Celice NCI-H460 - usmerjanje raziskav pljučnega raka z vpogledi v celice NCI-H460
NCI-H460 so celice nedrobnoceličnega pljučnega raka človeškega izvora, ki se pogosto uporabljajo v raziskavah pljučnega raka in toksikologiji. Ta celična linija je dragoceno orodje za preučevanje različnih vidikov biologije raka, ki vključujejo razvoj, rast in odpornost tumorja na zdravila. Poleg tega so celice NCI-H460 primeren model za razvoj protirakavih reagentov.
Celice NCI-H460: Izvor in splošne značilnosti
Izvor in splošne značilnosti celične linije pomembno prispevajo k njeni uporabi v raziskavah. Ta del članka vam bo pomagal pri spoznavanju izvora in glavnih značilnosti celic pljučnega raka NCI-H460. Spoznali boste: Kaj so celice NCI-H460? Kaj je tip celične linije NCI-H460? Kakšna je morfologija celic NCI-H460?
- Celična linija NCI-H460 izvira iz plevralnega izliva evropskega moškega z velikoceličnim pljučnim rakom. Leta 1982 so jo ustvarili A. F. Gazdar in sodelavci.
- Celice pljučnega raka NCI-H460 imajo epitelijsko morfologijo.
- NCI-H460 je tumorigena celična linija s hipotriploidnim kariotipom. Modalno število kromosomov za te celice je 57. Celice NCI-H460 imajo v primerljivi meri tudi modalno število kromosomov 58.
- Te celice pljučnega raka imajo številne mutacije NCI-NCI-H460 kot nedrobnocelični pljučni tumorji, na primer mutacijo NCI-H460 KRAS, ki sodelujejo pri proliferaciji, rasti, invaziji in metastaziranju celic.
Informacije o gojenju celic NCI-H460
Za pravilno ravnanje in vzdrževanje celične linije NCI-H460 morate poznati naslednje ključne točke. Seznanili vas bodo s časom podvojitve NCI-H460, gojiščem NCI-H460 in osnovnimi postopki gojenja celic pljučnega raka NCI-H460.
Ključne točke za gojenje celic NCI-H460
|
Čas podvojitve: |
Čas podvojitve celic NCI-H460 je približno 33 ur. |
|
Prilepljene ali v suspenziji: |
Celice pljučnega raka NCI-H460 so adherentne. |
|
Razmerje subkultiviranja: |
Priporočeno razmerje delitve za celično linijo NCI-H460 je 1:2 in 1:4. Po odstranitvi starega gojišča adherentne celice speremo s fiziološko raztopino 1 x fosfatnega pufra. Nato celice 8 do 10 minut inkubiramo z raztopino za prehod Accutase pri sobni temperaturi. Disociirane celice ponovno suspendiramo v gojišču in centrifugiramo. Zbrane celice ponovno resuspendiramo in prelijemo v novo bučko za gojenje. |
|
Rastno gojišče: |
RPMI 1640 se uporablja kot gojišče za NCI-H460. Dopolnjeno je z 10 % fetalnega govejega seruma, 2,1 mM stabilnega glutamina in 2,0 g/L NaHCO3. Medij je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden. |
|
Pogoji rasti: |
Kultura NCI-H460 se vzdržuje pri temperaturi 37 °C v navlaženem inkubatorju s stalnim dovajanjem 5 % CO2. |
|
Shranjevanje: |
Celice pljučnega raka NCI-H460 se lahko dolgoročno shranjujejo v parni fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku za zelo nizke temperature. |
|
Postopek zamrzovanja in medij: |
Za zamrzovanje in shranjevanje celic NCI-H460 se uporablja gojišče CM-1 ali CM-ACF. Za zaščito največje možne vitalnosti celic je priporočljiva počasna metoda zamrzovanja. |
|
Postopek odtaljevanja: |
Zamrznjene celice NCI-H460 odtaljujemo v predhodno ogreti vodni kopeli (pri temperaturi 37 °C) od 40 do 60 sekund, dokler ne ostane majhen ledeni skupek. Odtajanim celicam dodamo sveže gojišče in jih centrifugiramo, da odstranimo sestavine zamrzovalnega gojišča. Zbrana celična peleta se ponovno resuspendira in celice se razporedijo v nove erlenmajerice z gojiščem za rast. Celice NCI-H460 lahko potrebujejo skoraj 24 ur, da se pritrdijo na površino erlenmajerice. |
|
Raven biološke varnosti: |
NCI-H460 celice pljučnega raka se obdelujejo in vzdržujejo v laboratorijih 1. stopnje biološke varnosti. |
Prednosti in slabosti celic NCI-H460
NCI-H460 je celična linija, ki se pogosto uporablja pri raziskavah pljučnega raka. V tem poglavju so opisane splošne prednosti in slabosti celic NCI-H460 za pljučnega raka.
Prednosti
Prednosti celične linije NCI-H460 za nedrobnocelični pljučni rak so:
-
Izvor tumorja
Celična linija NCI-H460 je bila pridobljena iz bolnika z velikoceličnim pljučnim karcinomom, ki predstavlja to posebno vrsto pljučnega raka. Uporablja se kot model za preučevanje biologije pljučnega raka ter razvoj novih in učinkovitih načinov zdravljenja. Celice NCI-H460 imajo tumorigen potencial in jih je mogoče vbrizgati v imunsko pomanjkljive miši ter tako ustvariti tumorske modele in vivo za preučevanje rasti, razvoja in učinkovitosti morebitnih zdravil.
-
Visoka stopnja razmnoževanja
NCI-H460 ima višje stopnje rasti kot druge celične linije nedrobnoceličnega pljučnega raka, kot je A549. Ta prednost povečuje njihovo razpoložljivost ter raziskovalcem pomaga pri izvajanju ponovljivih in časovno občutljivih poskusov.
Slabosti
Slabosti, povezane s celicami pljučnega raka NCI-H460, so:
-
Homogenost
Celice NCI-H460 so homogene, saj so bile pridobljene iz tumorja enega bolnika. Zato na splošno nimajo kompleksnosti in heterogenosti, ki ju opažamo v tumorjih bolnikov.
Raziskovalna uporaba celic NCI-H460
Celice pljučnega raka NCI-H460 se pogosto uporabljajo v študijah, povezanih s pljučnim karcinomom. Navajamo nekaj pomembnih raziskovalnih aplikacij celic NCI-H460:
- Raziskave pljučnega raka: Celice NCI-H460 so neprecenljiv model za raziskovanje celičnih in molekularnih mehanizmov, ki sodelujejo pri razvoju, rasti in metastaziranju tumorjev. Poleg tega se uporabljajo za preučevanje nujnih signalnih poti, molekularnih tarč in različnih genetskih mutacij, povezanih z napredovanjem pljučnega raka. Na celicah NCI-H460 je bilo izvedenih več študij za učinkovito preučevanje teh dejavnikov. V študiji, izvedeni leta 2019, je bilo predlagano, da so prekomerno izraženi jedrni povsod prisotni kazein in substrat ciklinsko odvisnih kinaz (NUCKS) vključeni v rast tumorskih celic prek regulacije signalne poti PI3K/AKT [1]. Podobno je bila v študiji in vitro in in vivo uporabljena celica NCI-H460 za preučevanje vloge gena eIF4E. Ugotovitve so pokazale, da gen eIF4E sodeluje pri rasti in angiogenezi pljučnega karcinoma ter da ga je mogoče usmeriti v razvoj obetavnih zdravil proti pljučnemu raku [2].
- Odkrivanje in razvoj zdravil: NCI-H460, celična linija človeškega pljučnega raka, se pogosto uporablja v študijah odkrivanja in razvoja zdravil. Raziskovalci te celice uporabljajo za preučevanje toksičnosti in učinkovitosti novih kandidatnih zdravil, ciljanih terapij in zdravljenj, ki so usmerjena predvsem proti mutacijam KRAS NCI-H460. V študiji, ki so jo leta 2023 izvedli Haoyue Hu in sodelavci, so uporabili celice NCI-H460 za preučevanje protirakavih učinkov zdravila anlotinib. Rezultati so pokazali, da je anlotinib z zaviranjem signalne kaskade MEK/ERK delno vplival na rast celic pljučnega raka z mutacijo KRAS [3]. Podobno so pri fenolni spojini, karnozovi kislini, preverili antiproliferativno in proapoptotično delovanje z uporabo celic NCI-H460 [4].
- Odpornost na zdravila: NCI-H460 je idealna celična linija za preučevanje mehanizma odpornosti pljučnega karcinoma na zdravila. Raziskovalci te celice uporabljajo za razvoj modelov odpornosti na zdravila, da bi ugotovili osnovne gene, molekularne dejavnike in signalne poti. V študiji so na primer razvili celice NCI-H460, odporne proti pemetreksedu, večnamenskemu antifolatnemu sredstvu, da bi preučili osnovne molekularne mehanizme odpornosti proti pemetreksedu v celicah nedrobnoceličnega pljučnega raka [5].
Kupite celično linijo NCI-H460: Vrata do raziskav pljučnega raka
Raziskovalne objave s celicami NCI-H460
Tukaj je nekaj zanimivih raziskovalnih publikacij o celični liniji pljučnega karcinoma NCI-H460.
Naravni glukan iz črnega fižola zavira proliferacijo rakavih celic prek poti PI3K-Akt in MAPK
Ta študija v reviji Molecules (2023) predlaga, da naravni α-1,6-glukan, BBWPW, iz črnega fižola zavira proliferacijo celic NCI-H460 prek regulacije poti PI3K/AKT/MAPK.
V tem članku v reviji Phytomedicine (2019) je bilo preučeno, da dioscin-6′-O-acetat, nova naravna spojina, deluje antiproliferativno na celice pljučnega raka NCI-H460.
miRNA-425-5p povečuje rast pljučnega raka prek signalne osi PTEN/PI3K/AKT
Raziskava BMC Pulmonary Medicine (2020) navaja, da mikroRNA-425-5p povečuje tumorigenezo pljučnega raka prek poti PTEN/PI3K/AKT.
V tem članku v reviji Molecular Medicine Reports (2017) je bil predlagan protitumorski potencial in osnovni mehanizmi spojine kvinalizarin v celicah NCI-H460 in drugih celicah pljučnega raka.
Ta raziskava v reviji Food and Function (2019) poudarja potencialni protirakavi učinek izvlečka Eucalyptus globulus labill. z uporabo celic NCI-H460. Ugotovitve so pokazale, da je rastlinski izvleček te učinke pokazal s povečanjem izražanja p53 v NCI-H460 in spreminjanjem profila celičnega cikla.
Viri za celično linijo NCI-H460: N-HCI-H460: protokoli, videoposnetki in drugo: protokoli, videoposnetki in drugo
Tukaj je nekaj spletnih virov, ki vključujejo celice pljučnega raka NCI-H460.
- Transfekcija celic NCI-H460: Ta videoposnetek je vodnik po korakih za transfekcijo celic NCI-H460 s plazmidno DNK.
Naslednje povezave vsebujejo nujne informacije o celičnih kulturah za celice H460.
- Celice NCI-H460: Na tej spletni strani so na voljo pomembne informacije o medijih za celice NCI-H460, postopkih subkultiviranja, zamrzovanja in odmrzovanja.
- Prehajanje celic NCI-H460: Ta dokument vas bo seznanil s postopkom pasažiranja in subkultiviranja celične linije NCI-H460. Poleg tega vam bo pomagal tudi pri učenju protokola transfekcije za celice NCI-H460.
Raziskovanje celične linije NCI-H460: Pogosta vprašanja in vpogledi
Reference
- Hu, C., et al., NUCKS spodbuja proliferacijo, migracijo in invazijo celic pljučnega raka prek signalne poti Pi3k/Akt. Klinična in raziskovalna medicina, 2021. 44(2): str. E55-61.
- Qi, X. in drugi, EGPI-1, nov zaviralec interakcije eIF4E/eIF4G, zavira rast celic pljučnega raka in angiogenezo prek signalne poti Ras/MNK/ERK/eIF4E. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib ima protirakave učinke na celico pljučnega raka z mutiranim KRAS prek zaviranja poti MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: str. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosic acid exhibits antiproliferative and proapoptotic effects in tumoral NCI-H460 and nontumoral IMR-90 lung cells. Journal of Toxicology and Environmental Health, Del A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L. in drugi, Vzpostavitev in karakterizacija celic NCI-H460/PMT, odpornih na pemetreksed. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (prej Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.