Celice SiHa - osvetlitev raziskav raka materničnega vratu

CeliceSiHa so celice raka materničnega vratu, ki se pogosto uporabljajo v biomedicinskih raziskavah. So odlične gostiteljice za transfekcijo, zato so primerne za študije izražanja genov. Zaradi človeškega izvora in pomena za raka materničnega vratu se te celice uporabljajo predvsem v študijah biologije raka, virologije in razvoja zdravil.

Splošne značilnosti in izvor celic SiHa

Razumevanje izvora in splošnih lastnosti celične linije je ključnega pomena, saj vpliva na njeno uporabo v vaših raziskavah. V tem delu članka boste izvedeli več o izvoru celične linije SiHa, značilnih lastnostih in še veliko več: Kaj je celična linija za raka SiHa? Kaj so celice SiHa HPV? Kakšen je izvor celične linije SiHa? Kakšna je morfologija celic SiHa?

  • Celična linija raka materničnega vratu SiHa je bila pridobljena iz fragmentov primarne biopsije maternice azijske ženske (55-letnice) s ploščatoceličnim rakom [1].
  • Celična linija SiHa ima hipertriploidni kariotip. Večina celic ima povprečno število kromosomov med 69 in 72. Vendar ima približno 24 % celic modalno število kromosomov 71.
  • Celice SiHa so pozitivne na humani papiloma virus 16. Imajo integracijo približno 1 do 2 kopij genoma HPV na celico [2].
  • Te celice raka materničnega vratu imajo epitelijsko morfologijo.

Delitev celic raka materničnega vratu HeLa pod mikroskopom.

Celična linija SiHa: Informacije o gojenju

Vzdrževanje kulture celične linije ni enostavno, dokler ne poznate vseh ključnih točk za njeno gojenje. Vedeti morate: Kakšen je čas podvojitve linije SiHa? Kaj je celično gojišče SiHa? Kako gojite celično linijo SiHa?

Ključne točke za gojenje celic SiHa

Čas podvojitve:

Čas podvojitve celic SiHa je približno 17 ur.

Prilepljene ali v suspenziji:

SiHa je adherentna celična linija.

Razmerje subkultiviranja:

Razmerje subkultivacije za celice SiHa je od 1:2 do 1:4. Za prehod se adherentne celice sperejo s 1x PBS. Dodamo raztopino akutase in celice inkubiramo 8 do 10 minut pri sobni temperaturi. Nato se doda gojišče in celice se centrifugirajo. Celični pelet se resuspendira in celice se prelijejo v novo bučko za gojenje.

Rastno gojišče:

Za idealno rast celic SiHa se uporablja Eaglovo minimalno esencialno gojišče (EMEM), ki vsebuje 10 % FBS, 2 mM L-glutamina, 2,2 g/L NaHCO3 in Earleovo uravnoteženo solno raztopino (EBSS). Medij se zamenja 2 do 3-krat na teden.

Pogoji rasti:

Celice SiHa vzdržujemo v vlažnem inkubatorju pri 37 °C s 5-odstotnim dovajanjem CO2.

Shranjevanje:

Zamrznjene viale s celično linijo raka materničnega vratu SiHa se dlje časa shranjujejo pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku ali v parni fazi tekočega dušika.

Postopek zamrzovanja in medij:

Za zamrzovanje celic SiHa se uporablja gojišče za zamrzovanje CM-1 ali CM-ACF. Celice se zamrznejo z metodo počasnega zamrzovanja, ki omogoča znižanje temperature le za 1 °C na minuto, da se zaščiti vitalnost celic.

Postopek odtaljevanja:

Zamrznjene celice hranimo 40 do 60 sekund v vodni kopeli pri 37 °C, dokler ne ostane majhen ledeni skupek. Nato dodamo sveže gojišče in celice centrifugiramo, da odstranimo sestavine gojišča za zamrzovanje. Celični pelet ponovno suspendiramo in celice razporedimo v bučko za gojenje.

Raven biološke varnosti:

Za ravnanje s celičnimi kulturami SiHa in njihovo vzdrževanje je potreben laboratorij 1. stopnje biološke varnosti.

Prilepljena plast celic SiHa pri 10-kratni in 20-kratni povečavi.

Prednosti in slabosti celične linije SiHa

Tako kot druge celične linije človeškega karcinoma ima tudi linija SiHa nekatere posebne značilnosti, povezane z določenimi prednostmi in pomanjkljivostmi. V nadaljevanju smo obravnavali nekaj pomembnih.

Prednosti celične linije raka materničnega vratu SiHa

  • Model raka materničnega vratu
    • Izvira iz ploščatoceličnega karcinoma materničnega vratu.
    • Uporablja se za preučevanje mehanizmov, rasti in razvoja raka materničnega vratu.
    • Izraža gena p53+ in pRB+, ki sta povezana s popravljanjem DNK, uravnavanjem celičnega cikla in zatiranjem tumorjev.
  • Tumorigen potencial
    • Celice SiHa so tumorogene in lahko pri golih miših povzročijo slabo diferencirane epidermoidne tumorje III. stopnje.
    • Uporabljajo se za raziskave raka in vivo in testiranje protirakavih zdravil.

Slabosti celic SiHa

  • Stopnja razmnoževanja
    • Celice SiHa se hitro razmnožujejo, kar vodi v prekomerno rast.
    • Potrebno je pogosto presajanje, kar povečuje tveganje genetske nestabilnosti, ki lahko sčasoma vpliva na obnašanje celic.

Raziskovalna uporaba celic SiHa

Celična linija SiHa se pogosto uporablja pri raziskavah raka materničnega vratu. Tukaj je obravnavanih nekaj specifičnih aplikacij te celične linije.

  • Študije, povezane s človeškim papilomavirusom (HPV): Zato so celice SiHa HPV 16 pozitivne in so dragocene enote za preučevanje okužbe s človeškim papilomavirusom, njegovih molekularnih mehanizmov ter njegove vloge pri razvoju in napredovanju raka materničnega vratu. Raziskovalci te celice uporabljajo tudi za preučevanje virusne replikacije, integracije in njenega vpliva na procese v gostiteljskih celicah. V študiji, izvedeni leta 2020, je bila celična linija SiHa uporabljena za preučevanje vloge onkoproteinov HPV E6/E7 pri razvoju raka materničnega vratu, in sicer z usmerjanjem s tehnologijo CRISPR. Ugotovitve so pokazale, da je izločitev genov E6/E7 povzročila zaviranje rasti in apoptozo celic SiHa. Zato lahko ti virusni geni služijo kot ključne tarče zdravil za razvoj terapij proti raku materničnega vratu, povezanim s HPV [3].
  • Biologija raka: Celice SiHa so neprecenljiv model za preučevanje biologije raka materničnega vratu, vključno z razvojem, napredovanjem, metastazami in invazijo. Raziskovalci te celice uporabljajo za raziskovanje genetskih mutacij in osnovnih molekularnih poti, ki prispevajo k razvoju in rasti raka materničnega vratu, na primer v študiji, v kateri so uporabili celice SiHa in ugotovili, da regulirana SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) spodbuja proliferacijo celic raka materničnega vratu z aktivacijo kaskade MAPK [4].
  • Pregledovanje in testiranje zdravil: SiHa je pogosto uporabljena linija raka materničnega vratu za oceno učinkovitosti potencialnih zdravil proti raku, specifičnih za rak materničnega vratu, povezan s HPV. Raziskovalci z uporabo teh celic preučujejo antiproliferativni, apoptotični in antimetastatični potencial zdravil. Kot na primer študija, izvedena leta 2019, ki je preučevala citotoksični potencial izvlečkov plodov Vatica diospyroides Symington Type SS na celični liniji raka materničnega vratu SiHa [5].

Celice SiHa za vaše raziskave!

Raziskovalne publikacije s celicami SiHa

V nekaterih pomembnih in pogosto citiranih raziskovalnih publikacijah je uporabljena celična linija SiHa za cervikalni skvamozni karcinom.

Protitumorski učinek aloe-emodina na celice raka materničnega vratu je povezan s človeškim papiloma virusom E6/E7 in presnovo glukoze

V tej objavi v reviji OncoTargets and Therapy (2019) je bilo predlagano, da naravna spojina aloe-emodin v celicah raka materničnega vratu SiHa izvaja apoptotične učinke, povezane s HPV E6/E7 in presnovo glukoze.

Ocena protirakavega potenciala izvlečka listov Excoecaria agallocha (L.) na celični liniji človeškega raka materničnega vratu (SiHa) in ocena osnovnega mehanizma delovanja

Ta članek je bil objavljen v reviji Future Journal of Pharmaceutical Sciences leta 2022. V tej študiji je bilo raziskano protitumorsko delovanje izvlečka listov rastline Excoecaria agallocha (L.) na celični liniji raka materničnega vratu SiHa.

Antiproliferativni učinek 1, 10-fenantrolina v povezavi s sulfatnimi nanodelci ZnO v celični liniji raka materničnega vratu SiHa

Ta študija, objavljena v reviji Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022), predlaga, da molekula 1, 10-fenantrolina po spojitvi z nanodelci cinkovega sulfata pomembno antiproliferativno deluje na celice SiHa.

Astragalozid IV zavira invazijo in metastaziranje celic raka materničnega vratu SiHa prek poti PI3K in MAPK, ki jih posreduje TGF-β1

Ta raziskava je bila objavljena v reviji Oncology Reports leta 2019. Raziskava je pokazala, da Astragalozid IV, naravni proizvod, zavira migracijo in invazijo celic SiHa z modulacijo signalnih poti PI3K in MAPK, ki jih posredujeta TGF-β1.

IFI16 spodbuja napredovanje raka materničnega vratu z regulacijo PD-L1 v imunomikrookolju prek poti STING-TBK1-NF-kB

Ta študija v reviji Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) je pokazala, da IFI16 (interferon-gamma inducibilni protein 16) uravnava gen PD-L1 z aktivacijo poti STING-TBK1-NF-kB, kar spodbuja rast celic raka materničnega vratu SiHa.

Viri za celično linijo SiHa: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo

Tukaj je nekaj spletnih virov, ki vključujejo celice SiHa.

  • Transfekcija celic SiHa: Ta raziskovalni članek vsebuje protokol za vzdrževanje celic raka materničnega vratu SiHa in za transfekcijo celic SiHa.

Naslednja povezava vsebuje informacije o celičnih kulturah za celice SiHa.

  • Celična linija SiHa: Ta spletna stran vsebuje veliko dragocenih podatkov o celični liniji SiHa. To vključuje informacije o rastnih medijih, pogojih gojenja, protokolih za subkultiviranje celic SiHa ter ravnanju z njenimi proliferacijskimi in kriokonzerviranimi kulturami.

Pogosta vprašanja za celice karcinoma materničnega vratu SiHa

Reference

  1. Melzer, C., J. von der Ohe, in R. Hass, Kratek pregled: križanje mezenhimske strome/stem podobnih celic z rakavimi celicami zagotavlja terapevtski potencial. Stem cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
  2. Ostrowska, K.M., et al., Raziskovanje vpliva visokorizičnega človeškega papiloma virusa na biokemično sestavo celic raka materničnega vratu z uporabo vibracijske spektroskopije. Analitik, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
  3. Chen, Y., et al., In vitro and in vivo growth inhibition of human cervical cancer cells via human papillomavirus E6/E7 mRNAs' cleavage by CRISPR/Cas13a system (In vitro in in vivo inhibicija rasti celic človeškega raka materničnega vratu s pomočjo sistema CRISPR/Cas13a). Antivirusne raziskave, 2020. 178: p. 104794.
  4. Fan, Y., et al., SEC61G spodbuja proliferacijo raka materničnega vratu z aktiviranjem signalne poti MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
  5. Chothiphirat, A., et al., Anticancer potential of fruit extracts from Vatica diospyroides symington type SS and their effect on program cell death of cervical cancer cell lines (Protirakavi potencial izvlečkov plodov iz Vatica diospyroides symington tipa SS in njihov vpliv na programsko celično smrt celic raka materničnega vratu ). The Scientific World Journal, 2019. 2019.

Ugotovili smo, da ste v drugi državi ali uporabljate drug jezik brskalnika, kot je trenutno izbran. Ali želite sprejeti predlagane nastavitve?

Zapri