Клітини гепатиту В: Дослідження та відкриття гепатоцелюлярної карциноми

HEP3B - це клітинні лінії гепатоцитарної карциноми, отримані від людини. Вона широко використовується в дослідженнях гепатотоксичності та метаболізму лікарських засобів. Ефективність трансфекції HEP3B є значною, тому ці клітини широко використовуються для вивчення розвитку, прогресування раку печінки та терапевтичних втручань. Ця стаття містить всю необхідну інформацію про клітинну лінію HEP3B, яка допоможе вам у роботі з нею. В основному, вона буде включати в себе

Загальні характеристики та походження клітин HEP3B
Інформація про культивування клітинної лінії HEP3B
Клітинна лінія HEP3B: Переваги та обмеження
Застосування клітин HEP3B в дослідженнях
Публікації про клітинну лінію HEP3B
Ресурси по клітині HEP3B: Протоколи, відео та інше

1.загальні характеристики та походження клітин HEP3B

Основна інформація, яка вам потрібна про клітинну лінію - це її походження та загальні характеристики. Це може допомогти вам прийняти рішення про її використання у вашому дослідженні та допомогти вам у роботі з нею. Цей розділ статті охоплює всю необхідну інформацію про походження та характеристики HEP3B. Тут ви дізнаєтесь Що таке клітинні лінії гепатиту 3B? Яке походження клітин Hep3B? Яка морфологія клітин HEP3B?

HEP3B, безперервна клітинна лінія гепатоми людини, була отримана з тканини печінки 8-річного африканського хлопчика з гепатоцелюлярною карциномою (ГЦК). Вона була створена Аденом та його колегами в 1979 році в лабораторії Барбари Ноулз (Barbara B. Knowles) в Інституті Вістар, Філадельфія, США [1].
Клітини HEP3B мають інтеграцію геному вірусу гепатиту В (HBV) у своїй хромосомі.
Ці клітини гепатоцитарної карциноми мають епітеліальну морфологію.
Клітини HEP3B мають модальне число хромосом 60. На відміну від HepG2, вони не мають перебудованої хромосоми 1.

У чому різниця між HepG2 і Hep3B?

HepG2 і Hep3B відрізняються за кількістю хромосом у клітині. HEP3B містить 60 хромосом, тоді як клітини HepG2 мають в середньому 55 хромосом. Крім того, HepG2 є непухлинним і негативним до гепатиту В, тоді як HEP3B є пухлинним і позитивним до гепатиту В.

Карцинома печінки при великому збільшенні під мікроскопом.

2.інформація про культивування клітинної лінії HEP3B

Знання інформації про культивування клітинної лінії може полегшити вам роботу з нею. Цей розділ охоплює всі ключові моменти, пов'язані з культивуванням клітинної лінії ВГВ HEP3B, в тому числі: Який час подвоєння клітин Hep3B? Які умови культивування HEP3B? Як культивувати клітини HEP3B ГЦК?

Ключові моменти для культивування клітин HEP3B

Час подвоєння:	Час подвоєння клітин HEP3B становить приблизно 36 годин.
Прикріплені або в суспензії:	Ця лінія клітин гепатоми є адгезивною.
Співвідношення поділу:	Клітини HEP3B субкультивують у співвідношенні від 1:2 до 1:4. Адгезовані клітини HEP3B промивають 1 х PBS, а потім інкубують з розчином дисоціації Accutase. Через 8-10 хвилин додають свіже середовище і клітини центрифугують. Потім зібрані клітини обережно ресуспендують і виливають у колби з культуральним середовищем у рекомендованому співвідношенні.
Поживне середовище:	Для культивування клітин HEP3B використовують середовище EMEM, що містить 10% FBS, 2,2 г/л NaHCO3, 2 мМ L-глутаміну та збалансований сольовий розчин Ерла (EBSS).
Умови культивування:	Клітини HEP3B культивують у зволоженому інкубаторі при 37°C з постійною подачею 5% CO2.
Зберігання:	Заморожені клітини HEP3B зберігають при температурі нижче -150°C в електричному морозильнику або в паровій фазі рідкого азоту.
Процес і середовище заморожування:	Рекомендоване середовище для заморожування клітин HEP3B - CM-1 або CM-ACF. Клітини заморожують за допомогою повільного процесу заморожування, який дозволяє знижувати температуру лише на 1°C за хвилину, щоб захистити життєздатність клітин.
Процес розморожування:	Заморожені клітини розморожують на водяній бані при температурі 37°C протягом 40-60 секунд. Пізніше ці клітини додають до свіжого живильного середовища і центрифугують, щоб видалити заморожуючі елементи середовища. Зібрані клітини ресуспендують і розподіляють у нові колби для росту.
Рівень біобезпеки:	Для культивування клітин HEP3B необхідна лабораторія з рівнем біобезпеки 1.

Адгезійний напівконфлюентний шар клітин Hep3B при 10-кратному та 20-кратному збільшенні.

3.клітинна лінія HEP3B: Переваги та обмеження

HEP3B - широко використовувана клітинна лінія гепатоцелюлярної карциноми. У цьому розділі ми зосередимося на деяких ключових перевагах та обмеженнях цих клітин гепатоми.

Переваги

Основними перевагами клітин HEP3B є

Легкість у культивуванні	Клітини HEP3B не мають вибагливих вимог до культури клітин, що робить їх простими в обробці та підтримці в дослідницькій лабораторії. Це спрощує експериментальні процедури.
Висока ефективність трансфекції	Клітини HEP3B демонструють чудову ефективність трансфекції, що робить їх широко використовуваними в генетичних маніпуляціях і дослідженнях, пов'язаних з експресією генів.
Пухлиногенність	HEP3B - це пухлиногенна лінія клітин гепатоцелюлярної карциноми, здатна утворювати пухлини при введенні мишам з ослабленим імунітетом. Це допомагає вивчати прогресування та розвиток раку за допомогою моделей ксенотрансплантатів HEP3B.
Статус HEP3B P53	Клітини HEP3B мають мутацію гена P53, подібну до гепатоцелюлярної карциноми (ГЦК) та інших видів раку, що робить їх актуальними для вивчення впливу мутації P53 на ріст, розвиток і прогресування раку.

Обмеження

Обмеження, пов'язані з клітинною лінією HEP3B, полягають у наступному:

Клітинна модель in vitro

Клітинна лінія HEP3B слугує in vitro моделлю клітин гепатоцелюлярної карциноми (ГЦК). Однак вона може не повністю відображати всю складність ГЦК, яка зустрічається в живих організмах. Отже, результати експериментів in vitro можуть відрізнятися від тих, що спостерігаються in vivo.

4.застосування клітин HEP3B в дослідженнях

Клітинна лінія HEP3B пропонує кілька варіантів застосування в біомедичних дослідженнях. Деякі з ключових дослідницьких застосувань клітин HEP3B включають:

Біологія раку: HEP3B - це клітинна лінія гепатоцелюлярної карциноми людини. Це безцінна клітинна модель для дослідження клітинних і молекулярних механізмів, що лежать в основі розвитку і прогресування ГЦК. Дослідники використовують ці клітини для вивчення генетичних мутацій, клітинних процесів і клітинних сигнальних шляхів, пов'язаних з раком печінки. Наприклад, в одному з досліджень на клітинах HEP3B було виявлено, що мікроРНК-223-3p регулює компоненти NLRP3 інфламасоми, пригнічує проліферацію та посилює апоптоз клітин гепатокарциноми HEP3B [2].
Скринінг та розробка ліків: Клітинна лінія HEP3B також використовується для тестування, скринінгу та розробки нових терапевтичних засобів проти карциноми печінки. Крім того, її використовують для оцінки токсичності та ефективності різних протиракових препаратів і методів лікування. Дослідники також використовували ці клітини гепатоми для вивчення метаболізму ліків. Дослідники використовували клітини HEP3B і оцінили цитотоксичний потенціал рослинного екстракту Cotinus coggygria на клітинах карциноми гепатоцитів HEP3B [3].
Вірусні інфекції: HEP3B - це позитивна до вірусу гепатиту В клітинна лінія, тому її використовують для вивчення вірусних інфекцій, які можуть призвести до розвитку раку печінки, тобто HBV і HCV. Це може допомогти краще зрозуміти вірусні інфекції та розробити потенційне противірусне лікування. Наприклад, в одному дослідженні використовували ракові клітини гепатоцитів HEP3B і вивчали важливість убіквітації для поширення вірусу гепатиту С. Результати показали, що убіквітин-специфічна протеаза 15 (USP15) бере участь у поширенні ВГС шляхом регулювання специфічних для гепатоцитів функцій, включаючи утворення ліпідних крапель і трансляцію РНК ВГС [4].

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 305141

5.публікації про клітинну лінію HEP3B

У цьому розділі статті ми розглянемо кілька цікавих наукових публікацій, присвячених клітинам лінії HEP3B.

Регуляція апоптозу та аутофагії лютеоліном у клітинах гепатоцелюлярного раку людини Hep3B

Ця публікація в журналі Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) припускає, що стрес, спричинений сполуками лютеоліну, може чинити протипухлинну дію на клітини HEP3B з нульовим вмістом Р53 в Р53-незалежний спосіб.

Потенційне таргетування клітин раку печінки Hep3B за допомогою люпеолу, виділеного з Avicennia marina

У цьому дослідженні в Archiv der Pharmazie (2021) запропоновано пентациклічний тритерпеноїд люпеол як потенційний протираковий агент проти клітин HEP3B.

Етанольний екстракт з Cnidium monnieri (L.) Cusson індукує зупинку клітинного циклу та апоптоз через регуляцію p53-незалежного шляху в клітинах гепатоцелюлярної карциноми HepG2 та Hep3B

Стаття опублікована в журналі Molecular Medicine Reports (2017). Результати дослідження свідчать, що етанольний екстракт Cnidium monnieri (L.) Cusson індукує загибель клітин (апоптоз) та зупинку клітинного циклу в клітинах гепатокарциноми HepG2 та Hep3B через регуляцію р53 та сигнального шляху Akt/GSK-3β.

Ауранофін посилює сульфорафан-опосередкований апоптоз у клітинах гепатоцелюлярної карциноми Hep3B шляхом інактивації сигнального шляху PI3K/Akt

У дослідженні, опублікованому в журналі Biomolecules and Therapeutics (2020), припускається, що ауранофін проявляє синергічну активність і сприяє сульфорафан-опосередкованому апоптозу клітин HEP3B через активацію PI3K/AKT шляху.

Циркулярна РНК-0072309 чинить протипухлинний вплив на клітини лінії Hep3B шляхом таргетування мікроРНК-665

У цій науковій статті в BioFactors (2023) припускається, що циркулярна РНК-0072309 чинить протипухлинну дію на клітини гепатоцелюлярної карциноми HEP3B шляхом таргетування мікроРНК-665.

6.ресурси для клітинної лінії HEP3B: Протоколи, відео та інше

Нижче наведено кілька ресурсів, присвячених клітинам HEP3B:

Трансфекція HEP3B: Це відео пояснює протокол трансфекції клітин HEP3B.
Ефективність трансфекції HEP3B: Це посилання допоможе вам дізнатися про склад середовища HEP3B DMEM, пасажування клітин та протокол трансфекції клітин HEP3B. Крім того, воно містить інформацію для оптимізації використання реагенту HEP3B ліпофектамін 3000 у вашому протоколі трансфекції.

За наступним посиланням ви знайдете протокол культивування клітин HEP3B:

Умови культивування HEP3B: За цим посиланням ви можете ознайомитися з протоколом поводження з культурами Huh7 і HEP3B та їх підтримання.
Клітини HEP3B: На цьому веб-сайті є багато інформації про клітини HEP3B, включаючи середовище HEP3B, протокол розщеплення клітин, розморожування та поводження з проліферативними та кріоконсервованими культурами.

Список використаних джерел

Puttahanumantharayappa, L.D. та ін., Походження та властивості клітинних ліній гепатоцелюлярної карциноми. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
Wan, L. та ін., miRNA-223-3p регулює NLRP3 для сприяння апоптозу та інгібування проліферації клітин гепатиту В. Експериментальна і терапевтична медицина, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
Данджоллі-Хашані, Д. та С. Селен-Ісбілір, Цитотоксична дія екстракту Cotinus coggygria на клітинну лінію раку Hep3B. Natural Product Research, 2022: с. 1-4.
Кусакабе, С. та ін., USP15 бере участь у розмноженні вірусу гепатиту С через регуляцію трансляції вірусної РНК та утворення ліпідних крапель. Журнал вірусології, 2019. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.