Клітини DU-145 — вичерпний посібник для дослідників

DU-145 — це лінія клітин карциноми простати людини, яка широко застосовується в біомедичних дослідженнях. Ці клітини слугують безцінною моделлю для вивчення біології раку простати, тестування ліків та розробки нових препаратів. Крім того, дослідники також використовують клітини DU-145 для вивчення молекулярних механізмів, що лежать в основі розвитку, росту та прогресування раку простати.

📋 Клітинна лінія DU-145 — короткі факти

Середовище для культивування: EMEM (мінімальне есенціальне середовище Ігл) з добавками до середовища, а саме: 10 % ембріональної сироватки бика (FBS), 2 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO3 та EBSS. Середовище оновлюють 2–3 рази на тиждень.
Час подвоєння: Час подвоєння клітин DU-145 становить від 30 до 40 годин.
Тип росту: DU-145 — це адгезивна клітинна лінія.
Рівень біобезпеки: BSL-1
Доступно у: Cytion — Замовити DU-145

📋 Зміст

Загальна інформація та походження клітинної лінії DU-145
Культивування клітин DU-145
Клітинна лінія DU-145: переваги та обмеження
Застосування клітин DU-145 у наукових дослідженнях
5. Наукові публікації, присвячені клітинам DU-145
Ресурси для клітинної лінії DU-145: протоколи, відео та інше
Поширені запитання

Загальна інформація та походження клітинної лінії DU-145

Перед початком роботи з клітинною лінією необхідно добре розуміти її основні властивості та походження. Цей розділ надасть вичерпну інформацію про характеристики та походження клітинної лінії DU-145. Ви дізнаєтеся: Що таке ракові клітини DU145? Яка морфологія клітин DU145? У чому полягає різниця між PC-3 та DU145?

DU-145, клітинна лінія раку простати людини, була отримана з мозку чоловіка кавказької раси (69 років) з метастатичним раком простати. Ці клітини були вперше депоновані К.Р. Стоуном та колегами у 1978 році.
Як і клітини раку простати PC-3, DU-145 також експресують андрогенні рецептори. Однак, коли ці клітини піддаються обробці андрогенним лігандом, вони не виявляють жодної активності генів, що реагують на андрогенні рецептори, тому вважаються андрогеннезалежними клітинами.
Клітини DU-145 мають епітеліальну морфологію.
Клітини DU-145 є гіпотриплоїдними і мають модальне число хромосом 64. Вони мають кілька маркерних хромосом, таких як del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) та del (9) (p11).

PC-3 проти DU145

Обидві клітинні лінії раку простати є незалежними від андрогенних рецепторів. Вони відрізняються за своїм пухлиногенним та метастатичним потенціалом. При введенні імунокомпрометованій миші клітинна лінія PC-3 утворює аденокарциному IV ступеня з високим метастатичним потенціалом. На відміну від цього, клітинна лінія DU-145 викликає рак простати з помірним метастатичним потенціалом [1].

Порушення структури мікрофіламентів у клітинах раку простати людини PC-3.

Культивування клітин лінії DU-145

Клітинна лінія DU-145 широко використовується в дослідницьких лабораторіях, що займаються раком простати. Для легкого та ефективного культивування клітин слід ознайомитися з наступними ключовими моментами. Цей розділ містить інформацію про середовище для DU-145, час подвоєння, умови культивування клітин та протоколи.

Ключові моменти культивування клітин DU-145

Час подвоєння популяції:: Час подвоєння клітин DU-145 становить від 30 до 40 годин.
Адгезивні або у суспензії:: DU-145 — це адгезивна клітинна лінія.
Щільність висівання:: Клітини DU-145 висівають із рекомендованою щільністю 2 × 10^⁴клітин/см². При такій щільності клітини утворюють суцільний моношар майже за 4 дні. Для висівання клітини промивають 1 x фосфатно-буферним сольовим розчином та інкубують з розчином для пасажування Accutase. Після 8–10 хвилин інкубації при кімнатній температурі до клітин додають свіже культуральне середовище та центрифугують. Зібраний осад клітин обережно ресуспендують, а клітини переливають у нові культуральні колби для росту.
Середовище для росту:: EMEM (мінімальне есенційне середовище Ігл) з добавками до середовища, а саме: 10 % ембріональної сироватки бика (FBS), 2 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO3 та EBSS. Середовище оновлюють 2–3 рази на тиждень.
Умови вирощування:: Культури DU-145 утримують у зволоженому інкубаторі при температурі 37 °C з джерелом 5 % CO2.
Зберігання:: Клітини DU-145 зберігають у паровій фазі рідкого азоту або при температурі нижче -150 °C в електричній морозильній камері для збереження життєздатності клітин протягом тривалого часу.
Процес заморожування та середовище:: Для клітин раку простати DU-145 рекомендуються середовища для заморожування CM-1 або CM-ACF. Для заморожування клітин обирається метод повільного заморожування, який дозволяє температурі поступово знижуватися на 1 °C. Це запобігає шоку клітин і допомагає зберегти їх життєздатність.
Процес розморожування:: Заморожені флакони з клітинами DU-145 швидко розморожують у водяній бані при температурі 37 °C протягом 40–60 секунд. Після цього до клітин додають культуральне середовище та центрифугують для видалення компонентів середовища для заморожування. Зібрані клітини ресуспендують у середовищі для росту та переливають у колбу для культивування. Відновлення після заморожування займає майже 24 години.
Рівень біобезпеки:: Для культивування клітинної лінії DU145, незалежної від андрогенних рецепторів, необхідні умови рівня біобезпеки 1.

Du145 cells

Клітини раку простати DU-145 при 10-кратному та 20-кратному збільшенні.

Клітинна лінія DU-145: переваги та обмеження

Як і інші клітинні лінії, клітинна лінія раку простати DU-145 має свої плюси та мінуси. Ці характеристики можуть допомогти вам вирішити, чи використовувати її у ваших дослідженнях. Основні переваги та недоліки клітин DU-145 наведені нижче.

Переваги

Переваги клітин DU-145:

Онкогенність: DU-145 — це агресивна пухлиногенна клітинна лінія раку простати з помірним метастатичним потенціалом. Використовується для розробки моделі ксенотрансплантата DU145 в імунокомпрометованих мишах для вивчення біології, розвитку та росту раку простати in vitro та in vivo.
Незалежність від андрогенних рецепторів: Клітини раку простати DU-145 не залежать від андрогенних рецепторів. Вони не потребують андрогенів для росту та не реагують на андрогени на клітинному та молекулярному рівнях. Ідеально підходять для дослідження механізмів гормононезалежного раку простати.

Обмеження

Обмеження клітинної лінії DU-145:

Модель in vitro: DU-145 є клітинною моделлю метастатичного раку простати in vitro, тому вона може не повністю відображати складність первинних пухлин простати. Крім того, вона може не охоплювати всі типи та підтипи раку простати через специфічні характеристики, такі як незалежність від андрогенних рецепторів.

Дослідницькі застосування клітин DU-145

Клітинна лінія раку простати DU-145 має широкий спектр дослідницьких застосувань. Декілька перспективних застосувань наведено нижче.

Біологія раку простати: DU-145 є актуальною моделлю для вивчення біології раку простати. Дослідники використовують ці клітини для вивчення молекулярних механізмів, що зумовлюють розвиток, прогресування та метастазування раку. Крім того, досліджуються також генетичні зміни, які зазвичай асоціюються з раком простати. У дослідженні, проведеному в 2021 році, клітини DU-145 вивчалися з метою виявлення потенційних біомаркерів для ефективної діагностики та терапії. Дослідження показало, що актин гамма 1 (ACTG1) є потенційним біомаркером раку простати, оскільки він сприяє проліферації ракових клітин і регулює метастазування через активацію шляху MAPK/ERK [2].
Скринінг та розробка ліків: клітини раку простати DU-145 широко використовуються для тестування цитотоксичності та ефективності потенційних протиракових препаратів. Це допомагає дослідникам виявляти нові ліки, розуміти резистентність до ліків та основні молекулярні механізми. У дослідженні, проведеному в 2022 році, вивчався цитотоксичний ефект смолистої суміші, прополісу або бджолиного клею, на клітинні лінії раку простати PC-3 та DU-145. Дослідження показало інгібуючий вплив цієї природної речовини на ріст обох клітинних ліній та вказало на її протираковий потенціал [3]. У 2019 році було проведено інше дослідження, в якому вивчався антипроліферативний ефект природної сполуки, бетаїну, на клітини раку простати DU-145. Дослідження показало, що бетаїн проявляє антипроліферативну активність, посилюючи ооксидативний стрес, опосередковану клітинну смерть та запалення в клітинах DU-145 [4].

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 300168

5. Наукові публікації, присвячені клітинам DU-145

Нижче наведено деякі наукові публікації щодо клітинної лінії DU-145.

Залежні від концентрації ефекти сульфату цинку на клітинну лінію DU-145 раку простати людини: окислювальний, апоптотичний, запальний та морфологічний аналізи

У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Biological Trace Element Research» у 2020 році, висловлено припущення, що сульфат цинку (ZnSo₄) чинить антипроліферативну дію на клітини DU-145 шляхом індукування апоптозу, морфологічних змін, окислювального пошкодження та запалення.

Селективна цитотоксична та антиметастатична активність у клітинах раку простати DU-145, індукована екстрактом кори Annona muricata L. та фітохімічним речовиною анонацином

Ця наукова стаття була опублікована в журналі BMC Complementary Medicine and Therapies у 2020 році. У цьому дослідженні вивчався цитотоксичний та антиметастатичний потенціал рослини, екстракту кори Annona muricata L. та її біоактивного компонента аннонацину в клітинній лінії DU-145.

Шлях, пов'язаний з LncRNA LOXL1‐AS1/miR‐let‐7a‐5p/EGFR, регулює резистентність клітин раку простати DU‐145 до доксорубіцину

У цій публікації в журналі IUBMB Life (2019) висловлено припущення, що взаємодія довгої некодуючої РНК LOXL1-AS1 з miR-let-7a-5p та шлях EGFR регулюють резистентність до доксорубіцину в клітинах раку простати DU-145.

Зниження експресії DDR1 індукує апоптоз та інгібує ЕМТ через фосфорилювання Pyk2/MKK7 у клітинних лініях раку простати DU-145 та Lncap-FGC

У цій статті, опублікованій у журналі «Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry» (2020), зазначено, що зниження експресії гена Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) спричиняє загибель клітин DU-145 та інгібує епітеліально-мезенхімальний перехід (EMT) шляхом активації шляху Pyk2/MKK7.

Кастицин пригнічує міграцію та інвазію клітин раку простати людини DU 145 через сигнальні шляхи Ras/Akt/NF-κB

У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Journal of Food Biochemistry» (2019), було висунуто гіпотезу, що кастицин, поліметоксифлавон, пригнічує міграцію та інвазію клітин DU-145 шляхом регулювання сигнальних шляхів Ras/Akt/NF-κB.

Ресурси для клітинної лінії DU-145: протоколи, відео та інше

В Інтернеті доступно багато ресурсів щодо клітинної лінії раку простати DU-145. У цьому розділі ми згадаємо кілька ресурсів, що пояснюють поводження, утримання та протокол трансфекції цих клітин:

Трансфекція DU-145: Цей відеоурок є покроковим посібником для вивчення протоколу трансфекції клітин DU-145.

Протокол культивування клітин DU-145 наведено тут.

Субкультура DU-145: це посилання допоможе вам ознайомитися з протоколом субкультури або субкультивування клітин DU-145.
Клітини DU-145: Цей веб-сайт містить багато корисної інформації про клітинну лінію DU-145, включаючи середовище DU145, протокол субкультури та роботу з проліферативними та кріоконсервованими культурами.

Посилання

Lima, A.R., et al., Розрізнення між екзометаболомом нормальних клітин та клітин раку простати людини за допомогою GC-MS. Scientific reports, 2018. 8(1): с. 5539.
Xiao, L., et al., Пригнічення експресії ACTG1 індукує епітеліально-мезенхімальний перехід раку простати через сигнальний шлях MAPK/ERK. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): с. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Протипухлинна дія екстрактів прополісу, отриманих методом холодного розділення, на клітинні лінії раку простати PC-3 та DU-145. Molecules, 2022. 27(23): с. 8245.
Kar, F., et al., Бетаїн пригнічує проліферацію клітин шляхом посилення апоптозу та запалення, опосередкованих окислювальним стресом, у клітинній лінії раку простати людини DU-145. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: с. 871-881.