Перейти на головну сторінку

Клітини DLD-1: застосування та результати досліджень клітин DLD-1 у вивченні колоректального раку

DLD-1 — це лінія клітин колоректального раку людини, яка часто використовується в дослідженнях раку. Вона є цінним інструментом для вивчення різних аспектів раку товстої кишки, включаючи розвиток пухлини, прогресування, основні молекулярні механізми та реакцію на терапевтичні засоби. Таким чином, DLD-1 відіграє видатну роль у розумінні захворювання та розробці потенційних стратегій лікування.

📋 Клітинна лінія DLD-1 — короткі факти
Середовище для культивування
Для культивування клітин DLD-1 використовується RPMI 1640 з добавками до середовища, включаючи 10% ембріональну сироватку бика (FBS), 2,1 мМ стабільного глутаміну та 2,0 г/л NaHCO3. Середовище слід замінювати 2–3 рази на тиждень.
Час подвоєння
Час подвоєння DLD-1 становить приблизно 15 годин.
Тип росту
DLD-1 — це адгезивна лінія клітин раку товстої кишки людини. Клітини ростуть у моношари.
Рівень біобезпеки
BSL-1
Доступно у
Cytion — Замовити DLD-1

Загальні характеристики та походження клітин DLD-1

Перед початком роботи з клітинною лінією перше, на що звертає увагу дослідник, — це її походження та загальні характеристики. Цей розділ статті є детальним вступом до клітинної лінії DLD-1. У ньому розглядаються такі поширені запитання: Що таке клітини DLD-1? Що таке ракова клітинна лінія DLD-1? Які мутації має клітинна лінія DLD-1? Який розмір клітини DLD-1? Яка морфологія клітин DLD-1?

  • DLD-1, клітинна лінія раку товстої кишки, походить з товстої кишки 67-річного пацієнта з колоректальною аденокарциномою. Вона була виділена Д.Л. Декстером та його колегами у 1977–1979 роках. Ця клітинна лінія має те саме походження, що й клітинні лінії HCT-8, HCT-15 та HRT-18.
  • Як і колоректальні раки, клітини DLD-1 мають фенотип нестабільності мікросателітів [1].
  • Мутації DLD-1 включають KRAS, P53, BRAF, BRCA1 та BRCA2. Завдяки статусу P53 у DLD-1, мутаціям DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 та DLD-1 KRAS ці клітини вважаються ідеальними для досліджень раку.
  • Ці клітини мають епітеліоподібну морфологію.
  • Розмір клітин лінії DLD-1 становить приблизно 15 мкм.
  • Лінія клітин колоректального раку людини DLD-1 має псевдодиплоїдний каріотип. Близько 86% клітин мають модальне число хромосом 46. Однак поліплоїдія може також існувати у 17,1% клітинної популяції.

3D-візуалізація результатів КТ-колонографії або КТ-сканування товстої кишки, що відображається на екрані для діагностики раку товстої кишки, раку ободової кишки та колоректального раку.

Інформація щодо культивування клітинної лінії DLD-1

Перед культивуванням будь-якої клітинної лінії необхідно знати основні вимоги до культивування клітин. У цьому розділі висвітлено важливі моменти, які необхідно знати перед початком роботи з клітинною лінією DLD-1. Сюди входять: Який час подвоєння DLD-1? Що таке культуральне середовище для DLD-1? Яка щільність висівання клітин DLD-1? Як культивувати клітини DLD-1?

Ключові моменти культивування клітин DLD-1

Час подвоєння:

Час подвоєння DLD-1 становить приблизно 15 годин.

Адгезивні або в суспензії:

DLD-1 — це адгезивна лінія клітин раку товстої кишки людини. Клітини ростуть у моношари.

Щільність висівання:

Клітини DLD-1 висівають із щільністю від 1 до 2 × 10 клітин/см². Адгезивні клітини промивають 1× фосфатно-буферним сольовим розчином (PBS) та інкубують із розчином для пасажування (Accutase) при кімнатній температурі. Після інкубації протягом 8–10 хвилин відокремлені клітини додають до культурального середовища та центрифугують. Потім осад клітин обережно ресуспендують, а клітини переливають у нові культуральні посудини, що містять середовище для росту.

Середовище для росту:

Для культивування клітин DLD-1 використовується RPMI 1640 з добавками до середовища, включаючи 10% ембріональну сироватку бика (FBS), 2,1 мМ стабільного глутаміну та 2,0 г/л NaHCO3. Середовище слід замінювати 2–3 рази на тиждень. 

Умови вирощування:

Культури DLD-1 утримують у зволоженому інкубаторі при температурі 37 °C з подачею 5% CO2.

Зберігання: 

Клітини DLD-1 зберігають у паровій фазі рідкого азоту або в електричному морозильнику з наднизькою температурою (при температурі нижче -150 °C).

Процес заморожування та середовище:

Для заморожування клітин DLD-1 можна використовувати середовища CM-1 або CM-ACF. Завжди рекомендується повільний процес заморожування, що дозволяє поступово знижувати температуру на 1 °C, тим самим запобігаючи шоку клітин та захищаючи їх життєздатність.

Процес розморожування:

Заморожені клітини розморожують у водяній бані, попередньо нагрітій до температури 37 °C, протягом 40–60 секунд, доки не залишиться невеликий шматок льоду. Після цього клітини додають до свіжого середовища та центрифугують. Цей крок необхідний для видалення компонентів середовища для заморожування з клітин. Зібрані клітини ресуспендують у середовищі для росту та розливають у колбу для росту.

Рівень біобезпеки:

Клітинна лінія DLD-1 утримується в лабораторіях рівня біобезпеки 1.

DLD 1 cells

Клітини DLD-1, спостережувані при 10-кратному та 20-кратному збільшенні, що демонструє їхню характерну епітеліальну морфологію.

Клітинна лінія DLD-1: переваги та обмеження

У цьому розділі статті ми розглянемо переваги та обмеження клітинної лінії DLD-1 раку товстої кишки.

Переваги

Основними перевагами клітинної лінії DLD-1 є:

Модель колоректального раку

Клітини DLD-1 мають мутації, які часто зустрічаються у пацієнтів з колоректальним раком, такі як мутація DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA та DLD-1 BRCA2. Ця релевантність робить їх клінічно придатною клітинною моделлю для вивчення цього захворювання.

Туморогенна клітинна лінія

Клітини DLD-1 є пухлиногенними. Вони можуть викликати пухлини при введенні в організм голих мишей. Тому дослідники використовують ці клітини для створення моделей ксенотрансплантатів, які допомагають досліджувати утворення, розвиток та прогресування пухлин in vivo.

 

Обмеження

Обмеження, пов'язані з клітинами DLD-1, такі:

Гетерогенність

Популяції клітин раку товстої кишки DLD-1 виявляють генетичну та фенотипну гетерогенність. Це може вплинути на можливість узагальнення результатів досліджень.

 

Дослідницькі застосування клітинної лінії DLD-1

Клітинна лінія DLD-1 має широкий спектр застосування в дослідженнях раку. У цьому розділі розглядаються деякі найважливіші сфери застосування.

  • Дослідження раку: клітини DLD-1 слугують цінною моделлю in vitro для розуміння молекулярних механізмів, що лежать в основі росту, розвитку та прогресування колоректального раку. Крім того, їх використовують для вивчення експресії генів, сигнальних шляхів та впливу конкретних генетичних мутацій на поведінку ракових клітин. Дослідження, проведене у 2022 році, показало, що сигнальний каскад PI3K/Akt/YAP регулює міграцію та інвазію клітинної лінії колоректального раку DLD-1 [2].
  • Розробка ліків: Дослідники використовують клітинну лінію DLD-1 для тестування ефективності протиракових препаратів та оцінки їхнього потенціалу для лікування раку товстої кишки. Це сприяє розробці ліків та ефективній боротьбі з хворобою. У дослідженні, проведеному в 2022 році, використовували лінію ракових клітин DLD-1 та досліджували протиракову активність силіконових фталоціанінів — хімічно синтезованих сполук. Результати дослідження вказують на те, що ці сполуки є потужними протираковими агентами [3]. Цікаво, що в іншому дослідженні за допомогою клітин DLD-1 було виявлено протираковий потенціал білка P8, отриманого з пробіотиків [4].

5. Наукові публікації про клітини DLD-1

У цьому розділі буде висвітлено кілька цікавих і часто цитованих публікацій, присвячених клітинній лінії колоректального раку DLD-1.

Флавоноїдний глікозид діосмін індукує апоптоз та зупинку клітинного циклу в клітинній лінії DLD-1 раку товстої кишки людини

Ця публікація розміщена в журналі «Journal of Biologically Active Products from Nature» (2022). Дослідження показало, що флавоноїд діосмін індукував загибель клітин DLD-1, а також спричиняв зупинку клітинного циклу; отже, він може бути потенційним протираковим засобом.

Бромелайн ефективно пригнічує колоректальний рак із мутацією Kras шляхом стимуляції фероптозу

У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Animal Cells and Systems» (2018), було висунуто гіпотезу, що фермент бромелайн пригнічує мутацію DLD-1 KRAS та чинить потужний цитотоксичний ефект.

Бергаптен індукує зупинку фази G1 та проапоптотичний каскад у клітинах колоректального раку, пов'язаних з віссю p53/p21/PTEN

Ця наукова стаття була опублікована в 2019 році в журналі «Environmental Toxicology». У дослідженні вивчалися протипухлинні ефекти природної сполуки, бергаптену, з використанням колоректальної клітинної лінії DLD-1.

Екологічне виготовлення композиту нанокуркуміну/нанооксиду заліза: посилена протиракова активність in vitro проти клітинних ліній DLD-1

Це дослідження, опубліковане в журналі «Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials» (2023), виявило, що нанокомпозити куркуміну та оксиду заліза є високоефективними проти клітин колоректального раку DLD-1.

Епібрасинолід активує AKT, щоб запустити аутофагію з метаболізмом поліамінів у клітинних лініях раку товстої кишки SW480 та DLD-1

Ця наукова стаття була опублікована у 2020 році в журналі «Turkish Journal of Biology». У дослідженні висловлено припущення, що природний продукт, епібрасинолід, опосередковує активацію AKT у клітинах DLD-1, стимулюючи аутофагію, пов’язану з поліамінами.

Ресурси щодо клітинної лінії DLD-1: протоколи, відео та інше

Нижче наведено кілька ресурсів щодо клітин DLD-1:

  • Трансфекція DLD-1: Цей відеоурок є вичерпним посібником щодо протоколу трансфекції DLD-1 in vitro.
  • Клітини DLD-1: Ця наукова стаття коротко описує вимоги до культивування клітин DLD-1, включаючи середовища та умови культивування. Крім того, вона може допомогти вам ознайомитися з протоколом трансфекції, що використовується для клітин DLD-1.

Наступні посилання містять протокол культивування DLD-1, клітин раку товстої кишки людського походження.

  • Клітинна лінія DLD-1: Цей веб-сайт надасть базову інформацію про клітинну лінію DLD-1. Він допоможе вам ознайомитися з різними протоколами культивування клітин DLD-1, включаючи субкультурування та роботу з кріоконсервованими та проліферуючими культурами.

Посилання

  1. Gavrilas, L.I., et al., Проапоптотичні гени як нові мішені для моно- та комбінованого лікування ресвератролом та куркуміном при колоректальному раку. Food & function, 2019. 10(6): с. 3717-3726.
  2. Takeda, T., et al., PI3K/Akt/YAP-сигналізація сприяє міграції та інвазії клітин колоректального раку DLD‑1. Oncology Letters, 2022. 23(4): с. 1-9.
  3. Farajzadeh, N., et al., Протипухлинна активність нових кремнієвих фталоціанінів проти клітинної лінії колоректальної аденокарциноми (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): с. 19863-19873.
  4. An, B.C., et al., Протипухлинна роль білка P8, отриманого з пробіотиків, у клітинній лінії колоректального раку DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): с. 9857.

 

Ми виявили, що ви перебуваєте в іншій країні або використовуєте іншу мову браузера, ніж обрана в даний момент. Бажаєте прийняти запропоновані налаштування?

Закрити