Ендотеліальні клітини пуповинної вени людини (HUVEC)
HUVEC — це первинні ендотеліальні клітини, які є важливим інструментом у біомедичних дослідженнях. Вони допомагають дослідникам вивчати ангіогенез, біологію судин та такі захворювання, як атеросклероз і рак. HUVEC використовуються для дослідження поведінки ендотеліальних клітин, механізмів клітинної сигналізації та тестування лікарських препаратів, надаючи цінну інформацію щодо потенційних методів терапії або лікування серцево-судинних захворювань та раку. Вони також слугують модельною системою для досліджень у галузі судинної біології.
Походження та загальні характеристики клітин HUVEC
Знання про походження та загальні характеристики клітинної лінії є ключовими для визначення її придатності для вашого дослідження. Цей розділ допоможе вам дізнатися цю важливу інформацію про ендотеліальні клітини HUVEC: Для чого використовуються клітини HUVEC? Що означає абревіатура HUVEC? Які відмінні характеристики HUVEC? Яка морфологія HUVEC? Який діаметр HUVEC? Який розмір клітин HUVEC?
- Клітини HUVEC вилучають з ендотелію вени пуповини людини.
- Морфологія HUVEC нагадує ендотеліальні клітини. Зазвичай вони мають багатокутну форму та кругле ядро в центрі.
- Розмір клітин HUVEC становить 17 мкм у діаметрі.
- Ці ендотеліальні клітини є диплоїдними. Вони мають модальне число хромосом 46.
HUVEC TERT2
HUVEC TERT2 — це безсмертна клітинна лінія, отримана з первинних клітин ендотелію вени пуповини людини (HUVEC). Вона була розроблена шляхом введення гена людської теломерази-зворотної транскриптази (TERT) у геном клітин HUVEC. Ця модифікація допомогла подовжити термін їхнього існування в культурі, що дозволило проводити довготривалі експерименти без обмежень, пов’язаних із первинними HUVEC.
У чому полягає різниця між HUVEC та HMEC-1?
Структура та складність клітинних ліній ендотеліальних клітин HUVEC та HMEC-1 є порівнянними. Однак клітини HMEC-1 демонструють більш однорідну популяцію, ніж HUVEC, з точки зору розміру та зернистості клітин. Це може зменшити варіації в експериментальних даних.
Інформація про культивування клітинної лінії HUVEC
Цей розділ статті присвячений наданню вам важливих знань про культивування клітин HUVEC. Це значно полегшить вашу роботу з ними. Тут ви знайдете відповіді на такі поширені запитання: Який час подвоєння HUVEC? Яка щільність висівання HUVEC? Скільки пасажів є у HUVEC? Що таке середовище для клітин HUVEC? Як культивувати HUVEC?
Ключові моменти культивування клітин HUVEC
Час подвоєння:
Час подвоєння HUVEC становить приблизно 23,5 години. Проте він може варіюватися залежно від умов культивування клітин та кількості пасажів.
Адгезивні або у суспензії:
HUVEC — це адгезивна клітинна лінія. Клітини ростуть і утворюють моношари.
Коефіцієнт поділу:
Коефіцієнт субкультури для HUVEC становить від 1:2 до 1:4. Для висівання клітини промивають 1x фосфатно-буферним сольовим розчином і додають розчин для дисоціації (Accutase) на 8–10 хвилин при кімнатній температурі. Після цього додають культуральне середовище, а відокремлені клітини центрифугують. Надосадову рідину видаляють, а осад клітин обережно ресуспендують. Клітини переносять у нову культуральну колбу для росту.
Середовище для росту:
Для культивування клітин HUVEC використовується середовище для росту ендотеліальних клітин. Середовище замінюють кожні 2–3 дні. Клітини HUVEC можна використовувати до 8–10 пасажів.
Умови вирощування:
Лінія клітин ендотелію людини (HUVEC) утримується у зволоженому інкубаторі з 5% CO2 при температурі 37°C.
Зберігання:
Клітини HUVEC зазвичай зберігають при температурі нижче -150 °C в ультранизькотемпературному морозильнику або в паровій фазі рідкого азоту. Це забезпечує збереження життєздатності клітин протягом тривалого часу.
Процес заморожування та середовище:
Для збереження клітин HUVEC рекомендується використовувати середовища для заморожування CM-1 або CM-ACF. Як правило, рекомендується повільний процес заморожування, оскільки він забезпечує зниження температури лише на 1 °C за хвилину, що запобігає шоку клітин та зберігає їх життєздатність.
Процес розморожування:
Для розморожування заморожених клітин помістіть їх у попередньо нагріту водяну баню при температурі 37 °C на 40–60 секунд, доки не залишиться лише невеликий шматок льоду. Далі додайте свіже середовище до клітин і відцентрифугуйте. Цей крок необхідний для видалення залишків середовища для заморожування з клітин. Ресуспендуйте осад клітин і перенесіть клітини в нову колбу з культуральним середовищем.
Рівень біобезпеки:
Для належного поводження з культурами клітин HUVEC необхідна лабораторія рівня біобезпеки 1.
Опубліковано: 2023 р. | Останній перегляд: травень 2026 р.
Переваги та обмеження
Як і інші лінії клітин людини, клітини HUVEC мають свої переваги та обмеження. У цьому розділі ми розглянемо деякі найважливіші з них, які суттєво впливають на їх використання в наукових дослідженнях.
Переваги
Основними перевагами клітин HUVEC є:
-
Модель ендотеліальних клітин
Дуже актуальні моделі для вивчення ангіогенезу, судинної біології та захворювань, пов'язаних з функцією ендотелію.
-
Легкість культивування
Відносно прості у виділенні з пуповин людини. Не мають вибагливих вимог до культивування та легко утримуються в дослідницьких лабораторіях.
Обмеження
Обмеження, пов'язані з лінією ендотеліальних клітин HUVEC, такі:
-
Обмежений термін життя
HUVEC мають обмежений термін життя, зазвичай придатні для 8–10 пасажів, що є обмеженням для довгострокових експериментів. Зі збільшенням кількості пасажів вони можуть піддаватися старінню.
Застосування клітин HUVEC у дослідженнях
Клітини HUVEC мають значний потенціал для різних застосувань у біомедичній галузі. У цій статті ми висвітлимо деякі важливі напрямки використання клітин HUVEC у наукових дослідженнях.
- Дослідження серцево-судинних захворювань: Клітинна лінія HUVEC є цінною моделлю ендотеліальних клітин, що дозволяє отримати уявлення про механізми, що лежать в основі серцево-судинних захворювань, таких як атеросклероз, тромбоз та гіпертонія. Дослідники використовують ці клітини для вивчення механізмів, що лежать в основі ендотеліальної дисфункції, окисного стресу та запалення. Наприклад, у дослідженні, проведеному в 2020 році, використовували HUVEC і виявили, що довга некодуюча РНК TTTY15 відіграє ключову роль у полегшенні гіпоксією опосередкованого пошкодження клітин ендотелію судин шляхом впливу на вісь miRNA-186-5p [1].
- Дослідження раку: HUVEC ідеально підходять для вивчення судинної біології. Тому їх використовують для дослідження ангіогенезу пухлин та взаємодій ендотеліальних клітин. Це допомагає дослідникам зрозуміти, як пухлини отримують надлишкове кровопостачання та проліферують. Наприклад, Хуї Ван та колеги виявили, що екзосоми, що виділяються клітинами плоскоклітинного раку ротової порожнини (OSCC), підвищують рівні miRNA-210-3p та знижують експресію ефріну A3 у клітинах HUVEC, а також сприяють утворенню трубочок шляхом регулювання каскаду PI3K/AKT, що підтверджено за допомогою тесту на утворення трубочок HUVEC [2].
- Тестування лікарських засобів: Ендотеліальні клітини HUVEC широко використовуються для тестування лікарських засобів. За допомогою HUVEC дослідники можуть оцінювати in vitro ефективність, токсичність та потенційні побічні ефекти природних сполук, наночастинок та інших терапевтичних засобів. Наприклад, у одному дослідженні за допомогою клітин HUVEC оцінювали токсичність наночастинок срібла, синтезованих з екстракту Rheum ribes [3].
Публікації, присвячені клітинам HUVEC
У цьому розділі статті наведено кілька часто цитованих та цікавих наукових публікацій, присвячених клітинам HUVEC.
Це дослідження було опубліковано в журналі «Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology» (2019). У ньому зазначено, що гамма-аміномасляна кислота (GABA), нейромедіатор, пригнічує окислювальний стрес, індукований H2O2, у клітинах HUVEC; отже, вона може бути ефективним фармакологічним засобом проти серцево-судинних захворювань, пов’язаних з окислювальним пошкодженням.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Biochemical and Biophysical Research Communications» (2020), було досліджено, як естроген регулює сигнальний трансдуктор, глікопротеїн 130 (gp130), у клітинах HUVEC.
Твердість субстрату регулювала міграцію та потенціал ангіогенезу клітин A549 та HUVEC
У цій науковій статті, опублікованій у журналі Journal of Cellular Physiology (2017), досліджували вплив різної жорсткості субстрату на міграцію та ангіогенез ендотеліальних клітин (A549 та HUVEC). Для оцінки цих ефектів було проведено аналізи міграції та ангіогенезу HUVEC.
Накопичення наночастинок оксиду міді в лізосомах спричиняє загибель клітин HUVEC
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Biomaterials» (2018), досліджуються потенційні механізми, відповідальні за токсичність наночастинок оксиду міді в клітинах ендотелію судин.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі Medicine (2020), висунуто гіпотезу, що природна сполука кверцетин пригнічує опотоз та запалення HUVEC, опосередковані TNF-альфа, шляхом регуляції сигнальних шляхів AP-1 та NF-kB.
6. Ресурси щодо клітинної лінії HUVEC: протоколи, відео та інше
Нижче наведено кілька онлайн-ресурсів, присвячених клітинам HUVEC.
- Трансфекція HUVEC: Цей веб-сайт містить вичерпну інформацію щодо трансфекції HUVEC. Наприклад, тут наведено відомості про реагенти для трансфекції та протокол трансфекції HUVEC in vitro.
За посиланням нижче наведено протокол культивування клітин HUVEC.
- Культура клітин HUVEC: Цей документ допоможе вам ознайомитися з протоколами культивування клітин HUVEC для субкультури та роботи з кріоконсервованими культурами.
Посилання
- Zheng, J., et al., LncRNA TTTY15 регулює гіпоксією індуковане ушкодження клітин ендотелію судин шляхом націлювання на miR-186-5p при серцево-судинних захворюваннях. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
- Wang, H., et al., Екзосоми OSCC регулюють miR-210-3p, націлюючись на EFNA3, щоб сприяти ангіогенезу раку ротової порожнини через шлях PI3K/AKT. BioMed research international, 2020. 2020.
- Унал, І. та С. Егрі, Біосинтез наночастинок срібла з використанням водного екстракту Rheum ribes, характеристика та оцінка його токсичності на HUVEC та Artemia salina. Inorganic and Nano-Metal Chemistry, 2022: с. 1-14.