Клітинна лінія MX-1

MX-1 - це клітинна лінія аденокарциноми молочної залози людини, отримана на основі моделі ксенотрансплантата раку молочної залози у атимічних мишей. Клітини аденокарциноми молочної залози людини були отримані з пухлини молочної залози 29-річної європеоїдної жінки. Клітини MX1 - це клітини потрійного негативного раку молочної залози (РМЗ), які широко використовуються для дослідження резистентності до лікарських засобів, клітинної сигналізації, механізму відповіді на лікування тощо.

Походження та загальна інформація про клітини MX-1

Перш ніж працювати з цією клітинною лінією, необхідно вивчити її особливості. Ми розглянемо майже всю загальну інформацію про клітинну лінію MX-1.

Безсмертна клітинна лінія MX-1 - це пухлинна клітинна лінія, отримана з ксенотрансплантата пухлини. Клітини MX-1 вважаються різновидом потрійного негативного раку молочної залози (РМЗ) [1]. Крім того, ці клітини є естроген-рецепторними і р53-негативними, оскільки не експресують ці гени.

Клітини МХ-1 - модельна система для потрійно-негативного раку молочної залози

Умови культивування клітинної лінії MX-1 не вибагливі. Ці клітини можна легко розмножувати і використовувати в різних дослідницьких лабораторіях для досліджень трансфекції. Метод транзиторної трансфекції зазвичай вивчає основні клітинні механізми та закономірності експресії генів у цій клітинній лінії [2, 3].

Ця клітинна лінія є надійною модельною системою для карциноми молочної залози. Вона може бути використана для розуміння молекулярних механізмів, що лежать в основі прогресування захворювання, а також для скринінгу та розробки препаратів для боротьби з хворобою. Зокрема, клітинна лінія аденокарциноми молочної залози людини MX-1 може бути альтернативою клітинам TNBC, оскільки вона не має естрогенових рецепторів [4].

Клітинна лінія МХ-1: Інформація про культивування

• Час подвоєння: час подвоєння популяції клітин INS-1 становить приблизно 44 години.
• Адгезія або суспензія: Клітини INS-1 ростуть як в суспензії, так і в адгезійній формі.
• Коефіцієнт субкультивування: Клітини INS-1 субкультивують у співвідношенні 1:3. Спочатку збирають суспендовані клітини. Адгезивні клітини промивають PBS та інкубують з розчином аккутази. Після відокремлення клітин додають свіже середовище. Потім суспендовані та прилиплі клітини центрифугують і збирають. Клітини обережно ресуспендують і розподіляють у нові колби для росту.
• Поживне середовище: RPMI 1640 використовується для культивування клітинної лінії інсуліноми щурів INS-1. До середовища додають 10% термоінактивованої фетальної сироватки великої рогатої худоби, 2,1 мМ стабільного глутаміну, 10 мМ HEPES, 2,0 г/л NaHCO3 та 1 мМ пірувату натрію.
• Умови вирощування: Клітини INS-1 зберігають у зволоженому інкубаторі при температурі 37°C та постійному надходженні 5% CO2.
• Зберігання: Бета-клітини INS-1 можна зберігати в паровій фазі рідкого азоту або при температурі нижче -150°C в електричному морозильнику протягом тривалого часу.
• Процес заморожування і середовище: Для заморожування клітин INS-1 використовують середовища CM-1 або CM-ACF, які застосовують повільний процес заморожування. Це дозволяє знижувати температуру лише на 1°C за хвилину, щоб захистити життєздатність клітин.
• Процес розморожування: Заморожені клітини INS-1 розморожують на водяній бані при температурі 37 градусів Цельсія протягом 40-60 секунд. Після розморожування клітини додають до свіжого середовища і безпосередньо переливають у нову колбу для росту. Через 24 години середовище замінюють для усунення компонентів, що замерзли.
• Рівень біобезпеки: Для культивування клітин інсуліноми щурів INS-1 необхідна лабораторія з рівнем біобезпеки 1.

Клітини MX-1: Застосування в дослідженнях

Клітинна лінія аденокарциноми молочної залози людини MX-1 зазвичай використовується в дослідженнях раку молочної залози замість таких клітин, як MDA-MB-231 або MCF-7. Нижче наведено кілька прикладів застосування цієї клітинної лінії в дослідженнях раку.

Механізми резистентності до ліків

Клітини MX-1 використовуються для вивчення молекулярних факторів, що опосередковують розвиток резистентності до препаратів проти раку молочної залози. Дослідження широко використовують клітини MX-1 для створення моделей резистентності до ліків. У дослідженні, опублікованому в 2021 році, повідомляється про використання клітин MX-1 для створення стійкої до доксорубіцину клітинної лінії раку молочної залози. Розроблена клітинна модель підтвердила участь ABC-транспортера ABCB1 та епітеліально-мезенхімального переходу (ЕМТ) у набутті хіміорезистентності [5].

Експресія генів/клітинний сигнальний шлях

Клітинну лінію MX-1 можна трансфікувати тимчасово, щоб з'ясувати патерни експресії генів і шляхи клітинної сигналізації. Дослідження використовували клітини MX-1 для трансфекції шРНК (короткої шпилькової РНК) і некодуючої РНК для вивчення їх впливу на проліферацію і ріст клітин раку молочної залози. Крім того, з'ясовуються пов'язані з цим генні сигнальні шляхи [2, 6].

Скринінг потенційних інгібіторів

Клітини MX-1 можна використовувати для скринінгу потенційних препаратів проти раку молочної залози, оскільки вони імітують мікрооточення ракових клітин. Дослідження показало терапевтичну активність вінорельбіну, мікротрубочкового токсину, який викликав загибель клітин і поліплоїдію в клітинах MX-1 [4].

Замовте свою клітинну лінію MX-1 сьогодні

Ресурси клітинної лінії MX-1: Протоколи, відео та інше

Доступні ресурси щодо методів культивування та трансфекції обмежені, але ми зібрали для вас якомога більше інформації.

Протоколи культивування клітин

Клітини MX-1 використовуються в багатьох дослідженнях з аналізу транзиторної трансфекції. Тут ми перерахували кілька ресурсів, які допоможуть вам з протоколами трансфекції.

• Трансфекція клітин MX-1: Ця публікація описує протокол трансфекції siRNA в клітини MX-1 для розробки моделі нокауту генів.
• Трансфекція клітин ссавців: Ця стаття містить всю необхідну інформацію про методи трансфекції, що використовуються в клітинних лініях ссавців.

Ми сподіваємося, що ця стаття надала вам цінні знання про клітинну лінію MX-1 і що ви отримали краще розуміння того, як культивувати, підтримувати і використовувати ці клітини у ваших дослідженнях. Якщо ви зацікавлені в роботі з клітинною лінією MX-1, не вагаючись замовляйте у нас, щоб розпочати свою дослідницьку подорож!

Часті запитання про клітинну лінію карциноми молочної залози MX-1

Посилання

1. Stefanski C.D. та J.R. Prosperi, Боротьба з резистентністю до CHK1 при потрійному негативному раку молочної залози: Інгібування EGFR як потенційна комбінована терапія. Ракова лікарська резистентність, 2022. 5(1): p. 229.
2. Васіяні, Х. та ін., Аналог cGAMP, c-di-AMP, активує STING-опосередкований шлях загибелі клітин у клітинах раку молочної залози з негативними естрогеновими рецепторами. Апоптоз, 2021. 26: p. 293-306.
3. Сян С. та ін., Протеомний аналіз впливу інгібітора апоптозубілок-подібногобілка-2на проліферацію клітин раку молочної залози. Доповіді з молекулярної медицини, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa, and J. Magae, Vinorelbine, a Microtubule Toxin, Induces Apoptosis and Polyploidy in MX-1, a Human Triple-Negative Breast Cancer Cell Line. Ган до Кагаку Рьохо. Рак і хіміотерапія, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Кубілюте Р. та ін. Негенотоксичний активатор ABCB1 тетрафенілфосфоній може сприяти резистентності до доксорубіцину в клітинній лінії раку молочної залози MX-1. Наукові доповіді, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Цзян Р. та ін., Міксомічний аналіз раку молочної залози: Довга некодуюча РНК linc01561 діє як цРНК, що бере участь у прогресуванні раку молочної залози. Міжнародний журнал біохімії та клітинної біології, 2018. 102: p. 1-9.