженнях, клітини RBL-2H3 особливо ефективні для вивчення динаміки імунологічних синапсів. Це допомагає з'ясувати комунікаційні процеси імунної системи, а також вивчати як периферичну кров, так і тучні клітини перитонеальної порожнини. Такі дослідження є життєво важливими для всебічного розуміння імунної відповіді як в системному, так і в локальному контексті
Скринінг на наркотики та тестування на токсичність
У скринінгу та тестуванні лікарських засобів вивчають реакцію клітин RBL на різні стимули, включаючи дослідження того, як H2O2 інгібує IgE-опосередковані відповіді. Ці клітини відіграють важливу роль у розробці методів лікування таких захворювань, як стрептококові інфекції, де стрептококи групи мітіс пригнічують активацію тучних клітин. Крім того, за допомогою цієї моделі RBL 2H3 mc дослідники оцінюють токсичний вплив різних речовин, включаючи хімікати, ліки та наночастинки. Наприклад, нещодавнє дослідження (2022) оцінювало цитотоксичність мікропластику з полістиролу на клітинах RBL-2H3. Вони виявили, що мікропластик пошкоджує органели клітин RBL-2H3 і сприяє загибелі клітин [3]. Ще одне дослідження 2021 року оцінювало протиалергічний та протизапальний потенціал натурального продукту неферину з використанням моделі RBL 2H3 mc. Дослідження виявило хороші протиалергічні та протизапальні властивості сполуки [4]
Передові методології в імунологічних вимірюваннях
Послідовне і вимірюване вивільнення медіатора з клітин RBL-2H3 робить їх ідеальними для зручної флуориметрії, що полегшує точні і достовірні вимірювання, які мають вирішальне значення для вивчення захворювань і оцінки терапевтичних агентів.
Клітинна лінія RBL-2H3, що походить від Rattus norvegicus, є безцінним активом як для фундаментальних, так і для прикладних досліджень в галузі імунології. Вона відкриває широкі можливості для поглиблення наших знань та лікування імунологічних захворювань
Клітинна лінія RBL-2H3 для передових імунологічних досліджень
Клітини RBL-2H3: Наукові публікації
Нижче наведено кілька цікавих наукових публікацій, присвячених опасистим клітинам RBL-2H3:
Інгібуюча активність нарірутину на дегрануляцію клітин RBL-2H3
Ця наукова стаття була опублікована в журналі Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). У дослідженні припускається, що нарирутин, природна сполука, чинить інгібуючий вплив на дегрануляцію RBL 2H3 через регуляцію NF-κB, MAPK та тирозинкіназного сигнального шляху.
Дослідження, опубліковане в Міжнародному журналі молекулярних наук (2020), показало, що сполука апігеніну значно пригнічує алергічні та запальні реакції клітин RBL-2H3 та RAW264.7. Таким чином, вона може слугувати потенційним засобом для боротьби з імунозалежними захворюваннями.
У цій науковій статті, опублікованій у Міжнародному журналі молекулярних наук (2021), оцінено протиалергічні та протизапальні ефекти природного продукту, сапонарину, з використанням різних клітинних ліній, включаючи RBL-2H3.
Дослідження, проведене в рамках доказової комплементарної та альтернативної медицини (2014), показало, що екстракти бенчалокавічіану та деякі активні компоненти мають потенційний інгібуючий вплив на вивільнення ß-гексозамінідази з клітин RBL 2H3.
Ця стаття була опублікована в 2018 році в Міжнародному журналі біологічних макромолекул. Дослідження показало, що спіруліна максима, натуральний продукт, інгібує дегрануляцію RBL 2H3, запобігаючи фосфорилюванню MAPKs та AKT.
Ресурси для клітинної лінії RBL-2H3: Протоколи, відео та інше
RBL-2H3 - широко використовувана лінія тучних клітин. Доступні ресурси, що охоплюють протоколи культивування та трансфекції RBL-2H3, згадані тут:
- Модель RBL 2H3 MC: Ця наукова стаття містить протоколи для підтримання культури RBL-2H3 і для трансфекції RBL-2H3.
Ось деякі ресурси, що пояснюють протокол культивування клітин RBL-2H3:
- Клітини RBL-2H3: На цьому сайті ви можете ознайомитися з протоколами культивування клітин лінії RBL-2H3. Крім того, він містить інформацію про клітинні середовища та умови культивування RBL 2H3.
Клітинна лінія RBL-2H3: Найважливіші запитання для дослідників
Посилання
- Пассанте, Е. і Н. Франкіш, Клітинна лінія RBL-2H3: її походження та придатність як моделі тучних клітин. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q. та ін., Псевдоалергічна реакція, спричинена ін'єкцією цинкайлінгу частково через сигнальний шлях PI3K-Rac1 в клітинах RBL-2H3. Токсикологічні дослідження, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Лю Л. та ін., Полістирольні мікро- (нано) пластики пошкоджують органели клітин RBL-2H3 та сприяють MOAP-1 для індукції апоптозу. Журнал небезпечних матеріалів, 2022. 438: p. 129550.
- Чіу, К.-М. та ін., Протиалергічні та протизапальні ефекти неферину на клітини RBL-2H3. Міжнародний журнал молекулярних наук, 2021. 22(20): p. 10994.
