Клітини HK-2 - дослідження функції та патології нирок за допомогою клітин HK-2 в ренальних дослідженнях

HK-2 - це імморталізована лінія епітеліальних клітин нирок людини, яка зазвичай використовується в токсикологічних дослідженнях. Дослідники оцінюють вплив токсинів навколишнього середовища на ці клітини нирок. Крім того, вони також використовують клітини HK-2 для дослідження захворювань нирок та механізмів, що лежать в їх основі.

У цій статті ви дізнаєтесь майже всю необхідну інформацію про клітини HK-2, включаючи їхні загальні характеристики, умови культивування, застосування в дослідженнях та багато іншого. Ви дізнаєтесь наступне:

Клітини HK-2: Походження та загальні характеристики
Клітинна лінія HK-2: Інформація про культивування
Переваги та обмеження клітин лінії HK-2
Застосування клітинної лінії HK-2 в дослідженнях
Клітини HK-2: Наукові публікації
Ресурси для клітинної лінії HK-2: Протоколи, відео та інше

1.клітини лінії HK-2: Походження та загальні характеристики

Походження та загальні характеристики клітинної лінії є обов'язковими для правильного поводження з нею, її обслуговування та використання. У цьому розділі статті ми розглянемо наступне: Що таке клітини HK-2 в людській нирці 2? Яка роль HK2? Що таке клітини HK2? Яке походження клітинної лінії HK-2? Які розміри та морфологія клітин HK-2?

Клітини людської нирки 2 (HK-2) - це тип проксимальних канальцевих клітин, що походять з нормальної тканини нирок дорослої європейської людини. Клітинна лінія HK-2 була створена шляхом трансфекції клітин нирок рекомбінантним ретровірусом, що містить гени E6/E7 вірусу папіломи людини 16. Цей експеримент призвів до імморталізації та створення безперервно зростаючої лінії епітеліальних клітин нирок HK-2.
Клітини HK-2 мають епітеліальну морфологію.
Розмір клітин HK-2 коливається в межах 17,4-18,6 мкм в діаметрі. Середній діаметр становить 18,2 мкм [1].

Здорові клітини нирок людини під мікроскопом.

2.клітинна лінія HK-2: Інформація про культивування

Інформація про культивування клітинної лінії людської нирки 2 може суттєво допомогти вам перед початком роботи з нею. Обов'язкова інформація про культуру клітин HK-2 наведена в цьому розділі статті. Ви будете знати: Чи є клітини HK-2 адгезивними? Який час подвоєння клітин HK-2? Яке середовище використовується для культивування клітин HK-2?

Ключові моменти для культивування клітин HK-2

Час подвоєння популяції:	Час подвоєння клітин HK-2 становить від 47,3 год до 61,7 год.
Прикріплені або в суспензії:	Клітинна лінія епітелію нирок HK-2 є адгезивною.
Коефіцієнт субкультивування:	Клітини HK-2 субкультивують у співвідношенні від 1:2 до 1:4. Адгезовані клітини HK-2 промивають 1 х PBS та інкубують при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин після додавання розчину аккутази. До дисоційованих клітин додають культуральне середовище і центрифугують. Зібрані клітини обережно ресуспендують і переливають у нові колби для культивування.
Поживне середовище:	Ідеальним середовищем для культивування клітин лінії HK-2 є середовище для кератиноцитів, що містить 10% фетальної сироватки великої рогатої худоби, 0,05 мг/мл екстракту гіпофіза великої рогатої худоби (BPE) та 5 нг/мл епідермального фактору росту (EGF). Середовище слід замінювати кожні 2-3 дні на тиждень.
Умови вирощування:	Культури клітин нирки людини 2 зберігають у зволоженому інкубаторі з 5% подачею CO2 при температурі 37°C.
Зберігання:	Заморожені клітини зберігають у паровій фазі рідкого азоту або при температурі нижче -150 °C в наднизькотемпературному морозильнику.
Процес і середовище заморожування:	Для заморожування клітин HK-2 ідеально підходять заморожувальні середовища CM-1 або CM-ACF. Якщо коротко, то вибирається повільний метод заморожування, що дозволяє знижувати температуру лише на 1 градус Цельсія за хвилину і захищає клітини від будь-якого шоку.
Процес розморожування:	Заморожені клітини розморожують на водяній бані при температурі 37 градусів Цельсія. До них додають свіже живильне середовище і ресуспендують. Після цього клітини переносять у нову колбу з живильним середовищем. Через 24 години середовище замінюють, щоб видалити компоненти, що замерзають.
Рівень біобезпеки:	Культури клітин HK-2 підтримуються в лабораторіях з рівнем біобезпеки 1.

Клітини HK-2 ростуть острівцями при 10-кратному та 20-кратному збільшенні.

3.переваги та обмеження клітин HK-2

HK-2 - це широко використовувана клітинні лінії епітелію проксимальних канальців людини. Як і інші клітинні лінії, вона також пов'язана з певними перевагами та обмеженнями. У цьому розділі ми обговоримо деякі ключові переваги та недоліки клітинної лінії людської нирки 2.

Переваги

До основних переваг клітинної лінії HK-2 належать

Добре охарактеризована	Клітинна лінія HK-2 добре охарактеризована з точки зору морфології, розміру та геному. На цих нормальних ниркових клітинах було проведено численні дослідження.
Увічнена	HK-2 - це безперервна клітинна лінія з подовженою тривалістю життя, що дозволяє розмножувати її за допомогою декількох пасажів. Ця особливість забезпечує безперервне постачання клітин для лабораторних експериментів.
Епітеліальні характеристики проксимальних канальців	Клітини HK-2 демонструють добре диференційований фенотип, характерний для клітин проксимальних канальців, що знаходяться в нирках людини. Ця унікальна особливість робить клітини HK-2 цінною моделлю in vitro для вивчення фізіології нирок, клітинних процесів і реакцій на різні стимули.

Обмеження

Нижче наведено деякі обмеження клітинної лінії HK-2:

Модель in vitro

HK-2 слугує in vitro моделлю нормальних клітин нирок, зокрема, демонструючи характеристики епітеліальних клітин проксимальних канальців. Однак вона може не повністю відтворювати складність тканини нирки людини і мікрооточення, що зустрічається в природних умовах.

4.застосування клітинної лінії HK-2 в дослідженнях

Клітинна лінія HK-2 має численні застосування в токсикологічних дослідженнях. Тут ми обговорили деякі специфічні та важливі напрямки використання цієї лінії клітин проксимальних канальців нирок людини в дослідженнях.

Фізіологія нирок: клітини HK-2 широко використовуються для вивчення нормальної фізіології та функцій нирок. Дослідники використовують ці епітеліальні клітини проксимальних канальців для вивчення іонних каналів, транспортних процесів та інших клітинних механізмів, що регулюють гомеостаз нирок. Наприклад, дослідники вивчали роль каналів Transient Receptor Potential Channel 6 (TRPC6) в (+)-конокарпані (CNCP), неолігнані, що індукує загибель клітин в епітеліальних клітинах нирок HK-2 [2].
Захворювання нирок: Клітинна лінія людської нирки 2 використовується для дослідження різних захворювань нирок, наприклад, гострого пошкодження нирок і діабетичної нефропатії, а також клітинних і молекулярних механізмів, що лежать в їх основі. Наприклад, дослідження показали, що рівень метилювання білка клото пов'язаний з пошкодженням нирок. Зниження рівня метилування промотора гена клото може посилити його експресію і зменшити пошкодження нирок, індуковане в моделях діабетичних мишей db/db і клітинах HK-2, оброблених високим вмістом глюкози [3].
Токсикологічні дослідження: Клітини HK-2 є чудовим дослідницьким інструментом для оцінки потенційного впливу різних ліків, хімічних речовин і забруднювачів навколишнього середовища. Дослідження можуть допомогти дослідникам оцінити безпеку ліків та побічні ефекти на клітини нирок. Наприклад, у дослідженні, опублікованому в 2022 році, оцінювався потенційний вплив полісахаридів та водного екстракту природної трави Polygonatumkingianum (PK) на уран-індуковану нефротоксичність клітин HK-2. Вони виявили, що ПК чинить захисну дію і запобігає отруєнню клітин нирок ураном [4].

650,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 305021

5.клітини HK-2: Наукові публікації

Нижче наведено кілька цікавих наукових публікацій за участю епітеліальних клітин нирок HK-2.

CircHIPK3 зменшує високу токсичність глюкози для епітеліальних клітин ниркових канальців HK-2 людини через регуляцію miR-326/miR-487a-3p/SIRT1

Це дослідження в журналі Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) припустило, що циркулярна РНК HIPK3 може зменшити пригнічення проліферації клітин HK-2, спричинене високою токсичністю глюкози. Крім того, вона може пригнічувати загибель клітин, регулюючи каскад miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.

Механізм диференційованої токсичності наночастинок золота в ниркових проксимальних канальцевих клітинах HK-2 та клітинах карциноми 786-0

У цій науковій публікації в журналі Nanomedicine (2020) оцінено різні механізми токсичності наночастинок золота (AuNPs) у клітинах раку 786-0 та епітеліальних клітинах проксимальних канальців нирки HK-2.

Токсичність, спричинену високим вмістом глюкози в клітинах HK-2, можна зменшити шляхом інгібування miRNA-320c

Стаття опублікована в журналі Renal Failure (2022). Результати дослідження свідчать, що мікроРНК-320c може зменшити високу токсичність, спричинену глюкозою, в клітинах нирок (HK-2) шляхом націлювання на PTEN та інгібування сигналізації PI3K/AKT.

Екзосоми, отримані з мезенхімальних стовбурових клітин, послаблюють епітеліально-мезенхімальний перехід клітин HK-2

У цьому дослідженні в Tissue Engineering Part A (2022) припускається, що екзосоми, отримані з мезенхімальних стовбурових клітин, запобігають епітеліально-мезенхімальному переходу клітин нирок HK-2.

LncRNA TapSAKI сприяє запальному пошкодженню клітин HK-2 та сечогінному пошкодженню нирок, спричиненому сепсисом

У статті Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) зазначено, що іРНК TapSAKI посилює запальну реакцію і загибель клітин HK-2 шляхом регуляції сигнального шляху мікроРНК-22/PTEN/TLR4/NF-κB.

6.ресурси для клітинної лінії HK-2: Протоколи, відео та інше

HK-2 - відома клітинна лінія. Ось деякі ресурси, що описують протокол культури клітин HK-2.

Культура клітин HK-2: Цей веб-сайт збагачений інформацією про культуру клітин HK-2. Зокрема, на ньому можна знайти рецепт клітинного середовища HK-2, протокол пасажування, а також протокол поводження з проліферативними та кріоконсервованими культурами та їх підтримання.
Пасажування клітин: Це відео допоможе вам вивчити загальний протокол розщеплення або пасажування адгезійних клітинних ліній.

Джерела

Handl, J. та ін., Вплив повторного пасажування на чутливість проксимальних трубчастих клітин людини HK-2 до токсичних сполук. Фізіологічні дослідження, 2020. 69(4): p. 731.
Янг Г. та ін., Активація каналів TRPC6 сприяє (+)-конокарпан-індукованій апоптичній загибелі клітин в клітинах HK-2. Харчова та хімічна токсикологія, 2019. 129: p. 281-290.
Yang, X.H. та ін., EGCG послаблює пошкодження нирок шляхом зворотного гіперметилювання клото у діабетичних мишей db/db та клітин HK-2. Окислювальна медицина та клітинне довголіття, 2020. 2020.
Li, W. та ін., Захисні ефекти полісахаридів Polygonatum kingianum та водного екстракту на уран-індуковану токсичність у клітинах нирок людини (HK-2). Міжнародний журнал біологічних макромолекул, 2022. 202: p. 68-79.