Celična linija T98G
CeliceT98G so celična linija človeškega glioblastoma, ki se običajno uporablja v biomedicinskih raziskavah. Zlasti se te celice uporabljajo v študijah možganskega raka za raziskovanje ključnih celic in molekularnih dejavnikov, ki prispevajo k nastanku tega raka. Poleg tega raziskovalcem pomagajo pri pregledovanju in testiranju novih zdravil proti raku, ki lahko pomagajo pri razvoju zdravil.
Ta članek vključuje vse bistvene podrobnosti o celični liniji T98G, ki jih boste potrebovali pred začetkom dela z njo, kot so
- Splošne značilnosti in izvor celične linije T98G
- Informacije o gojenju celične linije T98G
- Celična linija T98G: Prednosti in slabosti
- Uporaba celic T98G
- Raziskovalne publikacije s celicami T98G
- Viri za celice T98G: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo
1. Splošne značilnosti in izvor celične linije T98G
Ta del članka vam bo pomagal raziskati osnovne značilnosti celične linije T98G. Vključuje izvor celične linije, morfologijo, velikost in informacije o ploidnosti. Poleg tega bo izčrpno razumel naslednje poizvedbe: Kaj so celice T98G? Katera vrsta celic je T98G? Od kod izvira T98G? Kakšne so značilnosti celične linije T98G? Kaj je celična linija glioblastoma T98G U87?
- Celično linijo T98G je ustvaril GH Stein. Sestavljajo jo fibroblastom podobne celice, ki so bile pridobljene iz možganskega tkiva 61-letnega kavkaškega moškega z multiformnim glioblastomom [1].
- Celice T98G so netumorogene; ob injiciranju v gole miši ne povzročajo tumorjev. Vendar pa se ob primerni zasidranosti v celični kulturi običajno razmnožujejo.
- Te celice imajo morfologijo, podobno fibroblastnim celicam.
- Glioblastomska celična linija T98G je hiperpentaploidna. Modalno število kromosomov se giblje med 128 in 132. Višje ploidije so lahko prisotne pri 1,39 % celične populacije.
T98 proti T98G
Obe sta celični liniji človeškega glioblastoma in imata podoben izvor. Edina razlika med tema celičnima linijama je število kromosomov. T98G ima skoraj dvakrat več kromosomov kot T98. Zato je T98G znana kot poliploidna različica T98.
T98G proti U87
U87 in T98G sta celični liniji človeškega glioblastoma, ki se uporabljata pri raziskavah možganskega raka. U87 ima agresivnejši fenotip v primerjavi z GBM T98G.
2. Informacije o gojenju celične linije T98G
Informacije o gojenju celične linije je treba poznati, preden začnete z njo delati. To vam bo pomagalo, da boste v laboratoriju lažje in udobneje ravnali s celično linijo. Vedeti morate: Kolikšen je čas podvojitve za celično linijo T98G? Katero gojišče je najboljše za celice T98G? Kakšne so značilnosti rasti T98G? Kakšna je gostota naselitve celic T98G? Kako zamrznete celice T98G?
Ključne točke za gojenje celic T98G
|
Čas podvojitve: |
Približni čas podvojitve celic T98G je 40 ur. Odvisno od pogojev gojenja se lahko spreminja. |
|
Prilepljene ali v suspenziji: |
Celice T98G so adherentne. Pritrdijo se na dno posod za gojenje in tvorijo enovrstne plasti. |
|
Razmerje delitve: |
Celice T98G se gojijo v razmerju 1:2 do 1:5. V ta namen celice najprej speremo z 1 X pufrom PBS, nato pa jih 8 do 10 minut pri sobni temperaturi inkubiramo z raztopino za pasažiranje (Accutase). Po inkubaciji ločene celice dodamo v sveže rastno gojišče in centrifugiramo. Nato zbrano celično peleto previdno resuspendiramo in celice razporedimo v bučko z rastnim gojiščem. |
|
Rastno gojišče: |
Za gojenje celic T98G se uporablja gojišče EMEM, ki vsebuje 10 % fetalnega govejega seruma, 2 mM L-glutamina, 2,2 g/L NaHCO3 in EBSS. Medij je treba zamenjati 3- do 4-krat na teden. |
|
Pogoji rasti: |
Celice T98G vzdržujemo v vlažnem inkubatorju, nastavljenem na 37 °C in priključenem na dovod CO2. |
|
Shranjevanje: |
Zamrznjene celice lahko shranjujemo pri temperaturi pod -150 °C ali v parni fazi tekočega dušika, da dolgoročno zaščitimo njihovo sposobnost preživetja. |
|
Postopek zamrzovanja in medij: |
Celice T98G je priporočljivo zamrzniti v mediju za zamrzovanje celic CM-1 ali CM-ACF. Pri tem se predlaga počasen postopek zamrzovanja, ki omogoča znižanje temperature le za 1 °C na minuto. To preprečuje šok za celice in ohranja njihovo sposobnost preživetja. |
|
Postopek odtaljevanja: |
Zamrznjene celice nežno odmrznemo tako, da jih za 40 do 60 sekund postavimo v predhodno ogreto vodno kopel pri 37 stopinjah Celzija. Nato jih ponovno suspendiramo v svežem gojišču in prenesemo v novo erlenmajerico. Po 24 urah inkubacije se gojišče zamenja, da se odstranijo sestavine zamrzovalnega gojišča. |
|
Raven biološke varnosti: |
T98G kulture se vzdržujejo v laboratoriju z biološko varnostjo 1. |
3. Celična linija T98G: Prednosti in slabosti
T98G je pogosto uporabljena celična linija glioblastoma, pridobljena iz človeških celic. Ima več prednosti in slabosti, po katerih se razlikuje od drugih. V tem poglavju članka je obravnavanih nekaj pomembnih.
Prednosti
Prednosti celic T98G so:
-
Dobro karakterizirane
Dobro uveljavljena in dobro opisana celična linija. Obsežno preučena in dokumentirana v literaturi.
-
In vitro model
Predstavlja značilnosti glioblastoma, najbolj agresivnega možganskega tumorja. Dragoceno orodje za raziskovanje bolezni, razumevanje biologije in razvoj zdravljenja.
Slabosti
Slabosti celic T98G so:
-
Heterogenost
Genetska heterogenost v populaciji celic T98G lahko povzroči nedoslednost pri eksperimentalnih rezultatih in oteži razlago podatkov.
4. Uporaba celic T98G
Celična linija T98G je dragoceno orodje, ki se uporablja pri raziskavah raka. Tukaj je navedenih nekaj glavnih raziskovalnih aplikacij celic T98G:
- Raziskave raka: Celična linija T98G je dragoceno orodje za raziskovanje biologije glioblastomskih tumorjev. Te celice se uporabljajo predvsem za preučevanje zapletenih molekularnih poti, na katerih temelji razvoj in napredovanje bolezni glioblastoma. Poleg tega se uporabljajo za ugotavljanje genetskih mutacij, ki spodbujajo rast tumorjev, in drugih mehanizmov rakavih celic. Yang Chen in sodelavci so delali na teh celicah in ugotovili, da prekomerna ekspresija miRNA-21 zmanjša raven PDCD4 (programirani protein celične smrti 4) v celicah T98G. To vodi v zaviranje apoptoze celic T98G, ki jo posreduje PDCD4. Študija tako kaže, da je miRNA-21 potencialna tarča za razvoj terapij [2]. Podobno kot v tej študiji je Fanqiang Kong s sodelavci preučeval vlogo mikroRNA-15a pri proliferaciji in invaziji celic glioblastoma T98G. Ugotovili so, da miRNA-15a-5p spodbuja te celične procese s ciljenjem na celično adhezijsko molekulo 1 (CADM1) [3].
- Testiranje zdravil in terapevtski razvoj: T98G je odličen in vitro model glioblastoma za testiranje novih zdravil in zagotavlja platformo za oceno učinkovitosti potencialnih terapij raka. Raziskovalci testirajo tudi različne spojine in terapije, da bi opredelili in odkrili kandidate za zdravila z najbolj obetavnimi lastnostmi proti glioblastomu. To vodi k razvoju novih zdravil in strategij zdravljenja, kar daje upanje bolnikom z glioblastomom. V takšni študiji so preučevali protirakavi potencial naravne spojine, imenovane korilagin, v celični liniji GBM T98G, odporni na temozolomid. Ugotovitve študije predlagajo, da korilagin v kombinaciji s temozolomidom v celicah povzroči višje stopnje antiproliferativnega in antipoptotičnega delovanja [4].
5. Raziskovalne publikacije s celicami T98G
V nadaljevanju je predstavljenih nekaj zanimivih in pogosto citiranih raziskovalnih publikacij o celični liniji glioblastoma T98G.
Kemoterapevtski učinek SR9009, agonista REV-ERB, na celice človeškega glioblastoma T98G
V tej publikaciji v reviji ASN Neuro (2019) je bil raziskan protirakavi učinek agonista REV-ERB, imenovanega SR9009, na celice glioblastoma T98G.
V tem raziskovalnem članku v reviji Neurochemical research (2019) je bilo predlagano, da natrijev butirat in kvercetin sinergistično zavirata zaščitno avtofagijo v celicah T98G in povečata apoptozo celic.
V tej študiji v reviji Genes (2023) je bilo pri celični liniji T98G, prilagojeni hipoksiji, opravljeno sekvenciranje RNA in kot obetavna terapevtska tarča je bil predlagan encim IRE1 (Inositol-requiring enzyme 1).
Članek je bil objavljen v reviji Oncology Letters (2017). V študiji je bilo raziskano, da miRNA-548c-3p cilja na onkogene T98G (c-Myb) in tako zavira proliferacijo in migracijo celic T98G.
V članku v reviji Journal of Medicinal Plants Research (2011) je bilo predlagano, da kloroformni ekstrakt Dracocephalum tanguticum deluje antiproliferativno na celice T98G z modulacijo genov kaspaza-3, Bax in P21.
6. Viri za celice T98G: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo
Tukaj so navedeni razpoložljivi viri, ki vključujejo protokole za gojenje in transfekcijo celic T98G.
- Transfekcija celic T98G: Ta raziskovalni članek vsebuje protokol za transfekcijo celic T98G. Na kratko pojasnjuje metodo in potrebne reagente.
Naslednje povezave vam bodo v veliko pomoč pri učenju protokola za gojenje celic T98G in vam olajšajo delo z njim.
- Celice T98G: Ta spletna stran vsebuje ključne informacije o protokolih za gojenje celic T98G, vključno s subkultiviranjem in ravnanjem s proliferativnimi in kriokonzerviranimi kulturami. Poleg tega vam bo pomagala spoznati tudi medije za rast celic, pogoje in čas podvojitve.
Reference
- Haehl, E., Endotelijskih celic povzročena radiorezistenca pri glioblastomu. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al., MicroRNA-21 down-regulates the expression of tumor suppressor PDCD4 in human glioblastoma cell T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
- Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5pspodbuja proliferacijo in invazijo celic glioblastoma T98G prek ciljne celične adhezijske molekule 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
- Milani, R., et al., Corilagin inducira visoke stopnje apoptoze v celični liniji glioma T98G, odporni na temozolomid. Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.