Клітини NCI-H460 - навігація в дослідженнях раку легенів за допомогою NCI-H460
NCI-H460 - це недрібноклітинні клітини раку легенів людського походження, які зазвичай використовуються в дослідженнях карциноми легенів і токсикології. Ця клітинна лінія є цінним інструментом для вивчення різних аспектів біології раку, включаючи розвиток, ріст і резистентність пухлин до лікарських препаратів. Крім того, клітини NCI-H460 є підходящою моделлю для розробки протиракових реагентів.
Клітини NCI-H460: Походження та загальні характеристики
Походження та загальні характеристики клітинної лінії значною мірою впливають на її застосування в дослідженнях. Цей розділ статті допоможе вам дізнатися про походження та основні характеристики клітин раку легенів NCI-H460. Ви дізнаєтесь Що таке клітини NCI-H460? Який тип клітинної лінії NCI-H460? Яка морфологія NCI-H460?
- Клітинна лінія NCI-H460 була отримана з плеврального випоту європейського чоловіка, хворого на недрібноклітинний рак легенів. Вона була створена в 1982 році А.Ф. Газдаром та його колегами.
- Клітини раку легенів NCI-H460 мають епітеліальну морфологію.
- NCI-H460 є пухлинною клітинною лінією з гіпотриплоїдним каріотипом. Модальне число хромосом для цих клітин становить 57. Клітини NCI-H460 також мають 58 модальних хромосом з порівнянними показниками.
- Ці клітини раку легенів мають багато мутацій NCI-NCI-H460, як і недрібноклітинні пухлини легенів, такі як мутація NCI-H460 KRAS, які беруть участь у проліферації, рості, інвазії та метастазуванні клітин.
Інформація про культивування клітин NCI-H460
Ви повинні знати наступні ключові моменти для правильного поводження з клітинною лінією NCI-H460 та її підтримання. Тут ви дізнаєтеся про час подвоєння клітин NCI-H460, живильне середовище NCI-H460 та основні процедури культивування клітин раку легенів NCI-H460.
Ключові моменти для культивування клітин NCI-H460
|
Час подвоєння: |
Час подвоєння клітин NCI-H460 становить приблизно 33 години. |
|
У прикріпленому стані або в суспензії: |
Клітини раку легенів NCI-H460 є адгезивними. |
|
Коефіцієнт субкультивування: |
Рекомендоване співвідношення поділу для клітинної лінії NCI-H460 становить 1:2 і 1:4. Після видалення старого середовища адгезовані клітини промивають 1-кратним фосфатним буферним розчином. Після цього клітини інкубують з пасажним розчином Accutase протягом 8-10 хвилин при кімнатній температурі. Дисоційовані клітини ресуспендують у культуральному середовищі та центрифугують. Зібрані клітини знову ресуспендують і переливають у нову колбу для культивування. |
|
Поживне середовище: |
В якості живильного середовища NCI-H460 використовується RPMI 1640. До нього додають 10% ембріональної сироватки великої рогатої худоби, 2,1 мМ стабільного глутаміну та 2,0 г/л NaHCO3. Поживне середовище слід замінювати 2-3 рази на тиждень. |
|
Умови вирощування: |
Культури NCI-H460 підтримують при температурі 37°C у зволоженому інкубаторі з безперервною подачею 5% CO2. |
|
Зберігання: |
Клітини раку легенів NCI-H460 можна зберігати в паровій фазі рідкого азоту або при температурі нижче -150°C в електричному наднизькотемпературному морозильнику протягом тривалого часу. |
|
Процес заморожування та середовище: |
Для заморожування та зберігання клітин NCI-H460 використовується середовище CM-1 або CM-ACF. Рекомендується повільний метод заморожування для збереження максимальної життєздатності клітин. |
|
Процес розморожування: |
Заморожені клітини NCI-H460 розморожують на попередньо прогрітій водяній бані (при температурі 37°C) протягом 40-60 секунд до утворення невеликої крижаної грудки. Розморожені клітини додають до свіжого середовища і центрифугують, щоб видалити компоненти середовища, що замерзають. Зібрану гранулу клітин знову ресуспендують, і клітини розподіляють у нові колби з поживними середовищами для росту. Клітинам NCI-H460 може знадобитися майже 24 години, щоб прикріпитися до поверхні колби. |
|
Рівень біобезпеки: |
Клітини раку легенів NCI-H460 обробляються і зберігаються в лабораторіях з рівнем біобезпеки 1. |
Переваги та недоліки клітин NCI-H460
NCI-H460 - це клітинні лінії, які широко використовуються в дослідженнях раку легенів. У цьому розділі ми розглянемо загальні переваги та недоліки, пов'язані з клітинами раку легенів NCI-H460.
Переваги
Переваги клітинної лінії недрібноклітинного раку легенів NCI-H460 полягають у наступному:
-
Пухлинне походження
Клітинна лінія NCI-H460 була отримана від пацієнта з недрібноклітинним раком легенів, що представляє саме цей тип раку легенів. Вони використовуються як модель для вивчення біології раку легенів і розробки нових ефективних методів лікування. Клітини NCI-H460 мають пухлинний потенціал і можуть бути введені імунодефіцитним мишам для створення моделей пухлин in vivo з метою вивчення росту, розвитку та ефективності потенційних ліків.
-
Висока швидкість проліферації
NCI-H460 демонструє вищі темпи росту, ніж інші клітинні лінії недрібноклітинного раку легенів, такі як A549. Ця перевага підвищує їх доступність і допомагає дослідникам проводити відтворювані та чутливі до часу експерименти.
Недоліки
Клітини раку легенів NCI-H460 мають наступні недоліки:
-
Гомогенність
Клітини NCI-H460 є однорідними, оскільки вони були отримані з пухлини одного пацієнта. Тому їм, як правило, не вистачає складності та гетерогенності, що спостерігається в пухлинах пацієнтів.
Застосування клітин NCI-H460 в дослідженнях
Клітини раку легенів NCI-H460 широко використовуються в дослідженнях, пов'язаних з карциномою легенів. Ось деякі з важливих дослідницьких застосувань клітин NCI-H460:
- Дослідження раку легенів: Клітини NCI-H460 є безцінною моделлю для дослідження клітинних і молекулярних механізмів, що беруть участь у розвитку, рості та метастазуванні пухлин. Крім того, вони використовуються для вивчення імперативних сигнальних шляхів, молекулярних мішеней і різних генетичних мутацій, пов'язаних з прогресуванням раку легенів. Для ефективного вивчення цих факторів було проведено кілька досліджень на клітинах NCI-H460. Дослідження, проведене в 2019 році, припустило, що надмірна експресія ядерного повсюдного казеїну та субстрату циклінзалежних кіназ (NUCKS) бере участь у рості пухлинних клітин через регуляцію сигнального шляху PI3K/AKT [1]. Аналогічно, у дослідженні in vitro та in vivo на клітинах NCI-H460 вивчали роль гена eIF4E. Результати показали, що ген eIF4E бере участь у рості карциноми легень та ангіогенезі, і він може бути мішенню для розробки перспективних препаратів проти раку легень [2].
- Відкриття та розробка ліків: NCI-H460, клітинна лінія раку легенів людини, широко використовується у дослідженнях з пошуку та розробки ліків. Дослідники використовують ці клітини для вивчення токсичності та ефективності нових препаратів-кандидатів, таргетної терапії та методів лікування, спрямованих переважно на мутації KRAS NCI-H460. У дослідженні, проведеному Хаоюе Ху (Haoyue Hu) з колегами у 2023 році, клітини NCI-H460 використовували для вивчення протиракових ефектів препарату анлотиніб. Результати показали, що анлотиніб частково впливав на ріст мутантних клітин раку легенів KRAS шляхом пригнічення сигнального каскаду MEK/ERK [3]. Аналогічно, фенольна сполука, карнозинова кислота, була перевірена на антипроліферативну та проапоптотичну активність з використанням клітин NCI-H460 [4].
- Резистентність до лікарських препаратів: Клітинна лінія NCI-H460 ідеально підходить для вивчення механізму лікарської стійкості карциноми легень. Дослідники використовують ці клітини для розробки моделей резистентності до ліків, щоб визначити основні гени, молекулярні фактори та сигнальні шляхи. Наприклад, в одному з досліджень на клітинах NCI-H460, резистентних до пеметрекседу, багатоцільового антифолатного препарату, вивчали молекулярні механізми резистентності до пеметрекседу в клітинах недрібноклітинного раку легенів [5].
Придбайте клітинну лінію NCI-H460: Ваш шлях до дослідження раку легенів
Наукові публікації про клітини NCI-H460
Пропонуємо вашій увазі кілька цікавих наукових публікацій про клітинну лінію карциноми легень NCI-H460.
Природний глюкан з чорної квасолі пригнічує проліферацію ракових клітин через PI3K-Akt та MAPK
У дослідженні, опублікованому в журналі Molecules (2023), припускається, що природний α-1,6-глюкан, BBWPW, з чорної квасолі пригнічує проліферацію клітин NCI-H460 шляхом регулювання шляху PI3K/AKT/MAPK.
У цій статті в журналі Phytomedicine (2019) досліджено, що діосцин-6′-O-ацетат, нова природна сполука, чинить антипроліферативну дію на клітини раку легенів NCI-H460.
miRNA-425-5p посилює ріст раку легенів через сигнальну вісь PTEN/PI3K/AKT
Дослідження BMC Pulmonary Medicine (2020) стверджує, що мікроРНК-425-5p посилює пухлиноутворення карциноми легень через шлях PTEN/PI3K/AKT.
У цій статті в журналі Molecular Medicine Reports (2017) запропоновано протипухлинний потенціал та основні механізми дії сполуки хіналізарину на клітини раку легенів NCI-H460 та інші.
Це дослідження в журналі Food and Function (2019) висвітлює потенційний протираковий ефект екстракту Eucalyptus globulus labill. на клітинах NCI-H460. Результати показали, що рослинний екстракт проявляє ці ефекти шляхом збільшення експресії NCI-H460 p53 та модуляції профілю клітинного циклу.
Ресурси для клітинної лінії NCI-H460: Протоколи, відео та інше
Ось кілька онлайн-ресурсів, що містять інформацію про клітини раку легенів NCI-H460.
- Трансфекція клітин NCI-H460: Цей відеоурок є покроковим посібником з трансфекції клітин NCI-H460 плазмідною ДНК.
Наступні посилання містять необхідну інформацію про культуру клітин H460.
- Клітини NCI-H460: На цьому веб-сайті ви знайдете важливу інформацію про клітинні середовища NCI-H460, процедури субкультивування, заморожування та розморожування.
- Пасажування клітин NCI-H460: Цей документ надасть вам інформацію про пасажування та субкультивування клітинної лінії NCI-H460. Крім того, він також допоможе вам вивчити протокол трансфекції клітин NCI-H460.
Дослідження клітинної лінії NCI-H460: Поширені запитання та ідеї
Посилання
- Hu, C. та ін., NUCKS сприяє проліферації, міграції та інвазії клітин раку легенів через сигнальний шлях Pi3k/Akt. Клінічна та дослідницька медицина, 2021. 44(2): с. E55-61.
- Qi, X. та ін., EGPI-1, новий інгібітор взаємодії eIF4E/eIF4G, пригнічує ріст клітин раку легенів та ангіогенез через сигнальний шлях Ras/MNK/ERK/eIF4E. Хіміко-біологічні взаємодії, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H. та ін., Анлотиніб чинить протиракову дію на KRAS-мутовані клітини раку легенів через пригнічення шляху MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: с. 3579-3587.
- Corveloni, A.C. та ін., Карнозинова кислота виявляє антипроліферативні та проапоптичні ефекти в пухлинних клітинах легень NCI-H460 та непухлинних клітинах легень IMR-90. Журнал токсикології та гігієни навколишнього середовища, частина А, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Сюй, Ю.-Л. та ін., Створення та характеристика пеметрексед-резистентних клітин NCI-H460/PMT, стійких до пеметрекседу. Протиракові агенти в медичній хімії (раніше "Сучасна медична хімія - протиракові агенти"), 2019. 19(6): p. 731-739.