celice 4T1 - bistven vpogled v raziskave in uporabo celic raka dojke
4T1 je celična linija mišjega raka dojke, ki jo je mogoče presaditi. Pogosto se uporablja kot genetsko identičen in vitro model tumorja za raziskovanje človeškega raka dojk. celice 4T1 so zelo invazivne in tumorogene; iz primarnega tumorskega mesta v mlečni žlezi pogosto metastazirajo na druga mesta, vključno z jetri, bezgavkami, pljuči, kostmi in možgani, zato so idealne za preučevanje metastaziranja raka dojk [1].
Splošne značilnosti in izvor celic 4T1
Znanje o izvoru in splošnih značilnostih celične linije je bistvenega pomena, preden začnemo delati z njo. V tem poglavju smo navedli osnovne značilnosti celic 4T1 raka dojke. Kaj so na primer celice 4T1? Kakšne so značilnosti celične linije 4t1? Kakšen je izvor celične linije 4T1? Kakšna je morfologija celične linije 4T1?
- 4T1 je celična linija tumorja dojke, ki izvira iz tumorja dojke, ki je spontano nastal pri miših seva BALB/c. Te zelo invazivne in tumorogene celice natančno posnemajo obnašanje človeškega raka dojk v smislu rasti in metastatskega širjenja. Z modelom tumorja 4T1 preučujemo predvsem trojno negativnega raka dojk (TNBC).
- celice 4T1 so adherentne in imajo epitelijskim celicam podobno morfologijo.
4T1 v primerjavi s celično linijo EMT-6
4T1 in EMT-6 sta neimunogena mišja celična modela za študije trojno negativnega raka dojk. Pri tem so 4T1 bolj agresivne in invazivne tumorske celice kot EMT-6 z manj invazivnimi lastnostmi [2].
celice 4T1 in 4T07
4T07 je prav tako mišja celična linija raka. Glavna razlika med celicami 4T1 in 4T07 je v tem, da lahko celice 4T1 zapustijo mesto primarnega tumorja in se širijo ter tvorijo vidne sekundarne metastaze, medtem ko celice 4T07 ne morejo tvoriti vidnih metastaz, čeprav zapustijo primarno mesto [3].
Podatki o gojenju celične linije 4T1
celična linija 4T1 za raka dojke omogoča obsežno raziskovalno uporabo na biomedicinskem področju. Za gojenje teh celic morate pregledati naslednje ključne točke, ki opisujejo; kaj je podvojitveni čas 4T1? Kako se gojijo celice 4T1? Kakšna je gostota naselitve celic za 4T1?
Ključne točke za gojenje celic 4T1
|
Čas podvojitve: |
Povprečni čas podvojitve populacije celic raka dojke 4T1 je 14 ur. |
|
Prilepljene ali v suspenziji: |
4T1 je adherentna celična linija. |
|
Razmerje subkultiviranja: |
Za celično linijo 4T1 trojno negativnega raka dojke se priporoča razmerje delitve 1:6 in 1:8. Za delitev se celice sperejo s PBS in inkubirajo z encimom Accutase 8 do 10 minut. Razdružene celice zberemo s centrifugiranjem in jih ponovno suspendiramo v svežem gojišču. Resuspendirane celice se razporedijo v novo erlenmajerico za rast. |
|
Gojišče za rast: |
Za gojenje celic 4T1 se uporablja gojišče RPMI 1640. za idealno rast celic se v gojišče doda 10 % fetalnega govejega seruma (FBS), 2,0 g/L NaHCO3 in 2,1 mM stabilnega glutamina. |
|
Pogoji rasti: |
4T1 tumorske celice hranimo v vlažnem inkubatorju pri 37 °C s 5-odstotnim dovajanjemCO2. |
|
Shranjevanje: |
celice 4T1 je treba hraniti pri temperaturi pod -150 °C, tj. v električnem zamrzovalniku ali v parni fazi tekočega dušika, da se ohrani vitalnost celic. |
|
Postopek zamrzovanja in medij: |
Za celično linijo 4T1 se priporočata CM-1 ali CM-ACF. Prednost ima metoda počasnega zamrzovanja, saj s postopnim padcem temperature za 1 °C zaščiti sposobnost preživetja celic. |
|
Postopek odtaljevanja: |
Vialica z zamrznjenimi celicami se nekaj sekund hrani v vodni kopeli pri 37 °C, dokler se celice ne odtalijo in ostane le še majhen ledeni grm. Te celice ponovno suspendiramo v svežem gojišču in jih prelijemo v erlenmajerico za gojenje. Po 24 urah inkubacije se gojišče zamenja, da se odstranijo sestavine zamrzovalnega gojišča. |
|
Raven biološke varnosti: |
Za gojenje celic raka dojke 4T1 se priporoča laboratorij 1. stopnje biološke varnosti. |
celična linija 4T1: Prednosti in slabosti
V tem poglavju članka bodo obravnavane prednosti in slabosti, povezane z metastatskim modelom 4T1.
Prednosti
Glavne prednosti celične linije 4T1 so:
- Tumorigenicizem:
4T1 je zelo tumorigena celična linija. Te celice lahko ob injiciranju v miško tvorijo singenični mišji model 4T1 za študije raka dojke. Zato se model 4T1 idealno uporablja za preučevanje razvoja, rasti in metastaziranja tumorjev. Poleg tega je uporaben za presejanje in ocenjevanje terapevtskih zdravil.
- In vitro model metastaziranja:
model 4T1 ima naravno težnjo po metastaziranju, kar raziskovalcem omogoča učinkovito raziskovanje osnovnih mehanizmov in poti, vključenih v proces metastaziranja. Poleg tega so celice 4T1 odporne na 6-tioguanin. To pripomore k učinkovitemu odkrivanju mikrometastatičnih celic z večjo natančnostjo v primerjavi z drugimi modeli, saj ni treba tehtati ciljnih organov in šteti nodulov.
Slabosti
Slabosti, povezane s celično linijo 4T1, so:
- Agresivnost/hitra rast:
celična linija 4T1 je zelo agresivna celična linija trojno negativnega raka dojke. Zaradi hitre rasti je uporaba te celične linije v dolgoročnih poskusih in nadzorovanje eksperimentalnih spremenljivk zahtevna.
Nakup celične linije 4T1: visokokakovostni model raka dojke
celična linija 4T1: Uporaba v raziskavah raka
Miška modelna celična linija 4T1 je dragoceno raziskovalno orodje za preučevanje biologije raka in ocenjevanje novih načinov zdravljenja. Tu so navedene glavne aplikacije celic 4T1:
Biologija raka
Celična linija 4T1 se pogosto uporablja za preučevanje razvoja in rasti raka. Je idealen in vitro model za preučevanje in raziskovanje različnih celičnih in molekularnih mehanizmov, ki sodelujejo pri napredovanju tumorjev in metastaziranju. Poleg tega lahko razkrije vlogo celičnih signalnih poti, mikrookolja in izražanja genov v teh procesih. V raziskavi, izvedeni leta 2019, so bile celice 4T1 uporabljene za odkrivanje gonilnih mehanizmov za invazijo in migracijo rakavih celic. Rezultati so razkrili, da so pri tem vpleteni geni STAT3, MMP2 in MMP9, zaviranje teh genov pa lahko izrazito omeji migracijo in invazijo rakavih celic [4]. Podobne študije so pokazale tudi na več drugih signalnih poti, ki sodelujejo pri razvoju tumorjev in metastaziranju.
Poleg tega je model 4T1 pomemben za razumevanje mikrookolja raka dojke, vključno z infiltracijo imunskih celic in rastjo primarnega tumorja. Študije, osredotočene na mikrookolje tumorja 4T1, so pokazale pomemben vpogled v vlogo imunskih celic in citokinov, kot je izražanje CXCL13, pri napredovanju tumorja. Model pomaga tudi pri raziskovanju metastatskih niš in metastaziranja tumorjev, zlasti pri poznih stadijih raka dojke, kjer prevladuje kolonizacija mamarnega karcinoma.
Raziskave na področju zdravljenja raka
Celična linija 4T1 se pogosto uporablja v raziskavah zdravljenja raka za presejanje in ocenjevanje novih načinov zdravljenja. V študiji je bil raziskan citotoksični potencial zeleno sintetiziranih železovih nanodelcev iz izvlečka rožmarina (Rosemary-FeNPs) in čistega izvlečka rožmarina na celični liniji 4T1. Rezultati raziskave so pokazali, da so rožmarin-FeNPs bolj obetavni kot čisti izvleček [5]. Podobno so v študiji, opravljeni leta 2021, preučevali protitumorski potencial izvlečka ingverja na celicah raka dojke 4T1 in na modelu miši 4T1 [6].
Poleg naravnih izvlečkov se celična linija 4T1 uporablja za ocenjevanje učinkovitosti tradicionalnih kemoterapevtikov. Raziskave, ki so vključevale kombinacijo cisplatina z drugimi terapijami, so na primer pokazale večjo smrt tumorskih celic in zmanjšano napredovanje tumorja na modelu 4T1. Uvedba luciferaze firefly v celice 4T1 je omogočila slikanje rasti tumorja in metastatskega fenotipa v realnem času, kar je olajšalo ocenjevanje vpliva različnih zdravljenj.
Poleg tega je odpornost celične linije 4T1 na 6-tioguanin olajšala študije mikrometastatskih celic, kar je izboljšalo odkrivanje in analizo metastaz. Ta celična linija ima tudi ključno vlogo pri preučevanju protitumorske imunosti in učinkov imunoterapije, zlasti v okviru ortotopičnih mišjih modelov, kjer lahko raziskovalci natančno posnemajo človeške rake.
Na splošno ostaja celična linija 4T1 nepogrešljivo orodje v onkoloških raziskavah, od razumevanja temeljnih mehanizmov biologije raka do razvoja in preskušanja novih terapevtskih strategij.
celice 4T1: Raziskovalne publikacije
V tem razdelku člankov bo predstavljenih nekaj zanimivih in najbolj citiranih publikacij o celicah 4T1.
Ta članek je bil objavljen leta 2018 v reviji Journal of Photochemistry and Photobiology. V raziskavi je bilo predlagano, da srebrovi nanodelci, sintetizirani iz Madhuca longifolia , delujejo antiproliferativno na tumorske celice 4T1 prek razgradnje celične stene in nastajanja ROS.
Citotoksični in apoptotični učinki verbakozida na celično linijo 4T1 raka dojke
Ta študija v reviji BMC Pharmacology and Toxicology (2021) predlaga, da verbakozid, naravna spojina, prek signalizacije TLR4 povzroči apoptotične učinke v celicah raka dojke 4T1.
Eupatorin je zaviral napredovanje tumorja in izboljšal odpornost v modelu mišjega raka dojke 4T1
Ta raziskava je bila objavljena v reviji Integrative Cancer Therapies leta 2020. V tej študiji so bile celice 4T1 uporabljene za razvoj singeničnega mišjega modela 4T1 in z njim raziskan protirakavi potencial zdravila Eupatorin. Eupatorin je upočasnil razvoj tumorja na mišjem modelu 4T1.
Zaviralni učinek izvlečka Viola odorata na rast tumorjev in metastaziranje pri modelu raka dojke 4T1
Ta raziskava, objavljena v Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018), predlaga, da ima zdravilna rastlina Viola odorata potencialne citotoksične učinke na celice 4T1.
V tej študiji je bilo predlagano, da so lahko trdni lipidni nanodelci, obremenjeni z docetakselom (SLN z DTX), obetavno sredstvo za zdravljenje raka dojk in preprečevanje metastaziranja, saj omejujejo rast raka in pljučne metastaze celic 4T1.
Viri za celično linijo 4T1: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo
V nadaljevanju je navedenih nekaj virov o celicah 4T1:
- 4T1 transfekcija: Ta videoposnetek je vodnik po korakih za izvedbo transfekcije celične linije 4T1.
- Subkultiviranje celične linije: V tem videoposnetku je pojasnjen protokol subkultiviranja za adherentne celične linije.
Naslednja povezava vsebuje protokol gojenja celic za celice 4T1:
- 4T1: Ta spletna povezava vsebuje vse uporabne informacije o ravnanju s kulturami 4T1. Vsebuje informacije o gojiščih, protokole za ravnanje s kriokonzerviranimi kulturami in proliferacijskimi kulturami.
Pogosto zastavljena vprašanja o celični liniji 4T1
Reference
- Pulaski, B.A. in S. Ostrand-Rosenberg, Mišji model tumorja dojke 4T1. Curr Protoc Immunol, 2001. Poglavje 20: str. Enota 20.2.
- Maxwell, K.G., Immunomodulation of Breast Cancer Cells for Whole Tumor Vaccination (Imunomodulacija celic raka dojke za cepljenje celotnega tumorja ). 2016.
- Walker, I., et al., Mamilarni tumorji povzročajo centralno izražanje pro-vnetnih citokinov, vendar ne vedenjskih primanjkljajev pri miših Balb/C. Scientific Reports, 2017. 7(1): p. 1-13.
- Li, Y., et al., Inhibicija signalne poti Stat3 z naravnim proizvodom pektolinarigeninom omili metastaziranje raka dojke. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: p. 1195.
- Farshchi, H.K., et al., Green synthesis of iron nanoparticles by Rosemary extract and cytotoxicity effect evaluation on cancer cell lines (Zelena sinteza železovih nanodelcev z izvlečkom rožmarina in ocena citotoksičnega učinka na rakave celične linije ). Biokataliza in kmetijska biotehnologija, 2018. 16: p. 54-62.
- Gholizadeh, A.P., et al., Effect of Ginger Extract on 4T1 Breast Cancer Cell Line in Balb/c Mouse (Učinek izvlečka ingverja na celično linijo raka dojke 4T1 pri miših Balb/c). Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): p. 43-49.