Клітинна лінія MCF-7: Наріжний камінь у дослідженні раку молочної залози та тестуванні ліків
Клітинна лінія MCF-7, створена в 1973 році з клітин аденокарциноми молочної залози людини, знаходиться на передньому краї досліджень раку молочної залози, забезпечуючи критично важливу модель для розгадки складної біології естроген- та прогестерон-позитивного раку молочної залози. Ці клітини слугують мікрокосмом раку молочної залози людини, демонструючи характеристики, що мають вирішальне значення для вивчення як гормонозалежного, так і незалежного росту пухлини. Дослідники використовують клітини MCF-7 для вивчення складного танцю гормонів, таких як естроген і тамоксифен, у регулюванні проліферації ракових клітин, заглиблюючись у молекулярні тонкощі від утворення сфероїдів до клінічного прогресування раку молочної залози
У дослідженнях метастатичного раку молочної залози клітини MCF-7 відіграють ключову роль, їх використовують у таких передових підходах, як вбудовування в мікротканини на каркасах або у вільних гідрогелях, що імітують природне середовище пухлини. Це допомагає ретельно вивчати метастатичне захворювання, особливо у жінок в постменопаузі, а також різний вплив на ліву і праву молочні залози. Фармакогенетичні та фармакоепігенетичні міркування лежать в основі цього дослідження, а клітини MCF-7 проливають світло на специфічні стадійні характеристики захворювання та відповіді на лікування in vivo.
Клітини MCF-7 також слугують основою в онкологічних дослідженнях для тестування інноваційних методів лікування, таких як електрохіміотерапія високою напругою, а також у тваринних моделях, які точно відтворюють клітини пухлини молочної залози людини. Роль мезенхімальних стовбурових клітин у модулюванні поведінки цих пухлинних клітин є ще одним аспектом, що вивчається. Крім того, розуміння взаємодії між естрогеном, андрогеном і ростом клітин раку молочної залози за допомогою MCF-7 дає безцінну інформацію, що сприяє безперервному пошуку знань у сфері досліджень раку, яка постійно розвивається.
Клітинна лінія MCF-7: Походження та загальна інформація
Перед початком роботи з клітинною лінією MCF-7 важливо розуміти її морфологію, розмір клітин та інші загальні характеристики.
Назва "MCF-7" розшифровується як Мічиганський фонд боротьби з раком - 7. Вона була створена доктором Соулом в Мічиганському фонді раку в Детройті, штат Мічиган. Ця клітинна лінія була виділена в 1970 році з плеврального випоту 69-річної європеоїдної жінки з метастатичною аденокарциномою молочної залози. MCF-7 - це підтип раку молочної залози Luminal A, який експресує рецептори естрогену, прогестерону та глюкокортикоїдів [1, 2].
Клітини MCF-7 є гормонозалежними клітинами раку молочної залози. Ці клітини епітелію молочної залози мають низький метастатичний потенціал і менш агресивні порівняно з гормононезалежними клітинами MDA-MB-231 [3].
- Морфологія клітин MCF-7:Епітеліоподібна морфологія; клітини ростуть у вигляді моношарів з сильними міжклітинними адгезіями; бруківкоподібний вигляд
- Розмір клітин: Коливається від 19,9 мкм до 33,9 мкм
- Геном і плоїдність: Модальне число хромосом: 82; Діапазон плоїдності: від 66 до 87
- Варіанти клітинної лінії MCF-7: Існує декілька варіантів КО, що демонструють різні генетичні профілі та експресію генів у порівнянні з вихідними клітинами MCF-7 [4]
Інформація про культуру клітин MCF-7
MCF-7 - це клітинні лінії, які широко культивуються в лабораторіях, що займаються дослідженнями раку молочної залози. Перед культивуванням цих клітин у вас може виникнути багато питань, наприклад, який час подвоєння клітин MCF-7? Чи є клітини MCF-7 адгезивними? І яке середовище для культивування клітин MCF-7? У цьому розділі ми поговоримо про наступні ключові моменти:
|
Аспект |
Опис |
|
Час подвоєння |
Середній час подвоєння клітин MCF-7 становить 24 години |
|
Прикріплені або в суспензії |
Клітини MCF-7 є адгезивними клітинами, які ростуть у вигляді моношарів і утворюють клітинні агрегати |
|
Щільність посіву |
Повільно зростаючі клітини MCF-7 висівають з щільністю 3 x 10^4 клітин/см^2. Після видалення середовища прилиплі клітини MCF-7 промивають 1 х PBS. Клітини відокремлюють за допомогою пасивуючого розчину Accutase. Додають культуральне середовище, і клітини центрифугують. Клітинні гранули ресуспендують і переносять у нові колби зі свіжим живильним середовищем |
|
Поживне середовище |
Для вирощування клітин MCF-7 використовують мінімальне живильне середовище Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM), доповнене 10% FBS і 2,5 мМ L-глутаміну. Поживне середовище оновлюють 2-3 рази на тиждень |
|
Умови вирощування |
Клітини MCF-7 вирощують у зволоженому інкубаторі при 37°C з 5% CO2 |
|
Зберігання |
Клітини зберігають у паровій фазі рідкого азоту (-195°C) для підтримки життєздатності клітин |
|
Процес заморожування та середовище |
Для заморожування клітин MCF-7 найкраще використовувати метод повільного заморожування, поступово знижуючи температуру на 1°C для збереження життєздатності клітин. Для заморожування клітин MCF-7 використовується середовище CM-1 або CM-ACF |
|
Процес розморожування |
Заморожені клітини MCF-7 швидко перемішують на попередньо нагрітій водяній бані (37°C) протягом 40-60 секунд. Невеликий шматочок льоду залишають у пробірці, щоб підтримувати її в прохолодному стані. Клітини можна безпосередньо культивувати в колбі зі свіжим живильним середовищем або центрифугувати, щоб видалити заморожуюче середовище. Отриману клітинну гранулу обережно ресуспендують у свіжому середовищі і розподіляють у колби для вирощування |
|
Рівень біобезпеки |
Рівень біобезпеки 1 використовується для роботи з потрійно позитивними клітинами MCF-7 |
Клітини MCF-7: Переваги та обмеження
Усі ракові клітинні лінії мають певні переваги та недоліки. Отже, які переваги клітин MCF-7 роблять їх привабливими для використання в дослідженнях? І які обмеження є у клітинної лінії MCF-7?
Переваги
Існує багато переваг, пов'язаних з клітинною лінією MCF-7. Ось кілька найважливіших з них:
- Добре охарактеризована: Клітинна лінія MCF-7 добре охарактеризована, що робить її частим вибором у лабораторіях, що займаються дослідженнями раку
- Чутливість до естрогенів: MCF-7 - це естроген-чутливі клітини раку молочної залози. Вони залежать від естрогену для росту і проліферації і експресують більш високі рівні мРНК рецептора естрогену-альфа (ERα) в порівнянні з ERβ. Це робить клітини MCF-7 надзвичайно корисними для вивчення ролі сигналізації естрогенових рецепторів у біології раку молочної залози.
- Гормонозалежні: Клітини MCF-7 є репрезентативними моделями рецептор-позитивного, гормонозалежного раку молочної залози.
Обмеження
Обмеження, які зазвичай приписують клітинам MCF-7, є наступними:
- Повільна швидкість росту: У порівнянні з іншими клітинними лініями раку молочної залози, клітини MCF-7 ростуть повільно. Тому ці клітини висівають при відносно високій щільності для проведення різних експериментів з культурою клітин.
Клітини MCF-7: Міждисциплінарні дослідження та значення для лікування раку молочної залози
Характеристика раку молочної залози за допомогою клітин MCF-7
Клітини MCF-7 є наріжним каменем у дослідженні раку молочної залози, отримані з тканини аденокарциноми молочної залози людини в 1973 році. Ці клітини особливо важливі для вивчення естроген-рецептор-позитивного раку молочної залози, оскільки вони експресують естрогенові рецептори. Вони дозволяють дослідникам вивчати нюанси естрогензалежного росту та ефективність гормональної терапії, наприклад, тамоксифену, а також з'ясовувати механізми дії та резистентність до цих препаратів
Окрім досліджень, пов'язаних з гормонами, клітини MCF-7 відіграють ключову роль у вивченні раку молочної залози на молекулярному рівні. Їх застосування варіюється від аналізу молекулярного профілю пухлин до вивчення проліферації та прогресування ракових клітин у 2D-культурах і тривимірних мікротканинах у скаффолдах, що тісно пов'язані з мікрооточенням пухлини in vivo
Боротьба з медикаментозною резистентністю при раку молочної залози
Клітини MCF-7 зробили значний внесок у розуміння та подолання медикаментозної резистентності при лікуванні раку молочної залози. Індукуючи резистентність шляхом впливу високих доз хіміотерапевтичних препаратів, дослідники можуть вивчати механізми, які призводять до рецидиву раку та зниження виживаності пацієнтів. Поглиблені дослідження за участю клітин MCF-7 виявили роль довгої некодуючої РНК HOTAIR у резистентності до ліків, що є потенційною мішенню для терапевтичного втручання
Постійний розвиток хіміотерапевтичних препаратів також спирається на клітини MCF-7 для скринінгу протиракового потенціалу різних речовин, включаючи природні продукти, синтетичні сполуки та наночастинки. Ці зусилля мають важливе значення для створення більш ефективних методів лікування раку молочної залози, здатних боротися зі стійкими до лікарських препаратів штамами ракових клітин
Прогресивні терапевтичні розробки та клінічне застосування
Знання, отримані в результаті досліджень з використанням клітин MCF-7, поширюються на терапевтичні розробки для лікування раку молочної залози. Будучи важливим інструментом доклінічного тестування, клітини MCF-7 використовуються для скринінгу сполук, визначення цитотоксичності та оцінки індукції апоптозу. Це дослідження має глибоке значення для майбутніх клінічних застосувань, де результати досліджень з використанням клітин MCF-7 будуть продовжувати інформувати про інноваційні стратегії для покращення догляду за пацієнтами та результатів лікування
Розкрийте свій дослідницький потенціал: Купуйте клітинні продукти MCF-7 вже сьогодні!
Клітини MCF-7: Публікації
Існує велика кількість публікацій, присвячених клітинам MCF-7. У цьому розділі ми розглянемо лише деякі з них:
Ця стаття опублікована в журналі Experimental and Therapeutic Medicine за 2019 рік авторства Zhixiang Li та колег. Дослідження показало, що нокдаун довгої некодуючої РНК HOTAIR усуває резистентність до доксорубіцину в клітинах раку молочної залози MCF-7 шляхом регулювання шляху PI3K/AKT/mTOR.
У цій публікації в журналі Chemico-Biological Interactions на материнських і резистентних до ліків клітинах MCF-7 досліджували вплив сполуки гуаджадіал на резистентність до ліків. Ця сполука інгібує експресію транспортера ABC та знижує регуляцію шляху PI3K/AKT для подолання множинної лікарської резистентності.
У статті описано синергічну взаємодію канабідіолу та п'яти хіміотерапевтичних препаратів у клітинах лінії MCF-7. Дослідження пропонує синергетичну ад'ювантну терапію на основі канабідіолу для лікування раку молочної залози.
У цій статті, опублікованій в журналі EuroBiotech Journal, використовували клітини MCF-7 для оцінки протипухлинного ефекту фенольних сполук, присутніх у деяких туніських лікарських рослинах.
У дослідженні запропоновано зелені наночастинки, навантажені екстрактом листя Allium cepa, в якості кандидата на лікарський засіб. Ці наночастинки проявляють протиракову та антиоксидантну активність у клітинах MCF-7.
Ресурси клітин MCF-7: Протоколи, відео та інше
MCF-7 - це часто культивована клітинна лінія раку молочної залози. Існує кілька доступних ресурсів про цю клітинну лінію, що пояснюють протоколи поводження з нею, культивування та трансфекції.
Протоколи культивування клітин
Нижче наведені деякі ресурси, що містять інформацію про культивування клітин MCF-7.
- Розщеплення клітин: Цей документ допоможе вам дізнатися про процес пасажування та розморожування клітин MCF-7.
- Клітини MCF-7: Ця стаття надасть всі базові та розширені знання про клітини MCF-7. Вона також містить протокол культивування клітин MCF-7.
Протоколи трансфекції
Ось кілька джерел, що містять методи трансфекції клітин лінії MCF-7.
- Трансфекція плазмідної ДНК в клітини MCF-7: За цим посиланням ви знайдете детальний протокол трансфекції клітин лінії MCF-7.
- Трансфекція клітин MCF-7: Це посилання містить оптимізовані протоколи трансфекції клітин лінії MCF-7, якими діляться вчені з усього світу.
Відео про клітинну лінію MCF-7
Існує багато відеоресурсів, присвячених клітинам MCF-7. Тут ми розповімо про деякі з них, пов'язані з трансфекцією та культивуванням MCF-7.
- Трансфекція клітин MCF-7: У цьому відео показано протокол трансфекції клітин MCF-7.
- Пасажування клітин: Це відео пояснює основний протокол культивування клітинних ліній.
- Заморожування адгезованих клітин: Це відео містить інформацію про заморожування адгезійних клітинних ліній.
Ми сподіваємось, що ця стаття допоможе вам у поводженні з клітинами MCF-7, їх субкультивуванні та підтримці. Крім того, вона може допомогти вам дізнатися про переваги та дослідницькі застосування цієї клітинної лінії. Якщо ви плануєте працювати з клітинами MCF-7, замовляйте їх у нас.
Відповіді на поширені запитання: Дослідження клітинних ліній MCF-7
Посилання
- Мун Х.-Р. та ін., "Підтипово-специфічна характеристика інвазії раку молочної залози з використанням мікрофлюїдної пухлинної платформи" PloS one, 2020, 15(6)
- Хегде С.М. та ін., "Взаємодія ядерних рецепторів (ER, PR і GR) та їх стероїдних гормонів у клітинах MCF-7" Mol Cell Biochem, 2016, 422(1-2)
- Comşa, Ş., A.M. Cimpean, and M. Raica, "Історія клітинної лінії раку молочної залози MCF-7: 40-річний досвід досліджень" Протиракові дослідження, 2015, 35(6)
- Лі А.В., С. Остеррайх і Н.Е. Девідсон, "Клітини MCF-7 - зміна курсу досліджень і лікування раку молочної залози протягом 45 років" JNCI: Журнал Національного інституту раку, 2015, 107(7)
- Li, Z. та ін., "Нокдаун lncRNA-HOTAIR знижує медикаментозну стійкість клітин раку молочної залози до доксорубіцину через сигнальний шлях PI3K/AKT/mTOR" Експериментальна і терапевтична медицина, 2019, 18(1)
- Li, Y. та ін., "Guajadial скасовує мультирезистентність шляхом інгібування експресії транспортера ABC та пригнічення шляху PI3K/Akt у клітинах раку молочної залози, резистентних до лікарських засобів" Хіміко-біологічні взаємодії, 2019, 305
- Руенрароенгсак П. та ін., "Смугаста-7-цільова доставка наночастинок оксиду цинку до резистентних до лікарських препаратів клітин раку молочної залози" Nanoscale, 2019, 11(27)
- Шріхастіні, В. та ін., "Біологічно активні сполуки рослинного походження, їх протиракові ефекти та підходи in silico як альтернативна цільова стратегія лікування раку молочної залози: Оновлений огляд" Онкологічні захворювання, 2021, 13(24)
- Ердоган, О. та ін., "Зелений синтез наночастинок срібла через екстракти листя Cynara scolymus: Характеристика, протипухлинний потенціал з фотодинамічною терапією в клітинах MCF7" PloS one, 2019, 14(6)
- Барбоза, А.М. та Ф. Мартель, "Таргетування транспортерів глюкози для терапії раку молочної залози: Вплив природних та синтетичних сполук" Рак, 2020, 12(1)
