Клітинна лінія RAW 264.7 у дослідженнях макрофагів та імунології

Клітинна лінія RAW 264.7 слугує надійною моделлю мишачих макрофагів in vitro, що має фундаментальне значення для імунологічних досліджень. Ці клітини, отримані від самця миші BALB/c, були трансформовані вірусом лейкемії мишей Абельсона, в результаті чого утворилася макрофагоподібна клітинна лінія. Завдяки своїй функціональній стабільності та здатності здійснювати як фагоцитоз, так і піноцитоз, клітини RAW 264.7 є важливими для вивчення взаємодії хазяїн-патоген, що робить їх наріжним каменем в імунологічних дослідженнях [1,2].

Морфологічні характеристики та особливості росту

При дослідженні клітини RAW 264.7 демонструють напівадгезивний ріст зі схильністю до утворення як веретеноподібних адгезивних клітин, так і сферичних плаваючих життєздатних клітин, з діаметром клітин від 10 до 20 мкм. Така поліморфна природа і адаптивність в умовах культивування роблять клітини RAW 264.7 універсальним інструментом для експериментальних маніпуляцій і спостережень.

Імунологічна функція та презентація антигенів

Як антигенпрезентуючі клітини, клітини RAW 264.7 відіграють важливу роль в імунній системі. Їх функція виходить за рамки простого розпізнавання патогенів і полягає в обробці та презентації антигенів Т-клітинам, таким чином організовуючи комплексну імунну відповідь. Ця динаміка сприяє глибшому розумінню того, як імунна система ідентифікує та нейтралізує чужорідні об'єкти.

Поляризація макрофагів: Парадигма М0, М1 та М2

Клітини RAW 264.7, у своєму базальному стані як макрофаги М0, мають чудову здатність поляризуватися в прозапальний фенотип М1 або протизапальний фенотип М2. Ця здатність до поляризації надає дослідникам модель для вивчення впливу різних цитокінів та факторів навколишнього середовища на функцію макрофагів та імунну відповідь [3,4].

Остеокластогенез та ремоделювання кісткової тканини

Хоча клітини RAW 264.7 самі не є остеокластами, вони відіграють важливу роль у вивченні остеокластогенезу - процесу утворення остеокластів. Ці клітини сприяють дослідженню експресії остеокластичних генів та їхньої реакції на активацію рецепторів. Це дослідження має глибоке значення для розуміння патофізіології таких станів, як остеопороз, для якого характерним є нерегульоване ремоделювання кісткової тканини.

Переваги та недоліки комірок RAW 264.7

Переваги

• Легке культивування: Клітинну лінію RAW 264.7 легко вирощувати і підтримувати в лабораторії без будь-яких складних вимог.
• Добре охарактеризована: RAW 264.7 є добре охарактеризованою клітинною лінією, що означає, що вона має стабільні фенотипічні та функціональні особливості.
• Модель макрофагів in vitro: Оскільки клітини RAW 264.7 є макрофагами, вони демонструють основні макрофагоподібні функції, такі як фагоцитоз і піноцитоз. Тому їх часто використовують як модель макрофагів in vitro.
• Диференціювання в остеокласти: Клітини RAW 264.7 можуть бути диференційовані в остеокласти за допомогою специфічних молекулярних факторів. Ці диференційовані клітини здатні здійснювати ремоделювання кісткової тканини, подібно до остеокластів.

Недоліки

• Слабка представленість первинних макрофагів: Як трансформована клітинна лінія, RAW 264.7 може неточно відображати особливості первинних макрофагів і мати деякі відмінності в експресії генів, фенотипі та функціях.
• Обмеження в скринінгу лікарських засобів: Клітини RAW 264.7 можуть не підходити для всіх типів скринінгових аналізів, а їх реакція на деякі препарати може відрізнятися від реакції первинних макрофагів.
• Сильна клітинна адгезія: Клітини RAW 264.7 міцно прилипають до поверхні культуральної колби, і іноді їх буває складно відділити.

Застосування клітин RAW 264.7 в мімікрії макрофагів та імунологічних дослідженнях

Моделювання клітинних імунологічних реакцій

Клітинна лінія RAW 264.7, що відображає функціональні можливості справжніх макрофагів, є ключовою моделлю для дослідження клітинних реакцій на патогени та імунологічні стимули. У дослідженні, присвяченому цьому аспекту, оцінювався імуномодулюючий та антиоксидантний вплив термічно вбитих молочнокислих бактерій на ці клітини, що дозволило зробити важливі висновки щодо регуляції імунної системи[5]

На додаток до цього, дослідження, проведене у 2019 році, з'ясувало імунологічний вплив впливу РАВ 264.7 на полісахариди з рослини Polygonatum sibiricum. Дослідження показало, що ці сполуки запускають імунну відповідь шляхом активації сигнальних шляхів NF-κB/MAPK, пропонуючи глибоке молекулярне розуміння[6]

Дослідження остеокластогенезу

Функціонуючи як сурогат для досліджень диференціювання остеокластів, клітини RAW 264.7 сприяють з'ясуванню поведінки та шляхів диференціювання остеокластів. Такі дослідження розширюють наші знання про механізми резорбції кісткової тканини та патогенез остеопорозу. Для моніторингу внутрішньоклітинних змін та аналізу метаболізму гему в цих клітинах часто використовують сучасні методи візуалізації

Молекулярне розуміння остеокластогенезу

Незважаючи на свою основну роль як моделі макрофагів, клітини RAW 264.7 також використовуються для дослідження остеокластогенезу in vitro. Індукуючи остеокластоподібні характеристики цих клітин, дослідники отримують уявлення про процес диференціювання та поведінку преостеокластів, хоча в цих дослідженнях дуже важливо враховувати притаманні клітині характеристики та походження

Скринінг біоактивності натуральних продуктів

Скринінг біоактивності в натуральних продуктах - це ще одне застосування, де клітини RAW 264.7 досягли успіху. Наприклад, їх використання в корейському дослідженні, присвяченому вивченню імуностимулюючих властивостей трав'яної суміші, продемонструвало ефективність клітинної лінії в ідентифікації біологічно активних сполук у природних речовинах[7]

Розпочніть свої дослідження з нашими комірками RAW 264.7

Наукові публікації з використанням клітин RAW 264.7

Існує багато наукових публікацій, присвячених дослідженню клітинної лінії мишачих макрофагів RAW 264.7:

• Полісахариди з Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute індукують імунну відповідь у клітинній лінії RAW264.7 черезNF-κB/MAPKшлях: У цьому дослідженні припущено, що полісахариди, отримані з рослини Polygonatum sibiricum , можуть викликати імунну відповідь у клітинній лінії макрофагів миші RAW 264.7 через регуляцію сигнального каскаду NF-κB/MAPK.
• Імуномодулюючі ефекти екстракту Tinospora crispa та його основних сполук на імунні функції макрофагів RAW 264.7: У статті, опублікованій в журналі International Immunopharmacology, описано, що рослинний екстракт Tinosporacrispa та його основні складові мають імуномодулюючу та імуностимулюючу дію на клітинну лінію макрофагів RAW 264.7.
• Термічно вбиті молочнокислі бактерії пригнічують продукцію оксиду азоту через індуцибельну синтазу оксиду азоту та циклооксигеназу-2 в клітинах RAW 264.7: Це дослідження показало, що термічно вбиті молочнокислі бактерії можуть бути потенційно використані для синтезу пробіотичних продуктів, оскільки вони володіють імуномодулюючими та антиоксидантними властивостями. Для вивчення цих біологічних властивостей дослідники використовували клітини RAW 264.7.
• Вплив рослинної композиції на посилення імунної відповіді в макрофагах RAW 264.7: У цьому дослідженні використовували клітини RAW 264.7 для вивчення імуностимулюючого ефекту рослинного препарату KM1608. Дослідження показало, що KM1608 є потенційним агентом для посилення імунної відповіді.
• Скринінг рослин, що використовуються в колумбійській традиційній медицині, виявив протизапальний потенціал Physalis angulata calyces: У статті, опублікованій в Саудівському журналі біологічних наук, досліджено протизапальний потенціал 10 широко використовуваних традиційних колумбійських рослин з використанням LPS-стимульованих клітин RAW 264.7.

Клітини RAW 264.7: Ресурси, протоколи, відео та інше

Клітини RAW 264.7 часто використовують у дослідженнях трансфекції. Наступні ресурси пояснюють різні методи трансфекції, що використовуються для клітинної лінії RAW 264.7.

• Трансфекція клітин RAW 264.7: На цьому веб-сайті ви знайдете протокол трансфекції макрофагів RAW 264.7 з використанням реагенту ліпофектаміну.
• Протокол трансфекції: Ця опублікована стаття описує детальний протокол трансфекції клітин RAW 264.7.
• Ефективний метод трансфекції клітин RAW 264.7: Цей документ описує ще один практичний підхід до трансфекції з використанням клітин RAW 264.7.

Відео, пов'язані з клітинною лінією RAW 264.7

• Культивування клітин RAW 264.7: Це відео пояснює протокол пасажування клітин RAW 264.7.
• Метод трансфекції: Це відео про трансфекцію клітин RAW 264.7 репортерним геном.

Основні поширені запитання про клітинну лінію RAW 264.7: Погляд на дослідження мімікрії макрофагів та остеокластогенезу

Список використаних джерел

1. Тацяк, Б. та ін., Оцінка фенотипової та функціональної стабільності клітинної лінії RAW 264.7 за допомогою серійних пасажів. PloS one, 2018. 13(6): p. e0198943.
2. Ванг С. та ін., Запальні макрофаги переривають дозрівання та мінералізацію остеоцитів шляхом регулювання сигнального шляху Notch. Молекулярна медицина, 2022. 28(1): p. 102.
3. Орєхов А.Н. та ін., Диференціювання моноцитів та поляризація макрофагів. Судини плюс, 2019. 3: p. 10.
4. Хабіпов А. та ін., Поляризація макрофагів RAW 264.7 клітинами раку підшлункової залози - модель для вивчення пухлинопротекторних макрофагів. Протиракові дослідження, 2019. 39(6): p. 2871-2882.
5. Канг К.-Х. та ін. Термічно вбиті молочнокислі бактерії інгібують продукцію оксиду азоту через індуцибельну синтазу оксиду азоту та циклооксигеназу-2 в клітинах RAW 264.7. Пробіотики та антимікробні білки, 2021. 13(6): p. 1530-1538.
6. Чжан, Дж. та ін., Полісахариди з Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute індукують імунну відповідь у клітинній лінії RAW264. 7 через NF-κB/MAPK шлях. RSC advances, 2019. 9(31): p. 17988-17994.
7. Трінь Т.А. та ін. Вплив рослинної композиції на посилення імунної відповіді в макрофагах RAW 264.7. Біомолекули, 2020. 10(3): p. 424.