Опубліковано: 2023 | Останній перегляд: травень 2026

Клітинна лінія Jurkat E6.1

Jurkat E6.1 — це клон клітинної лінії Jurkat, імморталізованої лінії людських Т-лімфоцитів, отриманої з периферичної крові. Вперше створена в 1977 році, вона використовується в дослідженнях, пов’язаних із сигнальними шляхами Т-клітинних рецепторів, адоптивною терапією Т-клітинами та іншими лімфоцитами проти раку, дослідженнями протоонкогенів, пов’язаних із кров’ю, виживанням клітин та їхньою диференціацією.

У цій статті ми наведемо всю інформацію та перелік необхідних умов, які вам слід знати перед початком роботи з клонованими клітинними лініями Jurkat E6.1, зокрема:

1. Походження, історія та загальна інформація
2. Характеристики клітинної культури
3. Застосування клітинних ліній Jurkat E6.1
4. Наукові публікації
5. Переваги та обмеження
6. Ресурси: протоколи, відео та інше

 1. Походження, історія та загальна інформація

Тут наведено всю необхідну інформацію щодо історії, походження та загальних характеристик клітинної лінії Jurkat E6.1, а також щодо роботи з нею в умовах клітинної культури.

• Jurkat E6.1 — це імморталізована лінія клітин Т-лімфоцитів людини. Ця клонована клітинна лінія є похідною від клітинної лінії Jurkat, отриманої з периферичної крові 14-річного хлопчика, який у 1976 році страждав на гостру лімфобластну лейкемію. Після виділення з крові цю клітинну лінію спочатку назвали JM, оскільки назви JM та Jurkat вказують на те, що ці клітинні лінії виділено від одного й того самого пацієнта. Клітинну лінію Jurkat E6.1 клонували з клітинних похідних, відомих як Jurkat-FHCRC.
• Клітинні лінії E6.1 походять від лейкемії; ці клітинні лінії використовуються для підвищення експресії IL-2 шляхом стимуляції моноклональними антитілами або лектином. Вони експресують рецептори антигенів Т-клітин; отже, ці клітинні лінії можуть використовуватися у дослідженні розладів імунної системи та в імуноонкологічних дослідженнях.
• Морфологія клітин Jurkat E6.1: клітини Jurkat E6.1 були виділені з організму пацієнта з лейкемією та мають змінену морфологію порівняно з Т-лімфоцитами, що робить їх безсмертними клітинними лініями. Лімфобласти утворюються, коли наївні лімфоцити активуються в результаті презентації антигену клітинами-презентерами. Це призводить до посиленого росту ядра, цитоплазми, мРНК та білків.
• Розмір клітин: клітинні лінії Jurkat E6.1 є клонованими та імунологічно безсмертними, діаметр яких зазвичай становить від 10 до 16 мкм (діаметр може варіюватися залежно від типу суспензії). Ці клітинні лінії мають суто сферичну форму.
• Геном та кількість хромосом: ці клітинні лінії є псевдодиплоїдними лініями Т-лімфоцитів людини, їхньою модальною хромосомою є 46-та. Також встановлено, що модальна хромосома присутня приблизно у 74 % клітин, а рівень поліплоїдії становить близько 5,3 %. Дослідження каріотипу виявили каріотип 46, X, Y, -2, -18, del (2) (p21p23), del (18) (p11.2). Хромосоми X та Y зазвичай мають нормальну кількість копій у більшості клітинних ліній.
• Клітинні лінії Jurkat порівняно з E6.1 Клітинні лінії Jurkat: клітинні лінії Jurkat є первинними батьківськими клітинними лініями, вперше виділеними з пацієнта з гострою лімфобластною лейкемією. Однак клітинні лінії E6.1 Jurkat є клонованими похідними клітинних ліній Jurkat-FHCRC.

Опубліковано: 2023 | Останній перегляд: травень 2026

Застосування клітинних ліній Jurkat E6.1

Клітинна лінія Jurkat E6.1 найчастіше використовується в дослідженнях та вивченні захворювань, пов’язаних з імунною системою, та ракових захворювань, що з нею пов’язані. Крім того, вона підходить для вивчення деяких складних аспектів, пов’язаних з ВІЛ-інфекцією, оскільки рецептор Т-клітин CD4 є необхідним для проникнення ретровірусу.

Нижче розглянуто деякі ключові сфери застосування цих клітинних ліній:

Модельна система для сигнальних шляхів Т-клітин та шляхів апоптозу: Ця клітинна лінія, отримана з Т-клітинної лейкемії, широко використовується в дослідженнях, пов’язаних із сигнальним каскадом Т-клітинного рецептора (TCR). Jurkat E6.1 виділяє більше IL-2 та IL-8, що згодом сприяє активації Т-клітин та запускає запальні шляхи. Ця клітинна лінія також відома своїм гіперфосфорильованим Pyk2 та підвищеним синтезом Vav1, що має вирішальний вплив на перебудову актинового цитоскелету в Т-клітинах. Сегрегацію ТКР у клітинній лінії Jurkat E6-1 також можна покращити шляхом примусової експресії LFA-1, що, у свою чергу, підсилює сигналізацію ТКР та експресію IL-2. Дослідження проліферації клітин та клітинного циклу також проводяться на клітинних лініях Jurkat E6.1. Їх переважно використовують для вивчення апоптотичних шляхів та індукції пошкодження ДНК сполуками, отриманими з морських та рослинних джерел. У дослідженні 2013 року за допомогою цих клітинних ліній оцінювали вплив епігональних кондиціонованих середовищ акули на клітини людини. Аналогічно, у клітинних лініях Jurkat E6.1 вивчали пригнічувальний вплив ірсутину рослинного походження на проліферацію клітин. Часто в дослідженнях протиракових препаратів також використовують Jurkat E6.1 для оцінки обраних мішеней. На цих клітинних лініях також вивчався вплив морських нейротоксинів, таких як бреветоксини (PbTx).

Дослідження ВІЛ: Одним із найважливіших застосувань клітинних ліній Jurkat E6.1 є їхня здатність слугувати підходящою моделлю для досліджень ВІЛ завдяки властивості відбирати різні сигнальні події, що індукують ТКА. Клітинні лінії Jurkat E6.1 використовуються не тільки для розуміння активації ВІЛ, а й для аналізу механізмів, що лежать в основі латентності ВІЛ. Реплікація та інфікування ВІЛ широко досліджувалися на цих клітинних лініях, де їх можна піддавати редагуванню генів та нокауту генів, як це було зроблено в дослідженні 2021 року. Для вивчення впливу доставки ліків на інфікування ВІЛ, зокрема на проникнення вірусу за допомогою гібридних полімерно-ліпідних наночастинок (PLN) з комбінованим навантаженням ефавірензу (Efa) та енфувіртиду (Enf) тривалої дії, використовувалися клітинні лінії Jurkat E6.1. Клітини Jurkat E6.1, модифіковані за допомогою CRISPR/Cas9, неодноразово використовувалися для вивчення механізмів, пов’язаних із проникненням, реплікацією та інфікуванням ВІЛ.

Наукові публікації

Ось кілька помітних прикладів із великої колекції досліджень, що включають клітинні лінії Jurkat E6.1.

Метисселенол — метаболіт селену — регулює експресію лігандів, які запускають активацію імунної системи через лімфоцитарний рецептор NKG2D

Використання клітинних ліній Jurkat E6.1, інкубованих у різних сполуках селену, для вивчення експресії лігандів та поверхневої експресії MICA/B.

Караказинова кислота, ент-3,4-секо-каурен, сприяє апоптозу та диференціації клітин шляхом інгібування сигнального шляху NFkB у лейкозних клітинах.

Вивчення цитотоксичності, індукованої караказиновою кислотою, у лініях Т-клітин людини, таких як Jurkat E6.1 та HL-60.

Докази in vitro розвитку резистентності до азидотимідину в клітинних лініях Т-лімфоцитарної лейкемії (Jurkat E6–1/AZT-100) та у дітей з інфекцією ВІЛ-1

Використано клітинну лінію Jurkat E6.1, яку тривалий час інкубували з препаратом AZT, для дослідження резистентності до азидотимідину (AZT) у пацієнтів, інфікованих ВІЛ-1.

Дослідження клітинної лінії Jurkat E6.1 щодо впливу деяких біоіндолів на плинність мембран

У цьому дослідженні використовували систему аналізу поляризованої флуоресценції для вивчення впливу біоіндолів, зокрема серотоніну, триптофану та мелатоніну, на плинність клітинної мембрани в клітинних лініях Jurkat E6.1.

Молекулярний механізм індукції апоптозу в клітинах Jurkat E6-1 екстрактом алкалоїдів Tribulus terrestris

Екстракт алкалоїдів Tribulus terrestris індукував апоптоз у клітинах Jurkat E6.1 з метою з’ясування механізму дії.

Підвищення експресії LFA-1 покращує архітектуру імунного синапсу та передачу сигналів через Т-клітинні рецептори в клітинах Jurkat E6.1

Сигналізація Т-клітинного рецептора в клітинах Jurkat E6.1 була посилена шляхом значного підвищення експресії LFA-1.

Переваги та обмеження

Як і інші клітинні лінії, Jurkat E6.1 має свої переваги та обмеження.

Переваги

Існує багато причин, чому її вважають кращим вибором для цих застосувань:

• Спосіб росту

  Jurkat E6.1 — це суспензійна та неадерівна клітинна лінія, тобто вона росте у суспензії та не прилипає до поверхні культурального середовища.

• Експресія генів

  Клітинна лінія Jurkat E6.1 експресує гени, що кодують інтерлейкін-2 (IL‑2) та CD3. Було показано, що при стимуляції моноклональними антитілами, лектинами або форболовими ефірами проти антигенного комплексу T3 ці клітини продукують підвищену кількість IL-2.

• Експресія антигенів

  Клітинна лінія Jurkat E6.1 експресує антиген CD3, пов’язаний з активацією та сигналізацією Т-клітин.

• Маркери експресії

  Клітинна лінія експресує маркери Т-клітинного антигенного рецептора (TCR), які відіграють вирішальну роль у розпізнаванні Т-клітин та імунній відповіді.

• Придатність для трансфекції

  Клітинна лінія Jurkat E6.1 підходить для експериментів з трансфекцією, що дозволяє вводити в клітини екзогенний генетичний матеріал для різних наукових цілей.

Обмеження

Після розгляду переваг давайте розглянемо обмеження, пов’язані з використанням клітинних ліній Jurkat E6.1:

• Трансфекція клітин за допомогою вірусного вектора

  Трансфекція клітин Jurkat E6.1 є складною через їх Т-клітинне походження. Зазвичай для генетичної модифікації потрібні дорогі та трудомісткі вірусні вектори. Невірусні вектори демонструють низьку ефективність трансфекції та значну токсичність у клітинах Jurkat.

• Бактеріальне забруднення

  Культури клітин Jurkat E6.1 слід контролювати на предмет можливого бактеріального забруднення, щоб забезпечити достовірність результатів експериментів.

• Вірусне забруднення

  Клітинні лінії Jurkat E6.1 експресують різні рецептори хемокінів та низькі рівні CD4, що полегшує проникнення вірусів. Це робить їх вразливими до вірусів, що інфікують Т-клітини, таких як HTLV та ВІЛ.

6. Ресурси: протоколи, відео та інше

У цьому розділі розглядаються методи та протоколи культивування клітин і трансфекції, а також навчальні відео, пов’язані з цією клітинною лінією:

Протоколи культивування клітин

Ось кілька основних процедур культивування, яких слід дотримуватися для цієї клітинної лінії:

• Стандартна операційна процедура (SOP) культивування клітин, розмноження клітин Jurkat: Каліфорнійський університет також надав у своєму браузері USCS Genome метод культивування клону Jurkat E6-1.
• Культивування та робота з клітинами Jurkat, клон E6-1: Компанія Elabscience розмістила протокол роботи з культурою на своєму сайті в описі продукту.

Протоколи трансфекції

Ось перелік різних доступних протоколів трансфекції:

• Протокол трансфекції клітин Jurkat з використанням реагенту Lipofectamine LTX: Протокол трансфекції клітин Jurkat з використанням реагенту Lipofectamine LTX від компанії ThermoFisher. 
• Протокол Amaxa™ 4D-Nucleofector™ для клону Jurkat E6.1 [ATCC®]: Компанія Lonza Group AG надала протокол трансфекції для клону Jurkat E6.1 від ATCC із використанням пристрою 4D-Nucleofector® X Unit.

Відео про Jurkat E6.1

Існує кілька чудових відео, що висвітлюють основи культивування клітин, процедури, проліферацію, висівання на чашки та інші теми.

• Пасажування клітин: Основи культивування клітин: Це чудове відео від компанії ThermoFisher, яке містить базові вказівки щодо пасажування ліній людських клітин.
• Розморожування клітин: Основи культивування клітин: Це відео містить основні інструкції щодо культивування та розморожування клітин від компанії ThermoFisher.
• Протокол трансфекції плазмідної ДНК: це відео, присвячене протоколу трансфекції плазмідної ДНК за допомогою реагентів Lipofectamine® LTX та Plus™ від компанії ThermoFisher.
• Вимірювання апоптозу за допомогою суспензії клітин Jurkat, оброблених 3-мікромолярним стауроспорином: Це відео демонструє, як провести аналіз апоптозу на цитометрі Celigo з використанням барвника Hoechst та реагентів каспази 3/7 від компанії Nexcelom Bioscience.