Клітинна лінія HT22
HT22 — це лінія мишачих нейрональних клітин, яка широко використовується в нейробіологічних дослідженнях. Вона є цінною для вивчення нейродегенеративних розладів та тестування потенційних нейропротекторних методів лікування. Крім того, клітини HT22 чутливі до глутамату, тому їх використовують для дослідження токсичності, спричиненої глутаматом, або пошкодження нейронів.
- Середовище для культивування
- Для культивування клітин HT22 використовується середовище DMEM. Для забезпечення оптимального росту клітин його доповнюють 10 % FBS, 4,5 г/л глюкози, 4 мМ L-глутаміну, 1,5 г/л NaHCO3 та 1,0 мМ пірувату натрію.
- Час подвоєння
- Час подвоєння клітин HT22 становить приблизно 15 годин.
- Тип росту
- Клітини HT22 є адгезивними.
- Рівень біобезпеки
- BSL-1
- Доступно у
- Cytion — Замовити HT22
У цій статті висвітлено найважливіші аспекти клітин HT22, які можуть допомогти вам у вашій дослідницькій роботі. У ній переважно розглядаються:
- Загальні характеристики та походження клітин HT22
- Інформація про культивування клітинної лінії HT22
- Переваги та недоліки клітинної лінії HT22
- Дослідницькі застосування клітинної лінії HT22
- Наукові публікації, присвячені клітинам HT22
- Ресурси щодо клітин HT22: протоколи, відео та інше
Загальні характеристики та походження клітин HT22
Цей розділ статті проллє світло на походження та загальні характеристики клітин HT22. Знання цієї інформації про клітинну лінію є необхідним перед початком роботи з нею. Звідси ви дізнаєтеся: Що таке клітини HT22? Яка морфологія клітин гіпокампу HT22? Який розмір клітин HT22?
HT22 — це безперервна клітинна лінія, отримана з гіпокампу мишачого мозку. Це субклон батьківської клітинної лінії HT-4, розробленої шляхом імунізації мишачих нейрональних тканин за допомогою чутливого до температури поліомавірусу мавпячого вірусу 40 (SV40) T-антигену.
Ці клітини відрізняються від зрілих клітин гіпокампу, оскільки в них відсутні глутаматні та холінергічні рецептори, як у зрілих нейронів гіпокампального походження. Таким чином, вони не підходять для досліджень, пов'язаних з пам'яттю [1].
Клітини HT22 мають вигляд, схожий на епітеліальні клітини.
Інформація щодо культивування клітинної лінії HT22
Клітини HT22 використовуються в наукових лабораторіях, що займаються дослідженнями в галузі нейробіології. Перед культивуванням цих клітин дослідники шукають необхідну інформацію про культивування клітин, яка зробить їхню роботу легкою та ефективною. У цьому розділі висвітлено всі ключові моменти культивування клітин HT22. Ви дізнаєтеся: Який час подвоєння клітин HT22? Як культивувати клітини HT22? Який протокол культивування клітин HT22? Яке середовище для культивування клітин HT22?
Ключові моменти культивування клітин HT22
Час подвоєння:
Час подвоєння клітин HT22 становить приблизно 15 годин.
Адгезивні або в суспензії:
Клітини HT22 є адгезивними.
Коефіцієнт субкультури:
Коефіцієнт субкультури для клітин гіпокампу HT22 становить від 1:3 до 1:6. Коротко кажучи, середовище видаляють, а адгезивні клітини промивають 1 x PBS. У колбу додають розчин для дисоціації Accutase, і клітини інкубують протягом 8–10 хвилин при кімнатній температурі. Після цього додають свіже культуральне середовище, а клітини збирають у флакон для центрифугування. Отриманий осад клітин обережно ресуспендують, а клітини переносять у культуральну колбу для росту.
Середовище для росту:
Для культивування клітин HT22 використовується середовище DMEM. Для оптимального росту клітин його доповнюють 10% FBS, 4,5 г/л глюкози, 4 мМ L-глутаміну, 1,5 г/л NaHCO3 та 1,0 мМ пірувату натрію.
Умови вирощування:
Культури клітин HT22 утримують у зволоженому інкубаторі (температура 37 °C) з подачею 5% CO2.
Зберігання:
Заморожені клітини HT22 можна довгостроково зберігати при температурі нижче -150 °C у паровій фазі рідкого азоту або в електричній морозильній камері з наднизькою температурою.
Процес заморожування та середовище:
Клітини HT22 можна заморожувати в середовищах CM-1 або CM-ACF, використовуючи метод повільного заморожування. Цей процес дозволяє знижувати температуру зразка лише на 1 °C за хвилину, захищає клітини від шоку та допомагає зберегти їх життєздатність.
Процес розморожування:
Клітини розморожують у водяній бані при температурі 37 °C протягом 40–60 секунд, доки не залишиться невеликий шматок льоду. Після цього до клітин додають культуральне середовище, а потім їх центрифугують для видалення компонентів середовища для заморожування. Осад клітин ресуспендують, а клітини переливають у нову колбу, що містить культуральне середовище. Після цього клітини інкубують при температурі 37 °C в інкубаторі протягом щонайменше 24 годин.
Рівень біобезпеки:
Для культивування клітин HT22 обов'язковим є використання лабораторних умов рівня біобезпеки 1.
Переваги та недоліки клітинної лінії HT22
Клітини гіпокампу HT22 мають певні переваги та недоліки, що відрізняють їх від інших нейрональних клітинних ліній. Нижче наведено деякі помітні переваги та недоліки цієї клітинної лінії.
Переваги
Перевагами мишачої нейрональної клітинної лінії HT22 є:
-
Швидка швидкість росту
Клітини HT22 мають час подвоєння 15 годин, що дозволяє проводити швидкі та ефективні експерименти та сприяє своєчасному отриманню результатів досліджень.
-
Імунізація
HT22 — це імморталізована клітинна лінія, що забезпечує безперервний ріст протягом тривалого часу. Це забезпечує постійну доступність клітин, скорочує час і витрати, а також сприяє проведенню довгострокових експериментів із стабільними результатами.
Недоліки
Недоліки клітин HT22:
-
Мишаче походження
Клітинна лінія HT22 була отримана з тканини гіпокампу мишачого мозку, що може не повністю відображати складність фізіології та поведінки нейронів людини, обмежуючи їх трансляційну релевантність.
4. Дослідницькі застосування клітинної лінії HT22
Клітини HT22 широко використовуються в дослідженнях у галузі нейробіології. У цьому розділі статті розглядаються кілька перспективних застосувань цієї клітинної лінії:
- Дослідження в галузі нейронауки: Клітини HT22 широко використовуються в дослідженнях нейродегенеративних захворювань, таких як хвороба Альцгеймера та хвороба Паркінсона. Вони вважаються цінним дослідницьким інструментом для вивчення механізмів нейротоксичності та окисного стресу, пов’язаних із цими захворюваннями. Дослідження, проведене у 2020 році, виявило, що шлях PI3K/AKT/CREB бере участь у нейротоксичності, індукованій гіперглікемією, у клітинах HT22 [2]. Аналогічно, в недавньому дослідженні було висунуто гіпотезу, що шлях Nrf2/HO‐1 та сигнальна вісь NF-κB відіграють значну роль у токсичності бета-амілоїду HT22 [3].
- Скринінг лікарських засобів: клітини HT22 широко використовуються для тестування та скринінгу лікарських засобів. Вони допомагають дослідникам ідентифікувати потенційні терапевтичні агенти, що виявляють нейропротекторні ефекти для боротьби з нейродегенеративними захворюваннями. У дослідженні, проведеному в 2019 році, вивчався нейропротекторний потенціал сполуки тетрагідрокуркуміну в клітинах гіпокампу HT22, оброблених глутаматом. У цьому випадку глутамат індукує окислювальний стрес у клітинах HT22 та спричиняє загибель клітин шляхом активації мітоген-активованих протеїнкіназ [4].
5. Наукові публікації, присвячені клітинам HT22
Ось кілька цікавих наукових статей, присвячених клітинній лінії HT22:
У цьому дослідженні, опублікованому в International Journal of Molecular Medicine (2019), було висунуто гіпотезу про нейропротекторний потенціал кроцину, сполуки, виділеної з Crocus sativus L., у клітинах HT22, пошкоджених L-глутаматом.
У цій публікації в журналі Neuropharmacology (2018) повідомляється, що похідні оксиндолу захищають від загибелі клітин HT22, спричиненої окислювальним стресом.
Ця наукова стаття була опублікована в журналі «Journal of Ginseng Research» у 2019 році. У цьому дослідженні вивчалися нейропротекторні ефекти природного продукту, гінзенозиду Rb2, з використанням клітинної лінії HT22. Дослідження показало, що гінзенозид Rb2 ефективно зменшував окислювальний стрес, спричинений глутаматом, та загибель клітин у клітинах гіпокампу мишей HT22.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Ecotoxicology and Environmental Safety» (2021), оцінювали цитотоксичний потенціал наночастинок срібла в клітинній лінії HT22.
Ферростатин-1 захищає клітини HT-22 від окислювальної токсичності
Ця наукова стаття була опублікована у 2020 році в журналі «Neural regeneration research». У ній висловлено припущення, що феростатин-1, інгібітор фероптозу, запобігає окислювальній токсичності в клітинах гіпокампу HT22.
Ресурси для клітин HT22: протоколи, відео та інше
Деякі онлайн-ресурси про клітини HT22 пояснюють протоколи їх трансфекції, диференціації та культивування:
- Трансфекція HT22: Цей документ містить оптимізований протокол трансфекції HT22 у 24- та 96-лункових культуральних планшетах.
- Диференціація клітин HT22: Ця стаття надасть вам вичерпну інформацію про протокол диференціації HT22.
Наступне посилання містить протокол культивування клітин HT22:
- Субкультура клітин HT22: це посилання допоможе вам ознайомитися з протоколом субкультури клітинної лінії HT22. Крім того, воно допоможе вам ознайомитися з протоколом індукції нейротоксичності в клітинах.
- Клітини гіпокампу HT22: Цей веб-сайт містить багато корисної інформації про час подвоєння клітин HT22, середовища та протоколи культивування клітин.
Посилання
- He, M., et al., Диференціація зумовлює схильність до ексайтотоксичності в нейронах HT22. Neural Regen Res, 2013. 8(14): с. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Фізетин запобігає нейротоксичності клітин HT22, індукованій високим рівнем глюкози, через сигнальний шлях PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: с. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Захисні ефекти берберину проти нейротоксичності, індукованої β-амілоїдом, у клітинах HT22 через шлях Nrf2/HO‐1. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: с. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Нейропротекторні ефекти тетрагідрокуркуміну проти окисного стресу, індукованого глутаматом, у клітинах гіпокампу HT22. Molecules, 2019. 25(1): с. 144.