Клітини B16-F10 - вивчення клітинної лінії меланоми B16-F10 у дослідженні метастазів

КлітиниB16-F10 - це клітинні лінії меланоми, отримані від мишей лінії C57BL/6J. Вони широко використовуються в дослідженнях раку шкіри. Дослідники використовують ці клітини для вивчення розвитку та прогресування пухлини, а також терапевтичних втручань. У цій статті будуть розглянуті фундаментальні аспекти клітин меланоми B16-F10. Зокрема, вона буде включати в себе

Походження та загальні характеристики клітинної лінії B16-F10
Інформація про культивування клітин B16-F10
Клітини B16-F10: Переваги та недоліки
Застосування клітин B16-F10 в наукових дослідженнях
Публікації за участю клітинної лінії B16-F10
Ресурси для клітинної лінії B16-F10: Протоколи, відео та інше

1. Походження та загальні характеристики клітинної лінії B16-F10

Цей розділ дасть вам уявлення про походження та характерні ознаки пухлинних клітин меланоми B16F10. Це допоможе вам ефективно використовувати клітинну лінію у вашій дослідницькій роботі. Головним чином, ви дізнаєтесь: Що таке клітини B16-F10? Звідки походять клітини B16F10? Яка морфологія клітинної лінії B16F12? Який розмір клітини B16F10?

B16-F10 - це субклон пухлинної клітинної лінії B16, отриманої з тканини шкіри мишей лінії C57BL/6J. Клітини меланоми B16F10 були отримані після внутрішньовенного введення лінії B16 мишам з ослабленим імунітетом або сингенетичним мишам. Ці клітини були відібрані за їх потенціалом утворювати метастази в легенях in vivo, а потім встановлені після десяти циклів формування легеневих колоній in vitro [1]. Він був розроблений Фідлером та його колегами в 1976 році.
Клітинні лінії B16-F10 мають епітеліоподібну та веретеноподібну форму.
Приблизний розмір клітин B16-F10 становить 15,4 ± 1,4 мкм [2].

Клітини B16-F1 та B16-F10

Клітини B16-F1 і B16-F10 були отримані з батьківської лінії B16. Обидві походять з одного джерела і мають майже однакові характеристики. Однак головна відмінність полягає в їх метастатичній здатності. Клітини B16-F10 мають високий, тоді як B16-F1 - низький метастатичний потенціал [3].

Збільшений зріз злоякісної пухлини меланоми під мікроскопом.

2.інформація про культивування клітин B16-F10

Перед обробкою та культивуванням клітинної лінії необхідно дізнатися про час її подвоєння, живильні середовища, умови та протоколи культивування клітин. У цьому розділі буде обговорено: Який час подвоєння клітин B16-F10? Як культивувати клітини B16F10? Що таке середовище для культивування клітин B16-F10? Які умови культивування рекомендовані для клітин B16-F10?

Ключові моменти для культивування клітин B16-F10

Час подвоєння:	Час подвоєння клітин B16-F10 становить приблизно 20,1 години. Він може коливатися від 17 до 21 години, залежно від умов культивування.
Адгезія або суспензія:	B16-F10 є адгезивною клітинною лінією. Клітини швидко ростуть і утворюють моношари.
Співвідношення поділу:	Клітини B16-F10 субкультивують у співвідношенні від 1:2 до 1:4. Клітини промивають фосфатним буферним розчином (1х), а потім інкубують з пасажним розчином Accutase протягом 8-10 хвилин при кімнатній температурі. До клітин додають свіже середовище і центрифугують. Зібрану клітинну гранулу знову ресуспендують, і клітини переносять у нову колбу зі свіжим живильним середовищем відповідно до співвідношення поділу.
Поживне середовище:	Клітини B16-F10 культивують у середовищі DMEM. До середовища додають 10% FBS, 4 мМ L-глутаміну, 1,5 г/л NaHCO3, 4,5 г/л глюкози та 1,0 мМ пірувату натрію для ідеального росту клітин. Поживне середовище слід замінювати 2-3 рази на тиждень.
Умови вирощування:	Клітини B16-F10 вирощують у зволоженому інкубаторі при 37 °C з 5% подачею CO2.
Зберігання:	Заморожені клітини зберігають при температурі нижче -150 °C в електричному наднизькотемпературному морозильнику або в паровій фазі рідкого азоту для підтримки життєздатності клітин.
Процес заморожування і середовище:	Клітини B16-F10 заморожують у середовищах CM-1 або CM-ACF для зберігання. Для цього рекомендується повільний процес заморожування, який дозволяє знижувати температуру лише на 1°C за хвилину, щоб запобігти шоковому впливу на клітини.
Процес розморожування:	Заморожені клітини B16-F10 розморожують на попередньо встановленій водяній бані при 37°C протягом 40-60 секунд. Потім клітини додають у свіже середовище і центрифугують, щоб видалити компоненти середовища, що замерзають. Зібрані клітини ресуспендують у живильному середовищі і розливають у колби для культивування.
Рівень біобезпеки:	Для роботи з клітинною лінією B16-F10 необхідна лабораторія з рівнем біобезпеки 1.

Напівконфлюентні клітини B16-F10 при 20-кратному та 10-кратному збільшенні.

3.клітини B16-F10: Переваги та недоліки

Як і інші клітинні лінії, B16-F10 також має певні переваги та недоліки. У цьому розділі ми розглянемо деякі суттєві плюси та мінуси цієї лінії клітин меланоми шкіри.

Переваги

Клітинна лінія B16-F10 широко використовується в дослідженнях раку. Перевагами клітин B16-F10 є

Метастатичний потенціал	Клітини меланоми шкіри B16F10 мають високий метастатичний потенціал, що робить їх цінними для вивчення метастазування раку і механізмів, що лежать в його основі.
Модель пухлини in vitro	Клітини B16-F10 слугують моделлю in vitro для вивчення прогресування та росту раку, допомагаючи дослідникам зрозуміти клітинні та молекулярні механізми розвитку раку.

Недоліки

Клітинна лінія B16-F10 має наступні недоліки:

Клітинна лінія, отримана від мишей

B16-F10 - це клітинна лінія, отримана від мишей, що обмежує її застосування в дослідженнях на людях. Результати досліджень на цих клітинах не завжди можуть бути достовірно перенесені на біологію людини.

4.застосування клітин B16-F10 в дослідженнях

Клітинна лінія B16-F10 широко використовується в дослідженнях раку. Нижче ми розглянемо кілька перспективних застосувань цієї клітинної лінії.

Дослідження раку: Клітинна лінія B16-F10 є цінною моделлю для вивчення процесів у ракових клітинах, включаючи проліферацію, інвазію, міграцію та загибель або апоптоз клітин. Крім того, вона допомагає дослідникам отримати уявлення про молекулярні механізми та шляхи, що керують цими клітинними процесами. Дослідження, проведене у 2018 році, вивчало роль CCR5 (рецептор хемокінів С-С типу 5) у переході клітин меланоми з епітеліальних в мезенхімальні та метастазуванні. Результати показали, що дефіцит CCR5 обмежує ріст і метастазування пухлини, тоді як висока експресія призводить до посиленого росту і метастазування клітин B16-F10. Подальші дослідження показали, що CCR5 регулює експресію TGFβ1, який регулює сигналізацію PI3K/AKT/GSK3β для сприяння переходу епітелію в мезенхіму та міграції клітин [4].
Тестування та розробка ліків: Пухлинні клітини меланоми B16F10 є високоагресивними і тому підходять для тестування потенційних протипухлинних препаратів і методів лікування. Дослідники використовують ці клітини та оцінюють вплив різних сполук на ріст, проліферацію та метастазування клітин, що сприяє розробці ліків. Дослідження, проведене у 2018 році Валентиною Нанні та її колегами, вивчало терапевтичні ефекти гідроалкогольного екстракту квітів Spartium junceum . Дослідження показало, що екстракт квітів ефективно індукує старіння клітин B16-F10, що призводить до пригнічення росту клітин і меланогенезу, а отже, може мати потенційну протиракову активність [5].

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 305157

5.публікації за участю клітинної лінії B16-F10

Нижче наведено кілька важливих наукових публікацій за участю клітинної лінії меланоми B16-F10:

Анти-меланогенний ефект етанольного екстракту сорго двоколірного на IBMX-індукований меланогенез у клітинах меланоми B16/F10

Це дослідження було опубліковано в журналі Nutrients (2020). У ньому припускається, що етанольний екстракт сорго двоколірного має антимеланогенну дію на клітини меланоми шкіри B16F10.

Кальцитріол інгібує проліферацію та потенційно індукує апоптоз у клітинах B16-F10

Дослідження, опубліковане в Medical Science Monitor Basic Research (2022), показало, що препарат кальцитріол чинить протипухлинну дію на клітини меланоми B16-F10 шляхом пригнічення проліферації та індукції апоптозу.

Прооксидантний ефект кардолів залучений до їхньої цитотоксичної активності проти клітин меланоми мишей B16-F10

Стаття опублікована в журналі Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Результати дослідження показали, що кардоли, резорцинові ліпіди, виявляють інтенсивну цитотоксичну дію на клітинну лінію B16-F10.

Екстракт екзокарпу гінкго білоба пригнічує метастазування меланоми B16-F10 за участю сигнального шляху PI3K/akt/NF-κB/MMP-9

У дослідженні, опублікованому в Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018), вивчався антиметастатичний потенціал екстракту екзокарпу гінкго білоба на клітинах B16-F10.

Тимохінон індукує апоптоз у клітинах меланоми B16-F10 через інгібування p-STAT3 та пригнічує ріст пухлини у мишачій внутрішньомозковій меланомі ..

Це дослідження в World Neurosurgery (2018) припустило, що тимохінон може бути ефективною терапією проти внутрішньомозкових метастатичних уражень, оскільки він пригнічує ріст клітин B16-F10 та індукує апоптоз.

6.ресурси для клітинної лінії B16-F10: Протоколи, відео та інше

Ендотеліальні клітини B16F10 широко використовуються в дослідженнях раку шкіри. Ось кілька онлайн-ресурсів, що пояснюють протоколи їх культивування та трансфекції:

Трансфекція клітин меланоми B16F10: Цей відеоурок допоможе вам вивчити протокол трансфекції клітин B16-F10.
Трансфекція B16-F10: Цей документ пояснює протокол трансфекції ДНК in vitro для клітин меланоми шкіри B16F10.

Наступне посилання містить протокол культивування клітин B16-F10:

Субкультивування B16-F10: Цей веб-сайт містить корисну інформацію про пухлинні клітини меланоми B16F10. Вона містить інформацію про живильні середовища, час подвоєння, умови культивування та протокол субкультивування клітин, а також поводження з кріоконсервованими та проліферуючими культурами.

Список літератури

Poste, G. та ін., Порівняння метастатичних властивостей клонів меланоми B16, виділених з культивованих клітинних ліній, підшкірних пухлин та окремих метастазів у легенях. Вивчення раку, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
Накамура М., Оно Д., Сугіта С. Механофенотипування варіантів клітин меланоми B16 для оцінки ефективності лікування (-)-епігаллокатехін галатом з використанням конічного мікрофлюїдного пристрою. Мікромашини, 2019. 10(3): p. 207.
Danciu, C. та ін., Поведінка чотирьох різних субліній клітин меланоми мишей B16: C57BL/6J шкіра. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
Висока експресія CCR5 при меланомі посилює епітеліально-мезенхімальний перехід та метастазування через TGFβ1. Журнал патології, 2019. 247(4): p. 481-493.
Нанні, В. та ін., Спиртовий екстракт квіток Spartium junceum L. інгібує ріст і меланогенез у клітинах B16-F10 шляхом індукції старіння. Фітомедицина, 2018. 46: p. 1-10.