Celice 4T1 – ključni vpogled v raziskave in uporabo celic raka dojke

Podatki o gojenju celične linije 4T1

Celična linija raka dojke 4T1 ponuja obsežne možnosti za raziskave na biomedicinskem področju. Za gojenje teh celic morate prebrati naslednje ključne točke, ki opisujejo: kaj je čas podvojitve 4T1? Kako se gojijo celice 4T1? Kakšna je gostota posejanja celic za 4T1?

Ključne točke za gojenje celic 4T1

Čas podvojitve:

Povprečni čas podvojitve populacije, ki je bil zabeležen za celice raka dojke 4T1, je 14 ur.

Adhezivne ali v suspenziji:

4T1 je adhezivna celična linija.

Razmerje pri subkultivaciji:

Za celično linijo 4T1 s trojno negativnim rakom dojke se priporoča razmerje delitve 1:6 in 1:8. Za delitev se celice speremo s PBS in inkubiramo z encimom Accutase 8 do 10 minut. Disociirane celice se zbirajo s centrifugiranjem in ponovno suspendirajo v svežem mediju. Resuspendirane celice se razporedijo v novo kolbo za rast.

Gozdno gojišče:

Za gojenje celic 4T1 se uporablja gojišče RPMI 1640. Za idealno rast celic se v gojišče doda 10 % fetalnega govejega seruma (FBS), 2,0 g/l NaHCO3 in 2,1 mM stabilnega glutamina.

Pogoji rasti:

Tumorske celice 4T1 se hranijo v vlažnem inkubatorju pri 37 °C z dovodom 5 % CO₂.

Shranjevanje: 

Celice 4T1 je treba shranjevati pri temperaturi pod -150 °C, npr. v električnem zamrzovalniku ali v plinski fazi tekočega dušika, da se ohrani njihova vitalnost.

Postopek zamrzovanja in medij:

Za celično linijo 4T1 se priporočata CM-1 ali CM-ACF. Priporočljiva je metoda počasnega zamrzovanja, saj ščiti vitalnost celic s postopnim zniževanjem temperature za 1 °C.

Postopek odmrzovanja:

Vialo z zamrznjenimi celicami se nekaj sekund drži v vodni kopeli pri 37 °C, dokler se celice ne odmrznejo in ostane le majhen kepec ledu. Te celice se ponovno suspendirajo v svežem mediju in vlijejo v kolbo za gojenje. Po 24 urah inkubacije se medij zamenja, da se odstranijo sestavine zamrzovalnega medija.

Raven biološke varnosti:

Za gojenje celic raka dojke 4T1 se priporoča laboratorij z ravnjo biološke varnosti 1.

Celična linija T1: prednosti in slabosti

V tem delu članka bomo obravnavali prednosti in slabosti, povezane z metastaznim modelom 4T1.

Prednosti

Glavne prednosti celične linije 4T1 so:

• Tumorigenost:

  4T1 je zelo tumorigenična celična linija. Te celice imajo sposobnost, da ob injiciranju v miško tvorijo singenijski mišji model 4T1 za študijo raka dojke. Zato je model 4T1 idealen za študij razvoja, rasti in metastaziranja tumorja. Poleg tega je uporaben za presejanje in ocenjevanje terapevtskih zdravil.

• In vitro metastazni model:

  Model 4T1 ima naravno nagnjenost k metastaziranju, kar raziskovalcem omogoča učinkovito preučevanje osnovnih mehanizmov in poti, vpletenih v proces metastaziranja. Poleg tega so celice 4T1 odporne na 6-tioguanin. To pomaga pri učinkovitem odkrivanju mikro-metastaznih celic z večjo natančnostjo v primerjavi z drugimi modeli, saj odpravlja potrebo po tehtanju ciljnih organov in štetju vozličkov.

Pomanjkljivosti

Pomanjkljivost, povezana s celično linijo 4T1, je:

• Agresivnost/hitra rast:

  Celična linija 4T1 je zelo agresivna celična linija trojno negativnega raka dojke. Zaradi hitre rasti je uporaba te celične linije v dolgoročnih poskusih in nadzorovanje eksperimentalnih spremenljivk zahtevno.

Nakup celične linije 4T1: visokokakovosten model raka dojke

Celična linija 4T1: Uporaba v raziskavah raka

Celična linija mišjega modela 4T1 je dragoceno raziskovalno orodje za preučevanje biologije raka in ocenjevanje novih načinov zdravljenja. Glavne uporabe celic 4T1 so navedene tukaj:

Biologija raka

Celična linija 4T1 se pogosto uporablja za preučevanje razvoja in rasti raka. Je idealen in vitro model za preučevanje in raziskovanje različnih celičnih in molekularnih mehanizmov, vpletenih v napredovanje tumorja in metastaze. Poleg tega lahko razkrije vlogo celičnih signalnih poti, mikrookolja in genske ekspresije v teh procesih. V raziskavi, izvedeni leta 2019, so z uporabo celic 4T1 odkrili mehanizme, ki poganjajo invazijo in migracijo rakavih celic. Rezultati so pokazali, da so v to vključeni geni STAT3, MMP2 in MMP9, njihovo zaviranje pa lahko znatno omeji migracijo in invazijo rakavih celic [4]. Podobne študije so pokazale tudi več drugih signalnih poti, vpletenih v razvoj tumorja in metastaze.

Poleg tega je model 4T1 ključen za razumevanje mikrookolja raka dojke, vključno z infiltracijo imunskih celic in rastjo primarnega tumorja. Študije, osredotočene na mikrookolje tumorja 4T1, so pokazale pomembne ugotovitve o vlogi imunskih celic in citokinov, kot je izražanje CXCL13, v napredovanju tumorja. Model pomaga tudi pri raziskovanju metastaznih niš in metastaziranja tumorja, zlasti pri raku dojke v pozni fazi, kjer je kolonizacija karcinoma dojke pogosta.

Raziskave na področju zdravljenja raka

Celična linija 4T1 se obširno uporablja v raziskavah zdravljenja raka za presejanje in ocenjevanje novih oblik zdravljenja. Ena od študij je raziskovala citotoksični potencial zelenih sintetiziranih nanodelcev železa iz izvlečka rožmarina (Rosemary-FeNPs) in čistega izvlečka rožmarina na celični liniji 4T1. Rezultati raziskave so pokazali, da so Rosemary-FeNPs obetavnejši od čistega izvlečka [5]. Podobno je študija, izvedena leta 2021, preučevala protitumorski potencial izvlečka ingverja v celicah raka dojke 4T1 in mišjem modelu 4T1 [6].

Poleg naravnih izvlečkov se celična linija 4T1 uporablja za ocenjevanje učinkovitosti tradicionalnih kemoterapevtskih sredstev. Na primer, raziskave, ki vključujejo kombinacijo cisplatina z drugimi terapijami, so pokazale povečano odmiranje tumorskih celic in zmanjšano napredovanje tumorja v modelu 4T1. Uvedba luciferaze svetlikavca v celice 4T1 je omogočila slikanje rasti tumorja in metastatskega fenotipa v realnem času, kar olajšuje oceno učinka različnih zdravljenj.

Poleg tega je odpornost celične linije 4T1 na 6-tioguanin olajšala študije mikro-metastaznih celic, s čimer se je izboljšalo odkrivanje in analiza metastaz. Ta celična linija ima ključno vlogo tudi pri preučevanju protitumorske imunosti in učinkov imunoterapije, zlasti v okviru ortotopskih mišjih modelov, kjer lahko raziskovalci natančno posnemajo človeške rake.

Na splošno ostaja celična linija 4T1 nepogrešljivo orodje v onkoloških raziskavah, od razumevanja temeljnih mehanizmov biologije raka do razvoja in testiranja novih terapevtskih strategij.

Celice 4T1: Raziskovalne publikacije

V tem delu članka bomo obravnavali nekaj zanimivih in najpogosteje citiranih publikacij o celicah 4T1.

Potencialna antiproliferativna aktivnost AgNP, sintetiziranih z uporabo M. longifolia v celični liniji 4T1 prek nastajanja ROS in poškodbe celične membrane

Ta članek je bil objavljen leta 2018 v reviji Journal of Photochemistry and Photobiology. Raziskava je pokazala, da srebrni nanodelci, sintetizirani iz Madhuca longifolia, izvajajo antiproliferativni učinek v tumorskih celicah 4T1 prek razgradnje celične stene in nastajanja ROS.

Citotoksičnost in apoptični učinki verbaskosida na celično linijo raka dojke 4T1

Ta študija, objavljena v reviji BMC Pharmacology and Toxicology (2021), je predlagala, da je verbaskosid, naravna spojina, povzročil apoptične učinke v celicah raka dojke 4T1 prek signalizacije TLR4.

Eupatorin je zaviral napredovanje tumorja in okrepil imunost v mišjem modelu raka dojke 4T1

Ta raziskava je bila objavljena v reviji Integrative Cancer Therapies leta 2020. V tej študiji so uporabili celice 4T1 za razvoj singenega mišjega modela 4T1 in z njim raziskali protirakav potencial eupatorina. Eupatorin je upočasnil razvoj tumorja v mišjem modelu 4T1.

Zaviralni učinek izvlečka Viola odorata na rast tumorja in metastaze v modelu raka dojke 4T1

Ta raziskava, objavljena v reviji Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018), je predlagala, da ima zdravilna rastlina Viola odorata potencialne citotoksične učinke na celice 4T1.

Trdne lipidne nanodelce, obogatene z docetaksalom, preprečujejo rast tumorja in pljučne metastaze celic mišjega karcinoma dojke 4T1

Ta študija je predlagala, da so trdni lipidni nanodelci, obogateni z docetaksalom (DTX-loaded SLNs), lahko obetavno sredstvo za zdravljenje raka dojke in preprečevanje metastaz, saj omejujejo rast raka in pljučne metastaze celic 4T1.

Viri za celično linijo 4T1: protokoli, videi in več

Spodaj je navedenih nekaj virov o celicah 4T1:

• Vodnik po transfekciji 4T1: Ta video je podrobna navodila za izvedbo transfekcije celične linije 4T1.
• Subkultiviranje celične linije: Ta video posnetek pojasnjuje protokol subkultiviranja za adhezivne celične linije.

Naslednja povezava vsebuje protokol za gojenje celic 4T1:

• Celična linija 4T1: Ta povezava do spletne strani vsebuje vse koristne informacije v zvezi z ravnanjem s kulturami 4T1. Vsebuje informacije o gojiščih, protokole ravnanja s krioprezerviranimi kulturami in proliferativnimi kulturami.

Pogosto zastavljena vprašanja o celični liniji 4T1

Viri

1. Pulaski, B.A. in S. Ostrand-Rosenberg, Model mišjega tumorja dojke 4T1. Curr Protoc Immunol, 2001. Poglavje 20: str. Enota 20.2.
2. Maxwell, K.G., Imunomodulacija celic raka dojke za cepljenje celotnega tumorja. 2016.
3. Walker, I. in sod., Tumorji mlečne žleze povzročajo centralno izražanje pro-vnetnih citokinov, vendar ne vedenjskih motenj pri miših Balb/C. Scientific Reports, 2017. 7(1): str. 1–13.
4. Li, Y., et al., Zaviranje signalne poti Stat3 z naravnim produktom pektolinarigeninom zmanjša metastaze raka dojke. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: str. 1195.
5. Farshchi, H.K., et al., Zelena sinteza nanodelcev železa z izvlečkom rožmarina in ocena citotoksičnega učinka na rakave celične linije. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 2018. 16: str. 54–62.
6. Gholizadeh, A.P., et al., Učinek izvlečka ingverja na celično linijo raka dojke 4T1 pri miših Balb/c. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): str. 43–49.