Celice U87MG - raziskave glioblastoma z uporabo celic U87MG in njihov vpliv na študije možganskega raka
U87 MG, primarna celična linija človeškega glioblastoma, se pogosto uporablja v bioloških raziskavah. Te celice se uporabljajo zlasti na področju nevroznanosti in imunoonkologije.
Splošne značilnosti in izvor celične linije U-87 MG
V tem poglavju so opisani izvor in splošne značilnosti celične linije U-87. Izvedeli boste, kaj so celice U-87 MG? Od kod izvirajo celice U87? Kakšna je polna oblika U-87 MG? Kako velike so celice U87? Kakšna je morfologija celične linije U87?
- Celična linija U87 je celična linija glioblastoma in astrocitoma. Vzpostavljena je bila leta 1966 na Univerzi v Uppsali. Celice so bile pridobljene od 44-letnega belopoltega moškega, ki je zbolel za glioblastomom. Ta celična linija se uradno imenuje U 87 MG, kar pomeni Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Celice U 87 MG imajo morfologijo, podobno epitelijskim celicam.
- Velikost celic U 87 MG je od 12 do 14 µm v premeru.
- Ta celična linija človeškega glioblastoma je hipodiploidna in ima modalno število kromosomov 44 v približno 48 % celične populacije. Vendar je v 5,9 % celične populacije tudi več ploidnosti.
Informacije o gojenju celic U-87 MG
Pred delom s celicami U 87 MG se morate seznaniti z naslednjimi ključnimi točkami za gojenje teh celic glioblastoma. Predvsem morate vedeti: Kakšen je čas podvojitve populacije celic U 87 MG? Katera gojišča se uporabljajo za gojenje celic U87? Kakšna je gostota naselitve celične linije U 87 MG?
Ključne točke za gojenje celic U-87 MG
|
Čas podvojitve populacije: |
Čas podvojitve populacije celic U 87 MG je od 18 do 38 ur. |
|
Prilepljene ali v suspenziji: |
U 87 MG je adherentna celična linija. Celice imajo podolgovato obliko in rastejo kot enoplastne. |
|
Gostota naselitve: |
Gostota naselitve: celično linijo glioblastoma U 87 MG je priporočljivo posejati z gostoto celic 1 x104 celic/cm2. Adherentne celice U87 speremo z 1 x PBS in inkubiramo z raztopino Accutase. Nato se disociirane celice centrifugirajo in obnovijo. Celice previdno resuspendiramo in jih dodamo v nove erlenmajerice z rastnim gojiščem. |
|
Rastno gojišče: |
Eagle's minimal essential medium), ki mu je dodano 1,0 g/L L-glukoze, 2,0 mM L-glutamina, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM natrijevega piruvata in 10 % raztopine FBS. Medij je treba obnavljati vsake 2 do 3 dni. |
|
Pogoji za rast: |
Za optimalno rast celic U-87 MG je potreben vlažen inkubator s 5-odstotnim dovajanjem CO2 in temperaturo 37 °C. |
|
Shranjevanje: |
Celice U87 se hranijo v parni fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C, da se ohrani največja vitalnost celic glioblastoma. |
|
Postopek zamrzovanja in medij: |
CM-1 ali CM-ACF so primerni za zamrzovanje celic U 87 MG. Priporoča se počasen postopek zamrzovanja, ki preprečuje šok za celice in ščiti njihovo sposobnost preživetja. |
|
Postopek odtaljevanja: |
Zamrznjene viale s celično linijo U-87 MG odtalimo v vodni kopeli pri 37 °C. Celicam dodamo rastno gojišče, jih ponovno suspendiramo in razporedimo za gojenje v novih bučkah. V nasprotju s tem lahko celice U87 centrifugiramo, da odstranimo zamrzovalni medij in jih nato gojimo. |
|
Raven biološke varnosti: |
Za ravnanje s celičnimi kulturami U 87 MG je potrebna stopnja biološke varnosti 1. |
Prednosti in slabosti celic U-87 MG
Ko pomislimo na celično linijo, se najprej vprašamo, kakšne so prednosti uporabe celic U-87 MG? Katere so slabosti celic U87?
Prednosti
Celične linije U 87 MG se pogosto uporabljajo v raziskavah. Nekaj prednosti, povezanih s to celično linijo, je:
Prednosti
- Enostavno gojenje: U 87 MG celice je enostavno vzdrževati v kulturi. Ne zahtevajo zahtevnega ali zapletenega gojenja celic
- Homogenost: U 87 MG je homogena celična linija. Večina celic v populaciji ima enako genetsko zasnovo in zato podobne lastnosti. Te celice se uporabljajo za preučevanje celičnih procesov, pregledovanje zdravil in testiranje
- Dobro karakterizirane: Ta celična linija glioblastoma je dobro opisana z značilnostmi rasti, morfologijo in izražanjem genov, zato je dragoceno raziskovalno orodje
Slabosti
- Omejena uporabnost: U 87 MG je glioblastomska celična linija, zato je njena uporaba omejena predvsem na preučevanje glioblastomov in molekularnih mehanizmov, na katerih temelji. Morda ni primerna za raziskovanje drugih vrst raka.
Raziskovalne aplikacije s celicami U-87 MG
Glioblastomska celična linija U87MG se pogosto uporablja v študijah raka, zlasti v raziskavah glioblastoma. Nekatere raziskovalne aplikacije celic U 87 MG so:
- Raziskave na področju biologije raka: Celična linija U87 se uporablja za preučevanje rasti in razvoja raka, osnovnih molekularnih mehanizmov, signalnih poti in tumorskega mikrookolja. V študiji, objavljeni leta 2020, je bil model glioblastoma in vitro, celična linija U 87 MG, uporabljen za raziskovanje gena BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) kot terapevtske tarče. Ugotovitve so pokazale, da gen BMAL1 zavira proliferacijo, migracijo in invazijo celic glioblastoma z zaviranjem izražanja genov ciklin B1, metaloproteinaze-9 in fosfo-AKT [1]. V drugi raziskavi, izvedeni leta 2019, so uporabili celično linijo U87 in raziskali, da lahko znižano izražanje transkripcijskega faktorja LITAF (Lipopolysaccharide-induced tumor necrosis factor-alpha factor) poveča radiosenzitivnost celic glioma prek regulacije poti FOXO-1. LITAF je znan tudi kot gen 7, ki ga povzroča p53 (PIG7) [2].
- Odkrivanje in razvoj zdravil: Celice U-87 MG se lahko uporabljajo za presejanje in testiranje zdravil, kar raziskovalcem omogoča identifikacijo novih potencialnih zdravil proti raku ter oceno njihove učinkovitosti in toksičnosti. V raziskavi so uporabili celično linijo glioblastoma U 87 MG za oceno protirakavega in antioksidativnega potenciala antioksidativnega in protirakavega delovanja izvlečka Inula helenium (L.) [3]. Podobno je v drugi publikaciji omenjena uporaba celične linije U87 za testiranje citotoksičnega in apoptotičnega učinka rastlinskih izvlečkov [4]. Poleg tega je raziskava, objavljena leta 2018, preučevala citotoksični učinek seskviterpenskih alkaloidov, pridobljenih iz rastlin Nuphar, na občutljive in na zdravila odporne celične linije U 87 MG [5].
Naročite svojo celično linijo glioma U87 MG še danes
Celična linija U-87 MG: Raziskovalne publikacije
Tukaj je nekaj pomembnih raziskovalnih publikacij, ki vključujejo celično linijo U-87 MG.
V tem članku, objavljenem v reviji Neuroreport 2018, je bilo predlagano, da lahko hipoksija poveča migracijo in invazijo celic človeškega glioblastoma z uravnavanjem signalne poti PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Ta študija je bila objavljena v reviji Frontiers in Pharmacology leta 2020. Ugotovitve raziskave navajajo, da flavonoid Eriodictyol deluje protirakavo na celično linijo U87 ter zavira proliferacijo in metastaziranje celic. Spojina posreduje svoje protitumorske lastnosti z modulacijo poti PI3K/Akt/NF-κB.
Ta raziskava v reviji Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) kaže, da lahko kitajska zeliščna formula Xihuang pill povzroči apoptozo v celicah U87 z usmerjanjem na kaskado Akt/mTOR/FOXO1, ki jo aktivira ROS.
LITAF poveča radiosenzitivnost celic človeškega glioma prek poti FoxO1
Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji Cellular and Molecular Neurobiology leta 2019. V študiji je bilo predlagano, da transkripcijski faktor LITAF z uravnavanjem signalne poti FOXO-1 zmanjšuje in povečuje radiosenzitivnost celic glioma.
Članek je bil objavljen v reviji Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Raziskovalci so za raziskavo citotoksičnega učinka nanodelcev PLGA, naloženih s kurkuminom, uporabili celice U 87 MG.
Viri za celice U 87 MG: Roki: protokoli, videoposnetki in drugo
Celično linijo glioblastoma U87MG uporabljajo v številnih laboratorijih za raziskave raka. Nekaj virov, ki vključujejo to celično linijo, je:
- Transfekcija celične linije U87: V tem dokumentu je opisan protokol transfekcije celic U 87 MG.
- Transfekcija celične linije U 87 MG: V tem videoposnetku je po korakih razložen protokol transfekcije celic U87.
Vir za protokol celične kulture celic U87 je naveden spodaj:
- U87 MG celice: Ta povezava vsebuje osnovne informacije o celični liniji U 87 MG. Vključuje kratke protokole delitve, zamrzovanja in odmrzovanja celic.
Vpogled v raziskave glioma U87 MG: Pogosto zastavljena vprašanja
Reference
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 zavira proliferacijo, migracijo in invazijo celic U87MG z zniževanjem regulacije ciklina B1, fosfo-AKT in metaloproteinaze-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF Enhances Radiosensitivity of Human Glioma Cells via the FoxO1 Pathway. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., antioxidant and anticancer activities of extract of Inula helenium (L.) in human U-87 MG glioblastoma cell line. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh in A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoxicity of sesquiterpene alkaloids from Nuphar plants towards sensitive and drug-resistant cell lines (Citotoksičnost seskviterpenskih alkaloidov iz rastline Nuphar do občutljivih in na zdravila odpornih celičnih linij ). Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.