Клітини DU-145 - вичерпний посібник для дослідника

DU-145 - це клітинна лінія карциноми передміхурової залози людини, яка широко застосовується в біомедичних дослідженнях. Ці клітини слугують безцінною моделлю для вивчення біології раку простати, тестування та розробки ліків. Крім того, дослідники також використовують клітини DU-145 для вивчення молекулярних механізмів, що лежать в основі розвитку, росту та прогресування раку простати.

Ця стаття дасть вам цінну інформацію про клітини раку простати DU-145. Зокрема, вона охоплює

Загальна інформація та походження клітинної лінії DU-145
Культивування клітин DU-145
Клітинна лінія DU-145: Переваги та обмеження
Дослідницькі застосування клітин DU-145
Наукові публікації за участю клітин DU-145
Ресурси для клітинної лінії DU-145: Протоколи, відео та інше

1. Загальна інформація та походження клітинної лінії DU-145

Розуміння основних характеристик та походження клітинної лінії є важливим перед початком роботи з нею. У цьому розділі ви отримаєте повне уявлення про характеристики та походження клітинної лінії DU-145. Ви дізнаєтесь Що таке ракові клітини DU145? Яка морфологія клітин DU145? У чому різниця між PC-3 та DU145?

DU-145, клітинна лінія раку передміхурової залози людини, була отримана з мозку кавказького чоловіка (69 років) з метастатичною карциномою передміхурової залози. Вперше ці клітини були депоновані К.Р. Стоуном та його колегами в 1978 році.
Як і клітини раку простати PC-3, DU-145 також експресують андрогенні рецептори. Однак, коли ці клітини піддаються обробці андрогенним лігандом, вони не виявляють жодної активності генів, що відповідають за андрогенні рецептори, і тому вважаються андроген-незалежними клітинами.
Клітини DU-145 мають епітеліальну морфологію.
Клітини DU-145 є гіпотриплоїдними і мають модальне число хромосом 64. Вони мають кілька маркерних хромосом, таких як del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) і del (9) (p11).

PC-3 проти DU145

Обидві клітинні лінії раку передміхурової залози не залежать від андрогенних рецепторів. Вони відрізняються за своїм пухлинним і метастатичним потенціалом. При введенні мишам з ослабленим імунітетом клітини лінії PC-3 утворюють високометастатичну аденокарциному IV ступеня. На противагу цьому, клітинна лінія DU-145 розвиває рак передміхурової залози з помірним метастатичним потенціалом [1].

Порушення мікрофіламентів у клітинах раку простати людини PC-3.

2. культивування клітин DU-145

Клітинна лінія DU-145 широко використовується в лабораторіях з дослідження раку простати. Вам слід вивчити наступні ключові моменти, щоб полегшити її легке та ефективне культивування. Цей розділ містить інформацію про середовище DU145, час подвоєння, умови культивування клітин та протоколи.

Ключові моменти для культивування клітин DU-145

Час подвоєння популяції:	Час подвоєння DU-145 становить від 30 до 40 годин.
Прихильник або в підвішеному стані:	DU-145 є адгезивною клітинною лінією.
Щільність посіву:	Клітини DU-145 висівають з рекомендованою щільністю 2 х¹⁰⁴^{клітин/см2}. При такій щільності клітини утворюють моношар, що зливається, майже за 4 дні. Для посіву клітини промивають 1 х фосфатним буферним розчином та інкубують з пасажним розчином Accutase. Після 8-10 хвилин інкубації при кімнатній температурі до клітин додають свіже живильне середовище і центрифугують. Зібраний осад клітин ретельно ресуспендують, а клітини переливають у нові колби для культивування.
Поживне середовище:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) з добавками, а саме: 10% фетальної сироватки великої рогатої худоби (FBS), 2 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO3 та EBSS. Поживне середовище оновлюють 2-3 рази на тиждень.
Умови вирощування:	Культуру DU-145 зберігають у зволоженому інкубаторі при 37°C з 5% джерелом CO2.
Зберігання:	Клітини DU-145 зберігають у паровій фазі рідкого азоту або при температурі нижче -150°C в електричному морозильнику, щоб зберегти життєздатність клітин на довший термін.
Процес заморожування та середовище:	Для клітин раку передміхурової залози DU-145 рекомендується використовувати заморожувальні середовища CM-1 або CM-ACF. Для заморожування клітин обрано метод повільного заморожування, який дозволяє поступово знижувати температуру на 1 °C. Це захищає клітини від будь-якого шоку і допомагає зберегти їх життєздатність.
Процес розморожування:	Заморожені флакони з клітинами DU-145 швидко розморожують на водяній бані при 37°C протягом 40-60 секунд. Після цього до клітин додають культуральне середовище і центрифугують, щоб видалити компоненти заморожуючого середовища. Зібрані клітини ресуспендують у живильному середовищі і виливають у колбу для росту. Відновлення після заморожування займає майже 24 години.
Рівень біобезпеки:	Для культивування незалежної від андрогенних рецепторів клітинної лінії DU145 необхідне дотримання рівня біобезпеки 1.

Клітини раку простати DU-145 при 10-кратному та 20-кратному збільшенні.

3. клітинна лінія DU-145: Переваги та обмеження

Як і інші клітинні лінії, клітинні лінії раку простати DU-145 мають певні переваги та недоліки. Ці характеристики можуть допомогти вам прийняти рішення про її використання у ваших дослідженнях. Основні переваги та недоліки клітин DU-145 наведені нижче.

Переваги

Перевагами клітин DU-145 є

Пухлиногенність

DU-145 - агресивна пухлинна лінія клітин раку передміхурової залози з помірним метастатичним потенціалом. Використовується для розробки моделі ксенотрансплантації DU-145 на мишах з ослабленим імунітетом для вивчення біології, розвитку та росту раку простати in vitro та in vivo.

Незалежність від андрогенних рецепторів

Клітини раку простати DU-145 не залежать від андрогенних рецепторів. Вони не залежать від андрогенів для росту і не показують жодної реакції на клітинному та молекулярному рівнях при обробці андрогенами. Ідеально підходять для дослідження гормононезалежних механізмів розвитку раку передміхурової залози.

Обмеження

Клітинна лінія DU-145 має наступні обмеження:

Модель in vitro

DU-145 є клітинною моделлю метастатичної карциноми передміхурової залози in vitro, тому вона може не повністю відображати складність первинних пухлин передміхурової залози. Крім того, вона може не відображати всі типи і підтипи раку передміхурової залози через специфічні характеристики, такі як незалежність від андрогенних рецепторів.

4. застосування клітин DU-145 в дослідженнях

Клітинна лінія раку простати DU-145 має широкий спектр дослідницьких застосувань. Кілька перспективних застосувань перераховані тут.

Біологія раку простати: DU-145 є важливою моделлю для вивчення біології раку простати. Дослідники використовують ці клітини для вивчення молекулярних механізмів розвитку, прогресування та метастазування раку. Крім того, досліджуються генетичні зміни, які зазвичай асоціюються з раком простати. Дослідження, проведене у 2021 році, вивчало клітини DU-145 з метою виявлення потенційних біомаркерів для ефективної діагностики та терапії. Дослідження запропонувало актин гамма 1 (ACTG1) як потенційний біомаркер раку простати, оскільки він сприяє проліферації ракових клітин і регулює метастазування через активацію шляху MAPK/ERK [2].
Скринінг та розробка ліків: Клітини раку простати DU-145 широко використовуються для тестування цитотоксичності та ефективності потенційних протиракових препаратів. Це допомагає дослідникам ідентифікувати нові ліки, зрозуміти резистентність до них та молекулярні механізми, що лежать в їх основі. Дослідження, проведене у 2022 році, вивчало цитотоксичну дію смолистої суміші, прополісу або бджолиного клею, на клітинні лінії раку передміхурової залози PC-3 та DU-145. Дослідження показало інгібуючий вплив цієї природної речовини на ріст обох клітинних ліній і припустило її протираковий потенціал [3]. У 2019 році було проведено ще одне дослідження, яке вивчало антипроліферативні ефекти природної сполуки бетаїну в клітинах раку передміхурової залози DU-145. Дослідження показало, що бетаїн виявляє антипроліферативну активність, підвищуючи опосередковану окислювальним стресом загибель клітин і запалення в клітинах DU-145 [4].

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 300168

5.наукові публікації за участю клітин DU-145

Нижче наведено кілька наукових публікацій, присвячених клітинам лінії DU-145.

Залежні від концентрації ефекти сульфату цинку на клітинну лінію раку простати людини DU-145: окислювальний, апоптотичний, запальний та морфологічний аналізи

У цьому дослідженні, опублікованому в журналі Biological Trace Element Research, 2020, припускається, що сульфат цинку (_ZnSo4) чинить антипроліферативну дію на клітини DU-145 шляхом індукції апоптозу, морфологічних змін, оксидативного пошкодження та запалення.

Селективна цитотоксична та антиметастатична активність у клітинах раку передміхурової залози DU-145, індукована екстрактом кори Annona muricata L. та фітохімічним препаратом аннонацином

Ця наукова стаття була опублікована в BMC Complementary Medicine and Therapies в 2020 році. У цьому дослідженні вивчався цитотоксичний та антиметастатичний потенціал рослини, екстракту кори Annona muricata L., та його біологічно активного аннонацину на клітинній лінії DU-145.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFR-пов'язаний шлях регулює резистентність клітин раку простати DU-145 до доксорубіцину

У цій публікації в IUBMB Life (2019) припускається, що взаємодія довгої некодуючої РНК LOXL1-AS1 з miR-let-7a-5p та EGFR-шляхом регулює резистентність до доксорубіцину в клітинах раку передміхурової залози DU-145.

Зниження регуляції DDR1 індукує апоптоз та інгібує ЕМТ через фосфорилювання Pyk2/MKK7 у клітинних лініях раку простати DU-145 та Lncap-FGC

У статті в журналі Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) зазначено, що зниження регуляції гена Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) спричиняє загибель клітин DU-145 та інгібує епітеліально-мезенхімальний перехід (ЕМТ) шляхом активації шляху Pyk2/MKK7.

Кастицин пригнічує міграцію та інвазію клітин раку простати людини DU-145 через сигнальні шляхи Ras/Akt/NF-κB

У дослідженні, опублікованому в Journal of Food Biochemistry (2019), припускається, що кастицин, поліметоксифлавон, інгібує міграцію та інвазію клітин DU-145 шляхом регулювання сигналізації Ras/Akt/NF-κB.

6. ресурси для клітинної лінії DU-145: Протоколи, відео та інше

Про клітинну лінію раку передміхурової залози DU-145 доступно багато ресурсів в Інтернеті. У цьому розділі ми згадаємо кілька ресурсів, що пояснюють поводження з цими клітинами, їх утримання та протокол трансфекції:

Трансфекція DU-145: Цей відеоурок є покроковим посібником для вивчення протоколу трансфекції клітин DU-145.

Протокол культивування клітин DU-145 згадується тут.

Субкультивування DU-145: Це посилання допоможе вам вивчити протокол субкультивування або субкультивування клітин DU-145.
Клітини DU-145: Цей сайт містить багато корисної інформації про клітинну лінію DU-145, включаючи середовище DU145, протокол субкультивування та поводження з проліферуючими і кріоконсервованими культурами.

Список використаних джерел

Ліма А.Р. та ін. Дискримінація екзометаболому нормальних та ракових клітин передміхурової залози людини за допомогою ГХ-МС. Наукові доповіді, 2018. 8(1): p. 5539.
Сяо Л. та ін., Пригнічення експресії ACTG1 індукує мезенхімальний перехід епітелію раку передміхурової залози через сигнальний шлях MAPK/ERK. ДНК і клітинна біологія, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Гогач, М. та ін., Протипухлинні ефекти екстрактів прополісу, отриманих методом холодного розділення, на клітинні лінії раку простати PC-3 та DU-145. Молекули, 2022. 27(23): p. 8245.
Кар Ф. та ін., Бетаїн пригнічує проліферацію клітин, збільшуючи опосередкований окислювальним стресом апоптоз і запалення в клітинній лінії раку простати людини DU-145. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.