Celice RBL-2H3 - pomen celic RBL-2H3 v alergijskem odzivu in imunoloških študijah

Celična linija RBL-2H3 je bazofilna levkemična celična linija podganjega izvora, ki se uporablja v imunoloških raziskavah. Uporablja se kot modelni sistem za preučevanje fiziologije, obnašanja in delovanja mastocitov. Te celice se uporabljajo tudi za preučevanje alergijskih reakcij, imunoloških procesov ter testiranje in razvoj zdravil.

Članek vsebuje vpogled v izvor RBL-2H3, splošne lastnosti, zahteve za gojenje in uporabo v raziskavah.

Celice RBL-2H3: Izvor in splošne značilnosti

Preden v svojih raziskavah uporabite bazofilsko celično linijo, morate poznati njeno poreklo in splošne lastnosti. V tem poglavju članka boste izvedeli več o osnovah celic RBL-2H3. Na primer: Kaj so mastociti RBL-2H3? Zakaj uporabljati celice RBL-2H3? Kaj so celice RBL-2H3 pri bazofilni levkemiji podgan? Kakšna je morfologija celic RBL-2H3? Ali so celice RBL-2H3 nesmrtne?

RBL-2H3 so celice bazofilne levkemije, pridobljene iz bazofilnih celic podgan Wistar leta 1978 v laboratoriju za imunologijo Nacionalnega inštituta za stomatološke raziskave.
Celice RBL-2H3 imajo receptorsko tirozin kinazo c-kit in receptorje za proteazo mastocitov II (RMCP-II), zato so potencialni model mastocitov. Zato jih običajno imenujemo mastociti, čeprav izvirajo iz podganjega bazofila [1].
Ob aktivaciji sproščajo histamin in druge mediatorje ter izražajo visoko afinitetne receptorje za IgE.
Celice RBL-2H3 imajo fibroblastom podobno morfologijo.

Mikroskopska vizualizacija mastocitov.

Celice RBL-2H3: Informacije o gojenju

V tem razdelku boste spoznali nekaj ključnih vidikov gojenja celične linije RBL-2H3. Spoznali boste: Kaj je čas podvojitve celic RBL-2H3? Kakšna je gostota naselitve celic RBL-2H3? Kakšen je protokol gojenja celic RBL-2H3? Kaj je medij za zamrzovanje celične linije RBL-2H3?

Ključne točke za gojenje celic RBL-2H3

Čas podvojitve populacije:	RBL-2H3 mastocitov se podvoji v približno 50-60 urah.
Prilepljene ali v suspenziji:	RBL-2H3 je adherentna celična linija.
Razmerje subkultiviranja:	Pri celicah RBL-2H3 je razmerje delitve med 1:2 in 1:4. Adherentne celice se sperejo z 1 x raztopino PBS brez magnezija in kalcija. Dodamo raztopino za prehod Accutase in celice 10 minut hranimo pri sobni temperaturi, da se odlepijo od dna posode za gojenje. Dodamo sveže gojišče in celice centrifugiramo. Zbrane celice se previdno resuspendirajo v svežem gojišču in prelijejo v nove bučke z rastnim gojiščem.
Rastno gojišče:	Za gojenje celic RBL-2H3 se uporablja gojišče EMEM, ki vsebuje 10 % FBS, 2 mM L-glutamina, 2,2 g/L NaHCO3 in sol EBSS. Medij je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.
Pogoji rasti:	Celice RBL-2H3 se gojijo v vlažnem inkubatorju, ki je nastavljen na temperaturo 37 °C in priključen na 5-odstotni vir_CO2.
Shranjevanje:	Celice shranjujemo v parni fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku, da dolgoročno zaščitimo njihovo vitalnost.
Postopek zamrzovanja in medij:	Za zamrzovanje celic RBL-2H3 se uporablja CM-1 ali CM-ACF medij za zamrzovanje s počasnim postopkom zamrzovanja. Na kratko, ta metoda omogoča znižanje temperature za 1 °C na minuto in ščiti celice pred šokom.
Postopek odtaljevanja:	Celice RBL-2H3 odmrzujemo v vnaprej nastavljeni vodni kopeli (37 °C) približno 60 sekund. Nato celice dodamo v sveže gojišče in centrifugiramo. Ta korak je bistven za odstranitev sestavin zamrzovalnega medija. Nato se celični pelet ponovno suspendira v rastnem gojišču in celice se razporedijo v bučko za gojenje.
Raven biološke varnosti:	Celice RBL-2H3 je treba hraniti v laboratorijih biološke varnosti 1.

Adherentni monosloji celic RBL-2H3 pri različni konfluenci 20- in 10-kratna povečava.

Prednosti in omejitve celične linije RBL-2H3 bazofilov

Celice RBL-2H3 se pogosto uporabljajo v imunoloških raziskavah. V tem razdelku so opisane njihove glavne prednosti in omejitve.

Prednosti

Enostavno gojenje: Celice RBL-2H3 je mogoče enostavno gojiti in vzdrževati v laboratorijskem okolju. To omogoča stroškovno učinkovito in ponovljivo eksperimentiranje, zato so priljubljena izbira za začetne študije v imunologiji.

Omejitve

Ni človeškega izvora: RBL-2H3 izvirajo iz podganjega bazofila, zato morda ne posnemajo natančno človeških bioloških procesov, kar lahko omeji njihovo uporabnost v raziskovalnih študijah na ljudeh. Zato je pri ekstrapolaciji rezultatov na človeške sisteme potrebna previdna razlaga podatkov.
Poenostavljen model mastocitov: Te celice so sicer osnovni model za preučevanje delovanja mastocitov, vendar ne predstavljajo v celoti kompleksne narave interakcij mastocitov v človeškem imunskem sistemu. Zato morda ne bodo ustrezno modelirali večplastnih vlog mastocitov v imunskih odzivih ali bolezenskih stanjih in vivo.

Celična linija RBL-2H3: RBLH: temeljni kamen v imunoloških raziskavah

Raziskave bazofilov in mastocitov z uporabo celične linije RBL-2H3

Celična linija RBL-2H3, pridobljena iz Rattus norvegicus, je ključni model za preučevanje biologije bazofilov in mastocitov. Te podganje mastociti omogočajo bistven vpogled v sproščanje mediatorjev mastocitov, kar je ključno za razumevanje alergijskih stanj, kot je alergijski rinitis. S pomočjo teh celic raziskovalci raziskujejo dinamiko celičnih receptorjev in vzpostavljanje imunoloških sinaps, ki so osrednjega pomena za odziv imunskega sistema na alergene. zanimiva študija, objavljena leta 2019, je uporabila celično linijo RBL-2H3 in raziskovala mehanizme v ozadju psevdoalergijskih reakcij, povzročenih z injiciranjem Qingkailing. Študija je pokazala, da signalna kaskada PI3K-RAC1 delno izzove ta alergijski odziv v celicah [2]

Dinamika imunoloških sinaps v raziskavah alergije

Celice RBL-2H3, ki se pogosto uporabljajo v imunoloških raziskavah, so še posebej učinkovite za raziskovanje dinamike imunoloških sinaps. To pomaga pri pojasnjevanju komunikacijskih procesov imunskega sistema, kar se uporablja pri preučevanju mastocitov periferne krvi in peritonealnih mastocitov. Takšne raziskave so bistvenega pomena za celovito razumevanje imunskega odziva v sistemskem in lokalnem kontekstu

Preverjanje zdravil in testiranje toksičnosti

Pri preverjanju in testiranju zdravil se izkorišča odzivnost celic RBL na različne dražljaje, vključno s preučevanjem, kako H2O2 zavira odzive, posredovane z IgE. Te celice imajo bistveno vlogo pri razvoju zdravljenja bolezni, kot so streptokokne okužbe, pri katerih streptokoki skupine mitis zavirajo aktivacijo mastocitov. Poleg tega raziskovalci s tem modelom RBL 2H3 mc ocenjujejo toksične učinke različnih snovi, vključno s kemikalijami, zdravili in nanodelci. Tako je bila v nedavni študiji (2022) ocenjena citotoksičnost polistirenske mikroplastike na celice RBL 2H3. Ugotovili so, da mikroplastika poškoduje celične organele RBL-2H3 in spodbuja celično smrt [3]. V drugi študiji iz leta 2021 so ocenili protialergijski in protivnetni potencial naravnega proizvoda, neferina, z uporabo modela mc RBL 2H3. Študija je pokazala dobre protialergijske in protivnetne lastnosti spojine [4]

Napredne metodologije pri imunoloških meritvah

Zaradi doslednega in merljivega sproščanja mediatorjev iz celic RBL 2H3 so te idealne za priročno fluorimetrijo, ki omogoča natančne in precizne meritve, ključne za študij bolezni in oceno terapevtskih sredstev.

Celična linija RBL-2H3, ki izvira iz vrste Rattus norvegicus, je neprecenljiv pripomoček za temeljne in uporabne raziskave na področju imunologije. Ponuja izjemne možnosti za izboljšanje našega znanja in zdravljenja imunoloških bolezni

Celična linija RBL-2H3 za napredne imunološke raziskave

430,00 €*

Vsebina: 1.5 milliliter

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 305194

Celice RBL-2H3: Raziskovalne publikacije

V nadaljevanju je predstavljenih nekaj zanimivih raziskovalnih publikacij, v katerih so predstavljene mastociti RBL-2H3:

Inhibicijsko delovanje narirutina na degranulacijo celic RBL-2H3

Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). V študiji je bilo predlagano, da narirutin, naravna spojina, zaviralno deluje na degranulacijo RBL 2H3 prek uravnavanja signalne poti NF-κB, MAPK in tirozin kinaze.

Učinki apigenina na celice RBL-2H3, RAW264. 7 in HaCaT: protialergijsko, protivnetno in zaščitno delovanje na kožo

V tej raziskavi v reviji International Journal of Molecular Sciences (2020) je bilo predlagano, da spojina apigenin znatno zavira alergijske in vnetne odzive celic RBL-2H3 in RAW264.7. Zato lahko služi kot potencialno sredstvo za boj proti boleznim, povezanim z imunskim sistemom.

Protivnetni in protialergijski učinki saponarina ter njegov vpliv na signalne poti celic RAW264.7, RBL-2H3 in HaCaT

V tem raziskovalnem članku v reviji International Journal of Molecular Sciences (2021) so ocenili protialergijske in protivnetne učinke naravnega proizvoda, saponarina, z uporabo različnih celičnih linij, vključno z RBL-2H3.

Inhibicijski učinek izvlečkov in nekaterih čistih sestavin tajskega zeliščnega zdravila Benchalokawichian, ki se uporablja pri alergijskih motnjah, na sproščanje β-heksozaminidaze iz celic RBL-2H3

V tej študiji, ki temelji na dokazih komplementarne in alternativne medicine (2014), je bilo ugotovljeno, da izvlečki in nekatere aktivne sestavine zdravila Benchalokawichian potencialno zaviralno vplivajo na sproščanje ß-heksozaminidaze iz RBL 2H3.

Peptidi Spirulina maxima zavirajo degranulacijo mastocitov prek inaktivacije fosforilacije Akt in MAPKs v celicah RBL 2H3

Ta članek je bil objavljen leta 2018 v reviji International Journal of Biological Macromolecules. V študiji je bilo navedeno, da spirulina maxima, naravni proizvod, zavira degranulacijo RBL 2H3 s preprečevanjem fosforilacije MAPKs in AKT.

Viri za celično linijo RBL-2H3: RBLH-2B: protokoli, videoposnetki in drugo

RBL-2H3 je pogosto uporabljena linija mastocitov. Tukaj so navedeni razpoložljivi viri, ki zajemajo protokole gojenja in transfekcije RBL-2H3:

RBL 2H3 MC model: Ta raziskovalni članek vsebuje protokole za vzdrževanje kultur RBL-2H3 in transfekcijo RBL-2H3.

Tukaj je nekaj virov, ki pojasnjujejo protokol gojenja celic RBL-2H3:

Celice RBL-2H3: Ta spletna stran je koristna za učenje protokolov celičnih kultur za celično linijo RBL-2H3. Poleg tega vsebuje informacije o celičnih medijih in pogojih gojenja RBL-2H3.

Celična linija RBL-2H3: RBL-2B: bistvena vprašanja in odgovori za raziskovalce

Reference

Passante, E. in N. Frankish, Celična linija RBL-2H3: njen izvor in primernost kot model za mastocit. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
Li, Q., et al., Psevdoalergijska reakcija, povzročena z injekcijo Qingkailing, delno prek signalne poti PI3K-Rac1 v celicah RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
Liu, L. in drugi, Polistirenska mikro (nano) plastika poškoduje organele celic RBL-2H3 in spodbuja MOAP-1 za indukcijo apoptoze. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
Chiu, K.-M., et al., Anti-allergic and anti-inflammatory effects of neferine on RBL-2H3 cells (Protialergijski in protivnetni učinki neferina na celice RBL-2H3). International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.