Клітини DLD-1: Застосування та розуміння клітин DLD-1 у дослідженні колоректального раку

DLD-1 - це клітинна лінія колоректальної карциноми людини, яка широко використовується в дослідженнях раку. Це цінний інструмент для дослідження різних аспектів раку товстої кишки, включаючи розвиток пухлини, її прогресування, молекулярні механізми, що лежать в її основі, та реакцію на терапевтичні агенти. Таким чином, DLD-1 відіграє важливу роль у розумінні хвороби та розробці потенційних стратегій лікування.

Ця стаття надасть важливу інформацію про клітинну лінію DLD-1, яку необхідно знати перед початком роботи з нею. Вона охоплює

Загальні характеристики та походження клітин DLD-1
Інформація про культивування клітинної лінії DLD-1
Клітинна лінія DLD-1: Переваги та обмеження
Дослідницькі застосування клітинної лінії DLD-1
Наукові публікації про клітини DLD-1
Ресурси для клітинної лінії DLD-1: Протоколи, відео та інше

1. Загальні характеристики та походження клітин DLD-1

Перед початком роботи з клітинною лінією дослідник в першу чергу повинен дізнатися про її походження та загальні характеристики. Цей розділ статті є детальним вступом до клітинної лінії DLD-1. У ньому ви знайдете відповіді на наступні поширені запитання: Що таке клітини DLD-1? Що таке ракова клітинна лінія DLD-1? Які існують мутації клітинної лінії DLD-1? Який розмір клітини DLD-1? Яка морфологія клітин DLD-1?

Клітинна лінія раку товстої кишки DLD-1 була отримана з товстої кишки 67-річного пацієнта з колоректальною аденокарциномою. Вона була виділена Д.Л. Декстером та його колегами в 1977-1979 роках. Ця клітинна лінія має спільне походження з клітинами HCT-8, HCT-15 та HRT-18.
Як і клітини колоректального раку, клітини DLD-1 мають фенотип мікросателітної нестабільності [1].
До мутацій DLD-1 належать KRAS, P53, BRAF, BRCA1 і BRCA2. Завдяки статусу DLD-1 P53, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 та DLD-1 KRAS мутації, ці клітини вважаються ідеальними для вивчення раку.
Ці клітини мають епітеліальну морфологію.
Розмір клітинної лінії DLD-1 становить приблизно 15 мкм.
Клітинна лінія колоректального раку людини DLD-1 має псевдодиплоїдний каріотип. Близько 86% клітин мають модальну хромосому з числом 46. Однак поліплоїдія може також існувати в 17,1% клітинної популяції.

3D-візуалізація КТ-колонографії або КТ-сканування товстого кишечника, що виводиться на екран для діагностики раку товстого кишечника, раку товстої кишки та колоректального раку.

2.інформація про культивування клітинної лінії DLD-1

Перш ніж культивувати будь-яку клітинну лінію, ви повинні знати основні вимоги до її культивування. У цьому розділі висвітлено важливі моменти, які необхідно вивчити перед початком роботи з клітинною лінією DLD-1. Сюди входить наступне: Що таке час подвоєння DLD-1? Що таке живильне середовище для DLD-1? Яка щільність посіву клітин DLD-1? Як культивувати клітини DLD-1?

Ключові моменти для культивування клітин DLD-1

Час подвоєння:	Час подвоєння клітин DLD-1 становить приблизно 15 годин.
Прикріплені або в суспензії:	DLD-1 - це адгезійна клітинна лінія раку товстої кишки людини. Клітини ростуть в моношари.
Щільність посіву:	Клітини DLD-1 висівають з щільністю від 1 до 2 х¹⁰⁴ ^{клітин/см2}. Прилиплі клітини промивають 1х фосфатним буферним розчином (PBS) та інкубують з пасажним розчином (Accutase) при кімнатній температурі. Після інкубації від 8 до 10 хвилин відокремлені клітини додають до культурального середовища і центрифугують. Потім клітинні гранули обережно ресуспендують, а клітини переливають у нові посудини з живильним середовищем.
Поживне середовище:	Для культивування клітин DLD-1 використовують середовище RPMI 1640 з добавками, що включають 10% фетальної сироватки великої рогатої худоби FBS, 2,1 мМ стабільного глутаміну та 2,0 г/л NaHCO3. Середовище слід замінювати 2-3 рази на тиждень.
Умови культивування:	Культури DLD-1 підтримують у зволоженому інкубаторі при 37°C з 5% подачею CO2.
Зберігання:	Клітини DLD-1 зберігають у паровій фазі рідкого азоту або в електричному наднизькотемпературному морозильнику (при температурі нижче -150°C).
Процес і середовище заморожування:	Для заморожування клітин DLD-1 можна використовувати заморожувальні середовища CM-1 або CM-ACF. Завжди рекомендується повільний процес заморожування, що дозволяє поступово знижувати температуру на 1°C, запобігаючи таким чином шоковому впливу на клітини і зберігаючи їх життєздатність.
Процес розморожування:	Заморожені клітини розморожують на водяній бані при температурі 37 °C протягом 40-60 секунд до утворення невеликої крижаної грудки. Після цього клітини додають у свіже середовище і центрифугують. Цей крок необхідний для видалення з клітин компонентів середовища, що заморожують. Зібрані клітини ресуспендують у живильному середовищі і вносять у колбу для культивування.
Рівень біобезпеки:	Клітинна лінія DLD-1 підтримується в лабораторіях з рівнем біобезпеки 1.

Клітини DLD-1 спостерігаються при 10-кратному та 20-кратному збільшенні, що дозволяє виявити їхню характерну епітеліальну морфологію.

3.клітинна лінія DLD-1: Переваги та обмеження

У цьому розділі статті ми розглянемо переваги та обмеження клітинної лінії раку товстої кишки DLD-1.

Переваги

Основними перевагами клітинної лінії DLD-1 є

Модель колоректального раку

Клітини DLD-1 мають мутації, які часто зустрічаються у пацієнтів з колоректальним раком, такі як мутація DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA і DLD-1 BRCA2. Це робить їх клінічно придатною клітинною моделлю для вивчення цього захворювання.

Пухлинна клітинна лінія

Клітини DLD-1 є пухлиноутворюючими. Вони можуть викликати пухлини при введенні голим мишам. Тому дослідники використовують ці клітини для розробки ксенотрансплантаційних моделей пухлин, які допомагають досліджувати утворення, розвиток і прогресування пухлин in vivo.

Обмеження

Обмеження, пов'язані з клітинами DLD-1, полягають у наступному:

Гетерогенність

Популяції клітин раку товстої кишки DLD-1 демонструють генетичну та фенотипічну гетерогенність. Це може вплинути на можливість узагальнення результатів дослідження.

4.дослідницькі застосування клітинної лінії DLD-1

Клітинна лінія DLD-1 має широкий спектр застосувань у дослідженнях раку. Деякі з них обговорюються в цьому розділі.

Вивчення раку: Клітини DLD-1 слугують цінною моделлю in vitro для розуміння молекулярних механізмів, що лежать в основі росту, розвитку та прогресування колоректального раку. Крім того, вони використовуються для вивчення експресії генів, сигнальних шляхів і впливу специфічних генетичних мутацій на поведінку ракових клітин. Дослідження, проведене у 2022 році, показало, що сигнальний каскад PI3K/Akt/YAP регулює міграцію та інвазію клітинної лінії колоректального раку DLD-1 [2].
Розробка ліків: Дослідники використовують клітинну лінію DLD-1 для перевірки ефективності протиракових препаратів та оцінки їх потенціалу для лікування раку товстої кишки. Це допомагає у розробці ліків та ефективній боротьбі з хворобою. У дослідженні, проведеному в 2022 році, використовували лінію ракових клітин DLD-1 і досліджували протиракову активність фталоціанінів кремнію, хімічно синтезованих сполук. Результати дослідження показали, що ці сполуки є потужними протираковими агентами [3]. Цікаво, що в іншому дослідженні було виявлено протираковий потенціал білка P8, отриманого з пробіотиків, з використанням клітин DLD-1 [4].

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 300220

5.наукові публікації про клітини DLD-1

У цьому розділі буде представлено кілька цікавих і часто цитованих публікацій за участю клітинної лінії карциноми товстої кишки DLD-1.

Флавоноїдний глікозид діосмін індукує апоптоз та зупинку клітинного циклу в клітинній лінії раку товстої кишки людини DLD-1

Ця публікація в журналі Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). Дослідження показало, що діосмін, флавоноїд, індукує загибель клітин у клітинах DLD-1, а також викликає зупинку клітинного циклу; таким чином, він може бути потенційним протираковим агентом.

Бромелайн ефективно пригнічує Kras-мутантний колоректальний рак, стимулюючи фероптоз

Дослідження в журналі Animal Cells and Systems (2018) показало, що бромелайн, фермент, пригнічує мутацію DLD-1 KRAS і чинить потужний цитотоксичний вплив на рак товстої кишки.

Бергаптен індукує зупинку G1 та проапоптичний каскад у клітинах колоректального раку, асоційованих з віссю p53/p21/PTEN

Ця наукова стаття була опублікована в 2019 році в журналі "Environmental Toxicology". У дослідженні вивчали протипухлинні ефекти природної сполуки бергаптену з використанням лінії клітин товстої кишки DLD-1.

Екологічно чисте виробництво композиту нанокуркумін/нано оксид заліза: Посилення протиракової активності in vitro проти клітинних ліній DLD-1

Дослідження, опубліковане в Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023), показало, що нанокомпозити куркумін/оксид заліза високоефективні проти клітин колоректального раку DLD-1.

Епібрасинолід активує AKT для запуску аутофагії з метаболізмом поліамінів у клітинних лініях раку товстої кишки SW480 та DLD-1

Ця наукова стаття була опублікована в 2020 році в Турецькому журналі біології. У дослідженні припускається, що природний продукт, епібрасинолід-опосередкована активація AKT у клітинах DLD-1, стимулює автофагію, пов'язану з поліамінами.

6.ресурси для клітинної лінії DLD-1: Протоколи, відео та інше

Нижче наведено кілька ресурсів про клітини DLD-1:

Трансфекція DLD-1: Цей відеоурок є вичерпним посібником з протоколу трансфекції DLD-1 in vitro.
Клітини DLD-1: Ця наукова стаття коротко описує вимоги до культури клітин DLD-1, включаючи середовища та умови культивування. Крім того, вона може допомогти вам вивчити протокол трансфекції, що використовується для клітин DLD-1.

Наступні посилання містять протокол культивування DLD-1, клітин раку товстої кишки, отриманих від людини.

Клітинна лінія DLD-1: На цьому веб-сайті ви знайдете основну інформацію про клітинну лінію DLD-1. Він допоможе вам ознайомитися з різними протоколами культивування клітин DLD-1, включаючи субкультивування та поводження з кріоконсервованими і проліферуючими культурами.

Список використаної літератури

Гаврилас Л.І. та ін., Проапоптотичні гени як нові мішені для одиночного та комбінованого лікування ресвератролом та куркуміном при колоректальному раку. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
Takeda, T. та ін., Сигналізація PI3K/Akt/YAP сприяє міграції та інвазіїклітин колоректального раку DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
Фараджзаде, Н. та ін. Протиракова активність нових фталоціанінів кремнію проти клітинної лінії колоректальної аденокарциноми (DLD-1). Новий хімічний журнал, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
An, B.C. та ін., Протиракова роль пробіотичного білка P8 у клітинній лінії колоректального раку DLD-1. Міжнародний журнал молекулярних наук, 2023. 24(12): p. 9857.