Клітинна лінія A375 - посібник з дослідження меланоми

A375 - це лінія клітин меланоми людини, яка широко використовується в токсикологічних та імуноонкологічних дослідженнях. Дослідники використовують цю клітинну лінію для вивчення біології раку та сигнальних шляхів, тестування або скринінгу потенційних протиракових препаратів, а також для розробки нових ефективних методів лікування.

Походження та загальні характеристики клітин лінії A375

Знання про походження та загальні характеристики клітинної лінії може допомогти вам спланувати її використання в дослідженнях. У цьому розділі статті ми розповімо про походження та особливості клітинної лінії А375. Наприклад, що таке клітинна лінія A375? Які характеристики клітинної лінії A375? Звідки беруться клітини лінії А375? Яка морфологія клітин меланоми A375? Який розмір клітин A375?

Клітинна лінія раку шкіри А375 походить від культури експлантату солідної пухлини 54-річної жінки зі злоякісною меланомою [1].
Клітини A375 мають епітеліоподібну морфологію.
Розмір клітин А375 є відносно меншим порівняно з іншими клітинними лініями. Їхній діаметр становить приблизно 12 мкм.
Клітини меланоми A375 гіпотриплоїдні. Модальне число хромосом для цієї клітинної лінії становить 62. Зазвичай кожна клітина має дев'ять маркерних хромосом і по одній копії нормальних хромосом N2, N6 і N22.

Лікар обстежує нарости на шкірі дорослої людини на предмет раку шкіри.

Клітини А375: Інформація про культуру клітин

Культуру клітин A375 легко підтримувати. Вони не мають жодних вибагливих вимог до культури клітин. Цей розділ допоможе вам дізнатися необхідну інформацію про культуру клітин. Наприклад, який час подвоєння клітин A375. Що таке середовище для клітинної лінії A375? Яка щільність посіву A375? Чи є клітини меланоми A375 адгезивними?

Ключові моменти для культивування клітин лінії A375

Час подвоєння популяції:	Час подвоєння популяції A375 становить 20 годин.
Адгезійні або в суспензії:	A375 - це адгезійна лінія клітин меланоми людини.
Щільність посіву:	щільність посіву 1 x¹⁰⁴^{клітин/см2}є ідеальною для культури клітин A375. Адгезовані клітини промивають 1 х фосфатним буферним розчином (PBS) та інкубують з пасажним розчином (Accutase). Потім до клітин додавали культуральне середовище і центрифугували. Зібрані клітини ресуспендували в культуральному середовищі і переносили в нові колби для росту.
Поживне середовище:	DMEM рекомендується як ідеальне середовище A375 з додаванням 10% фетальної сироватки великої рогатої худоби (FBS), 4,5 г/л глюкози, 1,5 г/л NaHCO3, 4 мМ L-глутаміну та 1,0 мМ пірувату натрію. Поживне середовище А375 слід оновлювати 2-3 дні на тиждень.
Умови вирощування:	Клітини меланоми A375 вирощують у зволоженому інкубаторі (37°C) з 5% подачею CO2.
Зберігання:	Заморожені клітини A375 слід зберігати при температурі нижче -150°C у паровій фазі рідкого азоту або в електричному морозильнику.
Процес заморожування і середовище:	Для заморожування клітинної лінії A375 використовують середовища CM-1 або CM-ACF. Для захисту життєздатності клітин обрано повільний процес заморожування, який дозволяє поступово знижувати температуру на 1°C.
Процес розморожування:	Заморожений флакон з клітинами меланоми A375 швидко перемішують на водяній бані протягом 40-60 секунд, поки не залишиться лише невелика крижана грудка. Клітини додають до свіжого середовища і центрифугують, щоб видалити елементи середовища, що замерзають. Отриману клітинну гранулу знову ресуспендують і переливають у нові колби.
Рівень біобезпеки:	З культурами A375 працюють і утримують в лабораторних умовах з рівнем біобезпеки 1.

Конфлюентний шар адгезованих клітин A375 при 20-кратному збільшенні.

Переваги та обмеження клітинної лінії А375

Як і інші клітинні лінії, клітина меланоми А375 має унікальне поєднання переваг і недоліків, що робить її цінним інструментом для дослідження раку меланоми. У цьому розділі ми перерахували лише кілька важливих переваг і недоліків клітинної лінії А375.

Переваги

Нижче перераховані значні переваги клітин лінії А375:

Модель пухлини меланоми: Клітинна лінія A375 була отримана зі злоякісної пухлини меланоми, що слугує безцінною моделлю пухлини для дослідження біології меланоми та терапевтичних втручань. Ці клітини демонструють меланомоподібні властивості, такі як висока швидкість проліферації та інвазивність.
Пухлиногенність: Клітини А375 є високо пухлиногенними, тобто вони можуть утворювати пухлини. Повідомляється, що клітини A375 утворюють агресивні амеланотичні меланоми у швейцарських мишей лінії NIH, які отримували антитимоцитарну сироватку (імуносупресивний агент).
Добре охарактеризований: A375 - генетично добре охарактеризована клітинна лінія. Вона має специфічні генетичні мутації, характерні для меланоми. Мутації A375 включають зміну гена A375 BRAF, що робить її чутливою до BRAF-специфічних інгібіторів. Таким чином, цей генетичний профіль робить клітини A375 чудовим інструментом для дослідження раку для вивчення основних молекулярних шляхів і таргетованої терапії.

Обмеження

Обмеження, пов'язані з клітинами A375, є наступними:

Обмеження in vitro: A375 - це модель пухлини in vitro. Хоча вона імітує характеристики меланоми, вона не може повністю відображати складність пухлин меланоми. Тому слід бути обережним, коли результати досліджень in vitro узагальнюються на клінічні дослідження.

Придбайте клітини A375 зараз

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 300110

Дослідницькі застосування клітинної лінії A375

Клітинна лінія A375 має широке застосування в дослідженнях раку. Ось деякі з найпоширеніших сфер, де використовуються клітини A375.

Дослідження раку: Клітини A375 широко застосовуються в дослідженнях меланоми. Дослідники використовують ці клітини для вивчення біології раку шкіри, процесів і основних механізмів клітинної сигналізації, включаючи проліферацію, міграцію та інвазію клітин. Це також може допомогти дослідникам визначити нові молекулярні терапевтичні мішені. У дослідженні, проведеному Лін Чжу та його колегами у 2019 році, використовували високоагресивні клітини меланоми A375 і виявили роль мікроРНК-3662 на ріст та інвазію клітин меланоми A375. Результати дослідження свідчать, що мікроРНК-3662 націлена на ген ZEB1 і регулює ріст клітин меланоми in vitro та in vivo на моделі пухлини A375 [2]. Аналогічно, дослідження, проведене в 2018 році, показало, що PI3K/AKT і MAPK/ERK шляхи залучені в проліферацію і метастазування клітинної лінії A375 [3].
Відкриття та тестування ліків: Клітинна лінія A375 є корисною моделлю пухлини in vitro для тестування та скринінгу потенційних протипухлинних препаратів. Дослідники оцінюють токсичність та ефективність нових хіміотерапевтичних препаратів, сполук та інших методів лікування, використовуючи ці клітини меланоми A375. Наприклад, у дослідженні вивчали протиракові властивості мікро- та наночастинок, отриманих з грейпфрута, на клітинах раку меланоми людини A375. Результати показали, що мікро- та наночастинки індукують зупинку клітинного циклу та апоптоз, а також перешкоджають експресії генів при проліферації, міграції та інвазії клітин [4].

Клітини лінії А375: Публікації

Нижче наведені деякі важливі наукові публікації, в яких згадуються клітини A375.

Вітамін D та його низькокалорійні аналоги модулюють протипухлинні властивості цисплатину і дакарбазину в клітинній лінії меланоми людини A375

Це дослідження було опубліковане в Journal of Oncology у 2019 році. Дослідження показало, що сумісне лікування вітаміном D та його аналогами покращує протипухлинну активність цисплатину та дакарбазину в клітинах меланоми A375.

In vitro оцінка протимеланомних ефектів (клітинна лінія А375) гелю та екстрактів цільного листя з окремих видів алое

Це дослідження було опубліковане в Journal of Herbal Medicine у 2022 році. У цьому дослідженні вивчали протимеланомні ефекти гелю алое вера на клітинах меланоми A375.

Член родини фермітину 2 сприяє прогресуванню меланоми шляхом посилення зв'язування p-α-Pix з Rac1 для активації шляху MAPK

У дослідженні, опублікованому в журналі Oncogene (2021), припускається, що член родини фермітину 2 (FERMT2 або kindlin-2) сприяє прогресуванню меланоми шляхом активації MAPK через зв'язування з p-α-Pix і Rac1.

FARP1 сприяє проліферації клітин через модуляцію сигнального шляху MAPK при шкірній меланомі

У дослідженні, опублікованому в American Journal of Dermatopathology (2019), припускається, що FARP1 може сприяти розвитку та прогресуванню шкірної меланоми. Таким чином, він може бути корисною терапевтичною мішенню.

Цитотоксичний та апоптотичний потенціал екстрактів Phyllodium elegans на ракових клітинах людини

Ця наукова стаття була опублікована в журналі Bioengineered (2019). У цьому дослідженні вивчали цитотоксичну та апоптичну активність екстракту рослини Phyllodium elegans на клітинних лініях карциноми людини, включаючи лінію A375.

Ресурси для клітинної лінії A375: Протоколи, відео та інше

Нижче наведено кілька онлайн-ресурсів, присвячених клітинам лінії A375.

Трансфекція клітин A375: Цей відеоурок допоможе вам крок за кроком вивчити процедуру трансфекції клітин A375.
Культивування клітин: Це відео містить дуже корисну інформацію щодо культивування клітинних ліній.

Протоколи культивування клітин лінії A375 наведені тут.

Клітинна лінія A375: Це посилання містить корисну інформацію про культивування та підтримку клітинної лінії A375, включаючи середовища A375 та поводження із замороженими та проліферуючими культурами A375.

Часті запитання (FAQ) щодо клітин A375

Список літератури

Аврам, С. та ін., Стандартизація моделей меланоми людини A375 на хоріоаллантоїдній мембрані курячих ембріонів та мишах Balb/c. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Чжу Л. та ін. МікроРНК-3662 націлена на ZEB1 і послаблює інвазію високоагресивної клітинної лінії меланоми A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Пенг X. та ін., Оксифадихалкон С інгібує проліферацію та метастазування клітин меланоми A375 шляхом пригнічення PI3K/Akt та MAPK/ERK шляхів. Науки про життя, 2018. 206: p. 35-44.
Стенлі К. та ін. Мікро- та наночастинки, отримані з грейпфрута, демонструють відмінні профілі метаболізму та протиракову активність у клітинній лінії меланоми людини A375. Клітини, 2020. 9(12): p. 2722.