Клітини B16 - Фундаментальний посібник з використання клітин меланоми B16 в онкологічних дослідженнях

B16 - це клітинна лінія раку шкіри (меланоми) мишачого походження. Ця клітинна лінія є ефективною моделлю in vitro для вивчення раку шкіри людини. Її часто використовують для дослідження утворення солідних пухлин і метастазування ракових клітин.

Ця стаття допоможе вам зрозуміти основи клітинної лінії меланоми B16. Зокрема, в ній буде розглянуто наступне:

1.загальна характеристика та походження клітинної лінії В16

У цьому розділі статті ми розглянемо характерні особливості клітинної лінії меланоми В16. Ви дізнаєтесь відповіді на наступні поширені запитання. Наприклад, що таке ракова клітинна лінія В16? Звідки отримують клітини В16? Який розмір клітин B16?

Клітинна лінія В16 була створена в 1954 році. Ці клітини були отримані від мишей C57BL/6J, у яких спонтанно з'явилася пухлина в шкірі в лабораторії Джексона в штаті Мен.
Це епітеліальні клітини, що виробляють меланін і мають здатність метастазувати в селезінку, печінку та легені.
Клітини меланоми В16 ростуть моношаром і мають епітеліоподібну та веретеноподібну морфологію.
Розмір клітинної лінії В16 становить приблизно 15,4 мкм.
Існують окремі субклони клітин B16, включаючи B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 і B16F10. Ці сублінії відрізняються від батьківських клітин В16 і зберігають деякі специфічні особливості. Наприклад, вони мають відмінності в морфології, розмірі клітин та інших властивостях. B16F10 має високу метастатичну здатність у легенях, а B164A5 є найбільш агресивною лінією раку шкіри порівняно з B16F10, B16-GMCSF і B16FLT3 [1].

3D-анімація крупним планом раку шкіри, що росте, наприклад, злоякісної меланоми, яка запалює навколишні тканини.

2.інформація про культивування клітинної лінії B16

Перед утриманням або культивуванням клітинної лінії вам може знадобитися ключова інформація про час подвоєння, тип клітин, живильне середовище, умови культивування тощо. Цей розділ містить всю необхідну інформацію для культивування клітин B16.

Ключові моменти для культивування клітин B16

Час подвоєння популяції:	Середній час подвоєння популяції клітин B16 становить 24 години.
Адгезія або суспензія:	Клітини B16 є адгезійними і ростуть моношаром.
Щільність посіву:	Клітини B16 рекомендується висівати при щільності від 1 до 2 х¹⁰⁴ ^{клітин/см2}. Прикріплені клітини B16 промивають 1 х PBS і відокремлюють від поверхні за допомогою розчину аккутази. Клітини центрифугують, і гранули клітин ресуспендують у живильному середовищі. Пізніше ці клітини переносять у нову колбу для росту.
Поживне середовище:	Клітини B16 культивують у середовищі EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium), що містить 10% фетальної сироватки великої рогатої худоби (FBS). Поживне середовище слід оновлювати 2-3 рази на тиждень.
Умови вирощування:	Для вирощування клітинної лінії B16 використовують зволожений інкубатор з 5% подачею _CO2 і температурою 37 °C.
Зберігання:	Ці клітини зберігають при температурі нижче -150 °C або в паровій фазі рідкого азоту для захисту життєздатності клітин.
Процес заморожування і середовище:	Для заморожування клітин B16 використовується середовище CM-1 або CM-ACF з використанням повільного процесу заморожування.
Процес розморожування:	Заморожені клітини B16 розморожують при 37 °C на водяній бані з антимікробним агентом. Розморожені клітини можна безпосередньо культивувати, розподіляючи їх у колби з живильним середовищем. Крім того, ці клітини можна центрифугувати, щоб видалити компоненти заморожувального середовища, а потім культивувати в новому середовищі.
Рівень біобезпеки:	Клітинну лінію B16 слід обробляти або утримувати в лабораторії з першим рівнем біобезпеки.

Напівзлитий шар клітин меланоми B16 при 10-кратному та 20-кратному збільшенні.

3. клітинна лінія В16: Переваги та недоліки

Як і інші клітинні лінії, В16 має унікальне поєднання переваг і недоліків. У цьому розділі наведені деякі суттєві переваги та недоліки цієї лінії клітин меланоми.

Переваги

B16 є першим ефективним мишачим інструментом, який широко використовується в дослідженнях метастазів завдяки перевагам, які він пропонує. Ось деякі переваги цієї лінії клітин раку шкіри:

Легкість у вирощуванні	Клітинну лінію B16 легко культивувати в дослідницьких лабораторіях. Вона широко використовується для вивчення біології ракових клітин, сигнальних шляхів тощо.
Швидко росте	Клітинна лінія меланоми B16 демонструє високу швидкість проліферації, що робить її придатною для вивчення процесів поділу та росту клітин.
Пухлиногенність	B16 - це пухлиногенна клітинна лінія з пухлиноподібними властивостями, такими як інвазія, міграція та проліферація. Вона є цінною для вивчення утворення, прогресування та метастазування пухлин.

Недоліки

Недоліки, пов'язані з клітинною лінією B16, полягають у наступному:

Відсутність релевантності для людини	Через те, що B16 є клітинною лінією мишачої меланоми, вона може неточно відображати біологію раку шкіри людини, що обмежує можливість трансляції результатів досліджень.
Гетерогенність	Клітини B16 є гетерогенними, демонструючи різноманітні генетичні та фенотипічні властивості в межах однієї культури. Це може вплинути на надійність і відтворюваність результатів.

4. застосування клітин B16

Клітинна лінія B16 широко використовується в наукових дослідженнях. Кілька перспективних застосувань цієї клітинної лінії

Біологія пухлин: Ця лінія клітин раку шкіри мишей є пухлиногенною і широко використовується для вивчення біології пухлин. Було проведено кілька досліджень для вивчення клітинних механізмів росту, проліферації та метастазування пухлинних клітин з використанням клітин B16. У дослідженні, проведеному в 2020 році, клітини B16 використовували для вивчення ролі довгої некодуючої РНК, LncRNA MEG3, у формуванні, рості та метастазуванні меланоми. Це дослідження показало, що некодуюча РНК модулює вісь miRNA-21/E-кадгерин, стимулюючи ці клітинні події [2]. Подібним чином було проведено дослідження з вивчення потенційної ролі сигналізації Notch1 в імуносупресії, індукованій пухлиною, на клітинах B16 [3].
Відкриття ліків: Клітини B16 використовуються для перевірки та тестування потенційних терапевтичних ефектів кандидатів на лікарські засоби. В одному з досліджень оцінювали протипухлинну дію неогамбогової кислоти, природної сполуки, з використанням клітинної лінії В16. Результати дослідження показали, що ця сполука модулює сигнальний шлях PI3K/Akt/mTOR, викликаючи загибель ракових клітин [4]. В іншому дослідженні вивчали протимеланомну дію сапоніну гінсенозиду Rg3 на клітинній лінії B16. Дослідження показало, що ця природна сполука спричиняє протипухлинну активність шляхом пригнічення ERK та Akt шляхів [5].

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 305154

5.наукові публікації за участю клітин B16

Нижче наведено кілька важливих наукових публікацій за участю клітинної лінії меланоми B16.

LncRNA MEG3 сприяє росту, метастазуванню та утворенню меланоми через модуляцію осі miR-21/E-кадгерину

У цій публікації в журналі Cancer Cell International (2020) припускається, що довга некодуюча РНК MEG3 посилює утворення, ріст і метастазування клітин меланоми B16 шляхом модуляції осі miRNA-21/E-кадгерину.

Нове похідне псоралену - MPFC посилює меланогенез через активацію p38 MAPK та PKA сигнальних шляхів у клітинах B16

Ця стаття була опублікована в Міжнародному журналі молекулярної медицини в 2018 році. В роботі досліджено меланогенний ефект та механізми дії похідного псоралену - 4-метил-6-феніл-2Н-фуро[3,2-g] хромен-2-ону (MPFC) в клітинах B16. Дослідження показало, що це похідне сприяє меланогенезу шляхом стимуляції клітинної сигналізації PKA та p38 MAPK.

Сигналізація Notch1 в клітинах меланоми сприяє імуносупресії, спричиненій пухлиною, через посилення регуляції TGF-β1

Це дослідження було опубліковане в 2018 році в Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Результати дослідження свідчать про те, що активація сигналізації Notch1 в клітинах B16 може перешкоджати протипухлинному імунітету шляхом підвищення експресії гена TGF-β1.

Неогамбогова кислота індукує апоптоз клітин меланоми B16 через сигнальний шлях PI3K/Akt/mTOR

Це дослідження було проведено Чунланом Ву (Chunlan Wu) та його колегами у 2020 році та опубліковане в журналі Acta Biochimica Polonica. У дослідженні стверджується, що неогамбогова кислота, природна сполука, може викликати загибель клітин меланоми B16, модулюючи сигнальний каскад PI3K/Akt/mTOR.

Комплекс іридію (ІІІ) як потужний протираковий агент індукує апоптоз та автофагію в клітинах B16 через інгібування шляху AKT/mTOR

Ця наукова робота була опублікована в Європейському журналі медичної хімії в 2018 році. У цьому дослідженні вчені вивчали протиракову активність сполуки, комплексу іридію (ІІІ), на клітинах меланоми B16.

Айлантон індукує зупинку клітинного циклу та апоптоз у клітинах меланоми B16 та A375

У цьому дослідженні припускається, що рослинна біологічно активна речовина айлантон має протираковий потенціал, оскільки може індукувати апоптоз і зупинку клітинного циклу в клітинах меланоми B16 і A375. Ця стаття була опублікована в журналі Biomolecules у 2019 році.

6. ресурси для клітинної лінії B16: Протоколи, відео та інше

Існує обмежена кількість ресурсів про клітинну лінію B16, що пояснюють протоколи її культивування та трансфекції.

Культивування клітин меланоми: Це відео містить цінні поради щодо культивування клітинних ліній меланоми.
Субкультивування клітинної лінії: Це відео пояснює загальний протокол субкультивування клітинної лінії.
Трансфекція клітинної лінії B16F10: Це відео пояснює протокол трансфекції сублінії клітин меланоми B16. Це може допомогти вам оптимізувати протокол трансфекції для клітин B16.

Нижче наведені деякі протоколи культивування клітин B16.

Культивування клітин B16: Цей веб-сайт містить всю необхідну інформацію для культивування клітин B16, включаючи поживні середовища, субкультивування, розморожування та заморожування клітин.

Посилання

Danciu, C. та ін., Поведінка чотирьох різних субліній клітин мишачої меланоми B 16: C57 BL/6J шкіра. Міжнародний журнал експериментальної патології, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L. та ін., LncRNA MEG3 сприяє росту, метастазуванню та утворенню меланоми через модуляцію осі miR-21/E-кадгерину. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z. та ін., Сигналізація Notch1 в клітинах меланоми сприяє пухлинно-індукованій імуносупресії через підвищення регуляції TGF-β1. Журнал експериментальних і клінічних досліджень раку, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C. та ін., Неогамбогова кислота індукує апоптоз клітин меланоми B16 через сигнальний шлях PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Менг Л. та ін. Протипухлинна активність гінсенозиду Rg3 при меланомі через зниження регуляції шляхів ERK та Akt. Міжнародний онкологічний журнал, 2019. 54(6): p. 2069-2079.