Клітинна лінія MX-1

MX-1 — це лінія клітин аденокарциноми молочної залози людини, отримана з моделі ксенотрансплантата раку молочної залози у атимічних мишей. Клітини аденокарциноми молочної залози людини були виділені з пухлини молочної залози 29-річної жінки європейського походження. Клітини MX-1 належать до категорії потрійно-негативного раку молочної залози (TNBC) і широко використовуються для досліджень резистентності до ліків, клітинної сигналізації, механізмів реакції на ліки тощо.

Походження та загальна інформація про клітини MX-1

Перш ніж розпочинати роботу з цією клітинною лінією, слід ознайомитися з її основними характеристиками. Ми розглянемо майже всю загальну інформацію щодо клітинної лінії MX-1.

Безсмертна клітинна лінія MX-1 — це пухлиногенна клітинна лінія, створена на основі ксенотрансплантата пухлини. Клітини MX-1 вважаються одним із типів потрійно-негативного раку молочної залози (TNBC) [1]. Крім того, ці клітини є негативними щодо естрогенних рецепторів та p53, оскільки не експресують ці гени.

Клітини MX-1 — модельна система для дослідження потрійно-негативного раку молочної залози

Умови культивування клітинної лінії MX-1 не є вибагливими. Ці клітини можна легко розмножувати та використовувати в різних дослідницьких лабораторіях для досліджень трансфекції. За допомогою методу транзиторної трансфекції зазвичай вивчають основні клітинні механізми та патерни експресії генів у цій клітинній лінії [2, 3].

Ця клітинна лінія є надійною модельною системою для карцином молочної залози. Її можна використовувати для розуміння молекулярних механізмів, що лежать в основі прогресування захворювання, а також для скринінгу та розробки лікарських засобів для боротьби з хворобою. Зокрема, клітинна лінія аденокарциноми молочної залози людини MX-1 може бути альтернативою клітинам ТНРМЗ, оскільки вона є негативною щодо естрогенних рецепторів [4].

Опубліковано: 2023 | Останній перегляд: травень 2026

Клітинна лінія MX-1: інформація щодо культивування

• Час подвоєння: Час подвоєння популяції клітин INS-1 становить приблизно 44 години.
• Адгезивні або у суспензії: Клітини INS-1 ростуть як у суспензії, так і в адгезивному стані.
• Коефіцієнт субкультури: Клітини INS-1 піддаються субкультурі зі співвідношенням поділу 1:3. Коротко кажучи, клітини в суспензії збирають. Адгезивні клітини промивають PBS та інкубують з розчином Accutase. Після відшарування до клітин додають свіже середовище. Потім як суспензійні, так і адгезивні клітини центрифугують і збирають. Клітини обережно ресуспендують і розливають у нові колби для росту.
• Середовище для культивування: для культивування клітинної лінії інсуліноми щурів INS-1 використовують RPMI 1640. Середовище доповнюють 10 % теплоінактивованою сироваткою ембріонів великої рогатої худоби, 2,1 мМ стабільним глутаміном, 10 мМ HEPES, 2,0 г/л NaHCO₃ та 1 мМ піруватом натрію.
• Умови культивування: клітини INS-1 утримують у зволоженому інкубаторі, налаштованому на температуру 37 °C, із безперервною подачею 5 % CO₂.
• Зберігання: бета-клітини INS-1 можна довгостроково зберігати у паровій фазі рідкого азоту або при температурі нижче -150 °C в електричній морозильній камері.
• Процес заморожування та середовище: Для заморожування клітин INS-1 методом повільного заморожування використовують середовища CM-1 або CM-ACF. Це забезпечує зниження температури лише на 1 °C за хвилину, що дозволяє зберегти життєздатність клітин.
• Процес розморожування: Заморожені клітини INS-1 розморожують у водяній бані, попередньо налаштованій на температуру 37 градусів Цельсія, протягом 40–60 секунд. Після розморожування до клітин додають свіже середовище та безпосередньо переливають їх у нову колбу для культивування. Через 24 години середовище замінюють, щоб усунути компоненти середовища, що залишилися після заморожування.
• Рівень біобезпеки: Для культивування клітин інсуліноми щурів INS-1 необхідна лабораторія 1-го рівня біобезпеки.

Клітини MX-1: Застосування в наукових дослідженнях

Ця клітинна лінія MX-1 аденокарциноми молочної залози людини зазвичай використовується в дослідженнях раку молочної залози замість таких клітин, як MDA-MB-231 або MCF-7. Ось кілька особливих застосувань цієї клітинної лінії в дослідженнях раку.  

Механізми резистентності до ліків

Клітини MX-1 використовуються для вивчення молекулярних факторів, що опосередковують розвиток резистентності до ліків проти раку молочної залози. У дослідженнях широко застосовуються клітини MX-1 для створення моделей резистентності до ліків. У дослідженні, опублікованому в 2021 році, повідомляється про використання клітин MX-1 для створення клітинної лінії раку молочної залози, резистентної до доксорубіцину. Розроблена клітинна модель підтвердила участь ABC-транспортера ABCB1 та епітеліально-мезенхімального переходу (EMT) у набутті хіміорезистентності [5].

Експресія генів/сигнальні шляхи клітин

Клітинну лінію MX-1 можна тимчасово трансфікувати для з’ясування патернів експресії генів та сигнальних шляхів клітин. У дослідженнях клітини MX-1 використовували для трансфекції shRNA (короткої шпилькоподібної РНК) та некодуючої РНК з метою вивчення їхнього впливу на проліферацію та ріст клітин раку молочної залози. Крім того, з’ясовано пов’язані з цим сигнальні шляхи генів [2, 6].

Скринінг потенційних інгібіторів

Клітини MX-1 можна використовувати для скринінгу потенційних лікарських засобів проти раку молочної залози, оскільки вони імітують мікросередовище ракових клітин. Одне дослідження продемонструвало терапевтичну активність вінорельбіну — токсину мікротрубочок, який викликав загибель клітин та поліплоїдію в клітинах MX-1 [4].

Замовте клітинну лінію MX-1 вже сьогодні

Клітинна лінія MX-1: матеріали — протоколи, відео та інше

Доступних ресурсів щодо методів культивування та трансфекції небагато, але ми зібрали для вас якомога більше інформації.

Протоколи культивування клітин

Клітини MX-1 використовуються в багатьох дослідженнях з аналізу транзиторної трансфекції. Тут ми навели кілька ресурсів, які допоможуть вам у роботі з протоколами трансфекції.

• Трансфекція клітин MX-1: У цій публікації описано протокол трансфекції siRNA в клітинах MX-1 для розробки моделі нокауту генів.
• Трансфекція клітин ссавців: у цій статті міститься вся необхідна інформація про методи трансфекції, що застосовуються у клітинних лініях ссавців.

Ми сподіваємося, що ця стаття надала вам цінні знання про клітинну лінію MX-1 і що ви отримали краще розуміння того, як культивувати, підтримувати та використовувати ці клітини у своїх дослідженнях. Якщо ви зацікавлені в роботі з клітинною лінією MX-1, не вагайтеся замовити її у нас, щоб розпочати свою дослідницьку подорож!

Часті запитання про клітинну лінію карциноми молочної залози MX-1

Література

1. Stefanski, C.D. та J.R. Prosperi, Боротьба з резистентністю до CHK1 при потрійно-негативному раку молочної залози: інгібування EGFR як потенційна комбінована терапія. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): с. 229.
2. Васіяні, Х. та ін., Аналог cGAMP, c-di-AMP, активує шлях клітинної смерті, опосередкований STING, у клітинах раку молочної залози з негативним рецептором естрогену. Apoptosis, 2021. 26: с. 293–306.
3. Сян, С. та ін., Протеомний аналіз впливу білка-2, подібного до інгібітора апоптозу, на проліферацію клітин раку молочної залози. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): с. 1–11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa та J. Magae, «Вінорельбін, токсин мікротрубочок, індукує апоптоз та поліплоїдію в MX-1, клітинній лінії тричі-негативного раку молочної залози людини». Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): с. 447–451.
5. Кубілюте, Р. та ін., Негенотоксичний активатор ABCB1 тетрафенілфосфоній може сприяти резистентності до доксорубіцину в клітинній лінії раку молочної залози MX-1. Scientific reports, 2021. 11(1): с. 1–11.
6. Цзян, Р., та ін., Міксомічний аналіз раку молочної залози: довга некодуюча РНК linc01561 діє як ceRNA, що бере участь у прогресуванні раку молочної залози. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: с. 1–9.