Клітини AGS - дослідження клітин аденокарциноми шлунка AGS у дослідженнях раку
AGS-клітини являють собою клітинну лінію аденокарциноми шлунка людини, яка широко використовується в біомедичних дослідженнях. Зокрема, вони використовуються для вивчення біології раку шлунка, включаючи ріст, розвиток, прогресування пухлини та терапевтичні втручання. Крім того, він використовується для дослідження взаємодії хазяїн-патоген.
У цій статті ми обговоримо основи роботи клітин шлункового епітелію AGS. Зокрема, вона охоплює
- Загальні характеристики та походження AGS-клітин
- Інформація про культивування клітинної лінії AGS
- Клітинна лінія AGS: Переваги та обмеження
- Застосування клітин AGS
- Наукові публікації про клітинну лінію AGS
- Ресурси для клітинної лінії AGS: Протоколи, відео та інше
1.загальні характеристики та походження клітин AGS
Знання про походження та загальні характеристики клітинної лінії необхідні перед початком роботи з нею. У цьому розділі ми розглянемо наступне: Що таке AGS-клітини? Яке походження AGS-клітин? Яка морфологія ракової клітинної лінії AGS?
- Клітинна лінія AGS була отримана з тканини шлунка 54-річної європеоїдної жінки з аденокарциномою шлунка. Вона була виділена в 1979 році [1].
- Клітини AGS мають епітеліоподібну морфологію.
- Клітини шлункового епітелію AGS є гіпердиплоїдними. Модальне число хромосом для клітин AGS становить 49, що зустрічається майже у 60% клітин. Поліплоїдія також зустрічається приблизно в 3,6% клітин.
2.інформація про культивування клітинної лінії AGS
Для правильного поводження з клітинною лінією та управління нею необхідно знати основні концепції її культивування. Зокрема, ви повинні дізнатися: Який час подвоєння клітин AGS? Що таке живильне середовище для клітин AGS? Як субкультивувати клітини AGS? Які середовища заморожування використовуються для клітин шлункового епітелію AGS?
Ключові моменти для культивування клітин AGS
|
Час подвоєння: |
Час подвоєння клітин AGS становить від 24 до 48 годин. |
|
Адгезія або суспензія: |
Клітини AGS є адгезивними. Вони ростуть в моношари. |
|
Щільність посіву: |
Клітини AGS висіваються з щільністю 1 x104 клітин/см2. За такої щільності клітини утворюють моношар, що зливається, за 3-5 днів. Після видалення старого середовища клітини промивають 1 х PBS та інкубують з розчином дисоціації Accutase. Відокремлені клітини ресуспендували в культуральному середовищі та центрифугували. Клітинні гранули знову ресуспендують, і після підрахунку клітин за допомогою AGS їх переносять у нову колбу для росту. |
|
Поживне середовище: |
Для культивування клітин AGS використовують середовище DMEM, що містить 10% FBS, 4 мМ L-глутаміну, 4,5 г/л глюкози, 1,5 г/л NaHCO3 і 1,0 мМ пірувату натрію. Поживне середовище слід замінювати 2-3 рази на тиждень. |
|
Умови вирощування: |
Клітини AGS зберігають у зволоженому інкубаторі (при температурі 37°C) з 5% подачею CO2. |
|
Зберігання: |
Заморожені клітини AGS зберігають в електричних морозильних камерах при температурі нижче -150°C або в паровій фазі рідкого азоту протягом більш тривалого часу. |
|
Процес заморожування і середовище: |
Для заморожування клітин AGS використовується середовище CM-1 або CM-ACF. Заморожування клітин відбувається шляхом повільного заморожування, що дозволяє знижувати температуру лише на 1°C за хвилину і захищає життєздатність клітин. |
|
Процес розморожування: |
Заморожені епітеліальні клітини шлунка швидко перемішують на водяній бані при 37°C протягом 40-60 секунд. Розморожені клітини ресуспендують у свіжому живильному середовищі і переливають у нові колби для росту. Після 24-годинної інкубації середовище оновлюють, щоб видалити компоненти, що замерзають. На противагу цьому, розморожені клітини центрифугують і видаляють елементи середовища, що заморожують. Потім зібрані клітини знову ресуспендують і вносять у колбу з культуральним середовищем. |
|
Рівень біобезпеки: |
Для культивування клітин AGS необхідні лабораторні умови 2-го рівня біобезпеки. |
3.клітинна лінія AGS: Переваги та обмеження
У цьому розділі статті ми розповімо про деякі ключові переваги та обмеження, пов'язані з AGS-клітинами.
Переваги
Основними перевагами клітин шлункового епітелію AGS є
|
Легкість у культивуванні |
Клітинну лінію карциноми шлунка AGS легко підтримувати в лабораторіях клітинних культур. Вона не має складних і вибагливих вимог до культури клітин. Крім того, вона демонструє хороші характеристики росту, що робить її ідеальним вибором для вивчення біології раку шлунка. |
|
Зв'язок з раком шлунка |
Клітини AGS були отримані з аденокарциноми шлунка людини, що робить їх широко використовуваними для вивчення біології раку шлунка та терапевтичних втручань. |
Обмеження
Обмеження, пов'язані з клітинною лінією AGS, полягають у наступному:
|
Клітинна модель in vitro |
Клітини AGS культивуються в біомедичних дослідницьких лабораторіях у штучних умовах. Тому вони можуть не повністю відтворювати мікрооточення раку шлунка in vivo та інші клітинні та молекулярні взаємодії. |
4.застосування AGS-клітин
Клітини AGS спеціально використовуються для вивчення біології раку шлунка. Вони мають багато інших перспективних застосувань у біомедичній галузі. Ось деякі з цікавих дослідницьких застосувань AGS-клітин:
- Вивчення раку шлунка: Клітини AGS є чудовим дослідницьким інструментом для вивчення клітинних і молекулярних механізмів, що лежать в основі росту, метастазування та інвазії раку шлунка. Дослідники також використовують шлункові епітеліальні AGS-клітини для вивчення різних клітинних процесів, генетичних мутацій і сигнальних шляхів у розвитку раку шлунка. Дослідження в журналі Oncology Reports (2019) показало, що мікроРНК-183-5p.1 стимулює проліферацію, міграцію та інвазію пухлинних клітин, пригнічуючи сигнальний каскад Bcl 2/P53. Крім того, вона також знижує регуляцію гена TPM1 для здійснення цих ефектів. Таким чином, як мікроРНК, так і TPM1 є ефективними молекулярними мішенями для розробки цілеспрямованої терапії раку шлунка [2].
- Скринінг лікарських засобів: Клітини AGS широко використовуються для скринінгу нових та ефективних препаратів проти раку шлунка. Дослідники оцінюють цитотоксичність та ефективність потенційних ліків, використовуючи клітинну лінію AGS. Також проводяться дослідження з виявлення нових молекулярних мішеней та розробки нових таргетних методів лікування для боротьби з карциномою шлунка. Дослідження, проведене у 2021 році, використовувало клітини раку шлунка AGS та вивчало терапевтичний ефект препарату паклітаксел. Результати показали, що паклітаксел індукує мітотичну катастрофу - невід'ємний механізм апоптозу або загибелі клітин у клітинах AGS. Крім того, він також сприяв автофагії в клітинах раку шлунка [3].
- Взаємодія хазяїн-патоген: Клітинна лінія раку AGS також вивчає взаємодію хазяїн-патоген. Це допомагає дослідникам зрозуміти клітинні механізми та реакції, пов'язані з інфекцією. Наприклад, дослідження, проведене в 2020 році, показало, що невеликі некодуючі РНК, присутні в зовнішніх мембранних везикулах Helicobacter pylori , зменшують секрецію інтерлейкіну 8 в клітинах AGS людини [4].
5.наукові публікації про клітинну лінію AGS
У цьому розділі статті ми розглянемо декілька цікавих та найбільш цитованих наукових публікацій за участю клітин AGS.
У дослідженні, опублікованому в Biomedicine & Pharmacotherapy (2020), припускається, що салідрозид, природна сполука, індукує захисну автофагію та загибель клітин в епітеліальних клітинах шлункового епітелію AGS через модуляцію сигнального шляху PI3K/AKT/mTOR.
Це дослідження було опубліковане в журналі Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). У ньому досліджувалися синергічні протиракові ефекти полісахариду астрагалу та препарату апатінібу в клітинах AGS. Результати дослідження показали, що астрагал посилює протипухлинну дію апатинібу шляхом пригнічення сигналізації AKT.
У цьому дослідженні, опублікованому в Journal of Ethnopharmacology (2018), припускається, що куркузедоалід, природна сполука з рослини Curcuma zedoaria Roscoe, сприяє підвищенню її потенціалу цитотоксичності проти клітин AGS.
Надмірна експресія FOXA1 пригнічує клітинну проліферацію та ЕМТ клітин AGS раку шлунка людини
У цій публікації в журналі Gene (2018) висловлено припущення, що регуляція FOXA1 пригнічує проліферацію клітин аденокарциноми шлунка AGS, а також епітеліально-мезенхімальний перехід (ЕМТ) та інвазію.
Ця наукова стаття була опублікована в Міжнародному журналі медичної мікробіології в 2020 році. У цьому дослідженні клітини AGS були використані для вивчення взаємодії між хазяїном і патогеном. Результати показали, що Helicobacter pylori містить некодуючу РНК у везикулах зовнішньої мембрани, яка впливає на рівень IL-8 у клітинах AGS.
6.ресурси для клітинної лінії AGS: Протоколи, відео та інше
Нижче наведено кілька ресурсів, що містять інформацію про клітини AGS.
- Протокол трансфекції клітин AGS: Це відео є покроковим посібником з вивчення протоколу трансфекції шлункових епітеліальних клітин AGS.
За наступним посиланням можна ознайомитися з протоколом культивування клітин AGS.
- Протокол культивування клітин AGS: Цей веб-сайт містить корисну інформацію про клітинні середовища та протоколи культивування клітин AGS. Коротко, він містить протокол субкультивування шлункових епітеліальних клітин AGS та поводження з проліферуючими і кріоконсервованими культурами AGS.
- Субкультивування клітин AGS: Цей сайт детально пояснює процедуру субкультивування клітин AGS.
Джерела
- Phuc, B.H. та ін., Порівняльна геноміка двох в'єтнамських штамів Helicobacter pylori, CHC155 від пацієнта з некардіальним раком шлунка та VN1291 від пацієнта з виразкою дванадцятипалої кишки. Наукові доповіді, 2023. 13(1): p. 8869.
- Lin, J. та ін., miRNA-183-5p. 1 сприяє міграції та інвазії клітин AGS раку шлунка шляхом націлювання на TPM1 Corrigendum in/10.3892/or. 2020.7902. Доповіді з онкології, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
- Хінг Т.М. та ін. Вплив паклітакселу на апоптоз, аутофагію та мітотичну катастрофу в клітинах AGS. Наукові доповіді, 2021. 11(1): p. 23490.
- Чжан Х. та ін., sncRNA, упаковані везикулами зовнішньої мембрани Helicobacter pylori, пригнічують секрецію IL-8 в клітинах людини. Міжнародний журнал медичної мікробіології, 2020. 310(1): p. 151356.