Клітини HL-60: Основи дослідження гострої мієлоїдної лейкемії

HL-60 - це безсмертна лінія лейкемії людини. Вона широко використовується для вивчення біології раку та дослідження ефективності протиракових препаратів. Крім того, вона також може бути використана для розуміння різних клітинних і молекулярних механізмів, що беруть участь у проліферації та диференціації лейкемічних клітин.

Клітинна лінія HL-60: Походження та загальна інформація

Клітинна лінія HL-60 слугує важливою моделлю в гематологічних дослідженнях, пропонуючи глибоке розуміння природи та лікування гострої промієлоцитарної лейкемії. Ця публікація в блозі розповідає про походження та особливості клітинної лінії HL-60, проливаючи світло на її ключову роль у медичних дослідженнях та терапевтичних розробках.

Вперше HL-60 була отримана з лейкемічних клітин 36-річної європеоїдної жінки з діагнозом гострої промієлоцитарної лейкемії. Ця новаторська робота, проведена С.Дж. Коллінзом та його командою, стала значним проривом, оскільки HL-60 була першою клітинною лінією мієлоїдної лейкемії, яку вдалося успішно виділити та культивувати в суспензії. Це досягнення сприяло численним дослідницьким можливостям у вивченні лейкемії та інших споріднених захворювань. З точки зору фізичних характеристик, клітини HL-60 мають лімфобластну морфологію і, як відомо, ростуть у суспензії, набуваючи круглої форми. Розмір цих клітин варіюється від 9 до 25 мкм в діаметрі, що відображає їх гетерогенність. На геномному рівні клітини лінії HL-60 є переважно псевдодиплоїдними, з модальним числом хромосом 43. Цікаво, що невеликий відсоток (6,2%) клітин демонструє 2S компонент, що додає ще один рівень складності до їх генетичного складу [1].

Розуміння цих фундаментальних аспектів клітин HL-60 не тільки розширює наші знання про лейкемію на клітинному рівні, але й підтримує постійні дослідження, спрямовані на пошук нових методів лікування. У наступних розділах ми розглянемо, як унікальні властивості клітинної лінії HL-60 сприяли значному прогресу в медичних дослідженнях.

Тканина моноцитарної лейкемії під мікроскопом.

Інформація про культуру клітин HL-60

Культивування клітин HL-60 є простим і легким. Цей розділ ознайомить вас з основними питаннями, такими як: Який час подвоєння клітинної лінії HL-60? Чи є HL-60 адгезивною або суспензійною культурою? Яка щільність посіву клітинної лінії HL-60? Яке середовище використовується для росту HL-60?

Час подвоєння:	Час подвоєння клітин HL-60 становить приблизно від 36 до 48 годин.
Прикріплені або в суспензії:	Клітини HL-60 ростуть як суспензійні культури.
Щільність посіву:	Ці клітини висівають з щільністю 1 x¹⁰⁶ клітин/мл при субкультивуванні і 2 x¹⁰⁵ клітин/мл при запуску нової культури.
Поживне середовище:	Для культивування клітин HL-60 використовують живильне середовище RPMI 1640 з додаванням 10 % FBS і 2,5 мМ L-глутаміну. Середовище слід оновлювати 2-3 рази на тиждень.
Умови культивування:	Клітини HL-60 вирощують у зволоженому інкубаторі при температурі 37 °С і 5% подачі _CO2.
Зберігання:	Клітини HL-60 зберігають при температурі нижче -150 °С або в паровій фазі рідкого азоту, щоб зберегти максимальну кількість життєздатних клітин.
Заморожування і процес:	Для заморожування клітин HL-60 використовують заморожувальні середовища CM-1 або CM-ACF. Для заморожування клітин HL-60 краще використовувати повільний метод заморожування.
Процес розморожування:	Заморожений флакон з клітинами HL-60 швидко перемішують на водяній бані при температурі 37 °C. Після цього клітини центрифугують, щоб видалити заморожувальне середовище. Додають нове живильне середовище, і клітини ресуспендують, щоб розподілити їх у колбу для росту.
Рівень біобезпеки:	Для роботи з культурами HL-60 рекомендується рівень біобезпеки 1.

Клітини суспензії HL-60 при 10-кратному та 20-кратному збільшенні.

Клітини HL-60: Переваги та недоліки

Перш ніж працювати з будь-якою клітинною лінією, ви, можливо, захочете дізнатися про її переваги та недоліки. У цьому розділі статті ми розглянемо деякі переваги та недоліки використання клітин HL-60.

Переваги

Кілька важливих переваг клітинної лінії HL-60:

Універсальність: клітини HL-60 мають здатність диференціюватися в різні типи клітин, включаючи моноцити, макрофаги і гранулоцити, за відповідних умов росту. Це робить їх корисними для вивчення клітинної диференціації та інших клітинних процесів
Легко культивувати: Клітини HL-60 легко вирощувати і підтримувати в суспензійних культурах, що робить їх зручним інструментом для вивчення багатьох клітинних процесів
Модель лейкемії in vitro: Ці клітини були отримані від пацієнта з гострою мієлоїдною лейкемією, і тому мають генетичні та молекулярні характеристики, подібні до захворювання

Недоліки

Недоліками клітинної лінії HL-60 є

Обмежений потенціал диференціювання: HL-60 може диференціюватися в деякі мієлоїдні лінії у відповідь на стимули, але їх потенціал диференціювання обмежений у порівнянні з первинними клітинами.

Застосування клітинної лінії HL-60 в дослідженнях: Від раку до імунології і не тільки

Клітинна лінія HL-60, отримана від пацієнта з гострою промієлоцитарною лейкемією, стала наріжним каменем у медичних дослідженнях завдяки своїй універсальності та простоті культивування. Ці культури, що не потребують особливого догляду, відіграють ключову роль у безлічі дослідницьких програм, і ми прагнемо дослідити деякі з найбільш значущих з них, включивши широкий спектр ключових слів для забезпечення всебічного огляду.

Дослідження раку

У сфері онкології клітинна лінія HL-60 відіграла важливу роль у розкритті тонкощів сигналізації ракових клітин, поглибленні нашого розуміння експресії онкогенів та відкритті нових терапевтичних мішеней. Ця клітинна лінія є частиною панелі клітинних ліній лейкемії, що використовується для скринінгу нових хіміотерапевтичних препаратів. Одним з яскравих прикладів є використання клітин HL-60 для з'ясування протилейкемічних властивостей сполук, видобутих з морських організмів, які виявляють як антипроліферативні, так і проапоптотичні ефекти [2]. Крім того, клітинна лінія сприяла вивченню ключових сигнальних шляхів, таких як JAK/STAT, та їх впливу на проліферацію лейкемічних клітин, а також оцінці терапевтичної перспективності біологічно активних сполук, таких як тимохінон [3].

Імунологія

Клітини HL-60 є надійною системою in vitro для дослідження різних імунних реакцій, включаючи складний процес хемотаксису та регуляцію експресії ключових імунних медіаторів. Ці клітини можуть диференціюватися в мієлоїдні клітини, подібні до макрофагів і нейтрофілів, слугуючи універсальною моделлю для дослідження запальних шляхів. Наприклад, макрофагоподібні клітини, отримані з HL-60, були використані для вивчення протизапального потенціалу фітохімічних речовин з роду капусти [4]. В іншому дослідженні диференціація клітин HL-60 у нейтрофілоподібні клітини дозволила дослідникам ідентифікувати гени, ключові для клітинної диференціації та пов'язаних з нею імунних функцій [5].

Відкриття ліків

Здатність HL-60 до мієлоїдної диференціації також була використана у розробці ліків, зокрема, у визначенні кандидатів, які потенційно можуть модулювати шлях диференціації, що має вирішальне значення у лікуванні лейкемії. Прикладом цього є дослідження, які використовували клітинну лінію HL-60 для оцінки протиракового потенціалу природних продуктів [6].

Крім того, клітинна лінія HL-60 використовується для вивчення різних аспектів біології мієлоїдних клітинних ліній, наприклад, для розуміння того, як лікування такими агентами, як ретиноєва кислота, може призвести до моноцитарної диференціації, або як ці клітини імітують первинні нейтрофіли у створенні позаклітинних пасток. Використання моделі для з'ясування молекулярних подій гематологічних злоякісних новоутворень ще більше розширюється завдяки її застосуванню в дослідженнях мутаційних клітинних панелей, зокрема, в контексті аналізу гарячих точок р53 лейкемії.

Для тих, хто вивчає клітинну механіку, час подвоєння HL-60 та їхню реакцію на електропорації в мікрофлюїдних каналах, клітинна лінія пропонує надійну платформу для досліджень.

Клітинна лінія HL-60 для ваших досліджень

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 300209

Клітини HL-60: Наукові публікації

Існує кілька наукових досліджень, присвячених клітинам HL-60. Тут ми перерахували деякі з них:

Апоптотичні та антипроліферативні ефекти стигмасту-5-ен-3-олу з Dendronephthya gigantea на клітини лейкемії людини HL-60 та раку молочної залози людини MCF-7

У цій науковій роботі запропоновано протипухлинну дію сполуки Stigmast-5-en-3-ol на клітини лейкемії HL-60 та клітини раку молочної залози MCF7.

Тимохінон пригнічує клітинну проліферацію та посилює апоптоз клітин лейкемії HL60 через реекспресію негативних регуляторів JAK/STAT

У цьому дослідженні описано роль сигналізації JAK/STAT у проліферації клітин HL-60. Крім того, дослідники вивчають терапевтичний потенціал сполуки тимохінону на цій лінії лейкемії. Сполука пригнічує проліферацію клітин та індукує їхню загибель, відновлюючи експресію негативних регуляторів каскаду JAK/STAT.

Аналіз протизапального потенціалу біологічно активних сполук капусти на моделі макрофагоподібних клітин людини, отриманих з клітин HL-60

У цьому дослідженні використовували клітини HL-60 для отримання макрофагоподібної клітинної моделі для вивчення протизапальної активності сполук рослини Brassica.

ERK бере участь у диференціації та функціонуванні нейтрофілоподібних клітин HL-60, індукованих диметилсульфоксидом, які імітують запальні нейтрофіли

У цьому дослідженні, опублікованому в журналі International Immunopharmacology, розроблено імітатор нейтрофільних клітин з клітинної лінії HL-60 за допомогою диметилсульфоксиду. Дослідження показало, що ген ERK бере участь у диференціюванні цих клітин.

Протипухлинні ефекти окремих рослинних поліфенолів, галової та елагової кислот, на чутливі та мультирезистентні клітини лейкемії HL60

У цій науковій роботі досліджено протираковий потенціал рослинних поліфенольних сполук, а саме галової та елагової кислот, на чутливі та резистентні до ліків клітини лейкемії HL-60.

Ресурси клітинної лінії HL-60: Протоколи, відео та інше

Про клітинну лінію HL-60 доступні численні освітні ресурси в Інтернеті. У цьому розділі ми розглянемо декілька ресурсів, що описують культивування та трансфекцію цієї лінії клітин.

Протоколи культивування клітин

Ресурси, що описують методи культивування клітин HL-60:

Розмноження HL-60: Цей документ містить інформацію про субкультивування клітин HL-60.
Клітинна лінія HL-60: Цей веб-сайт містить основну інформацію про клітини HL-60 та протоколи, включаючи культивування, заморожування та розморожування клітин.

Протоколи трансфекції

Ось деякі ресурси, що описують методи трансфекції, обрані для клітин HL-60.

Трансфекція клітин HL-60: За цим посиланням описана детальна процедура трансфекції клітин лейкемії HL-60.
Транзиторна трансфекція клітин HL-60: Цей документ містить корисну інформацію про клітинну лінію та детальний протокол транзиторної трансфекції клітин HL-60.

Відео про клітинну лінію HL-60

Кількість відеоматеріалів про клітини HL-60 дуже обмежена.

Пасажування клітин HL-60: Це відео пояснює протокол субкультивування клітин HL-60.

Ми сподіваємося, що ця стаття надасть вам основну інформацію про культивування та підтримання клітинної лінії HL-60. Крім того, вона може розширити ваші знання про переваги використання цих лейкозних клітин у дослідженнях. Якщо ви плануєте використовувати цю клітинну лінію, замовляйте її у нас.

Клітинна лінія HL-60: Найважливіші запитання для дослідників

Посилання

Флек Р., Ромеро-Штайнер С., Нам М. Використання клітинної лінії HL-60 для вимірювання опсонічної здатності пневмококових антитіл. Клінічна та вакцинальна імунологія, 2005. 12(1): p. 19-27.
Фернандо І.С. та ін. Апоптотичні та антипроліферативні ефекти стигмасту-5-ен-3-олу з Dendronephthya gigantea на клітини лейкемії людини HL-60 та раку молочної залози людини MCF-7. Токсикологія in vitro, 2018. 52: p. 297-305.
Алмаджалі Б. та ін., Тимохінон пригнічує клітинну проліферацію та посилює апоптоз клітин лейкемії HL60 через реекспресію негативних регуляторів JAK/STAT. Азіатсько-Тихоокеанський журнал з профілактики раку: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
Ruiz-Alcaraz, A.J. та ін., Аналіз протизапального потенціалу біологічно активних сполук Brassica в макрофагоподібній клітинній моделі людини, отриманій з клітин HL-60. Біомедицина та фармакотерапія, 2022. 149: p. 112804.
Wang, D. та ін., ERK бере участь у диференціації та функціонуванні нейтрофілоподібних клітин HL-60, індукованих диметилсульфоксидом, які імітують запальні нейтрофіли. Міжнародна імунофармакологія, 2020. 84: p. 106510.
Нуньєс-Санчес, М.Б. та ін., Протилейкемічна активність біологічно активних сполук, отриманих з капусти, в клітинах мієлоїдної лейкемії HL-60. Міжнародний журнал молекулярних наук, 2022. 23(21): p. 13400.