Objavljeno: 2023 | Zadnji pregled: maj 2026

Celična linija Jurkat E6.1

Jurkat E6.1 je klon celične linije Jurkat, imortalizirane linije človeških T-limfocitov, pridobljene iz periferne krvi. Prvič je bila vzpostavljena leta 1977 in se uporablja v raziskavah, povezanih s signalizacijo receptorjev T-celic, adoptivnimi terapijami s T-celicami in drugimi limfociti proti raku, raziskavami protoonkogenov, povezanih s krvjo, preživetjem celic in celično diferenciacijo.

V tem članku bomo navedli vse informacije in predpogoje, ki jih morate poznati, preden začnete delo s kloniranimi celičnimi linijami Jurkat E6.1, med katerimi so:

1. Poreklo, zgodovina in splošne informacije
2. Značilnosti celične kulture
3. Uporaba celičnih linij Jurkat E6.1
4. Raziskovalne publikacije
5. Prednosti in omejitve
6. Viri: protokoli, videoposnetki in več

 1. Izvor, zgodovina in splošne informacije

Tukaj so navedene vse potrebne informacije v zvezi z zgodovino, izvorom in splošnimi značilnostmi celične linije Jurkat E6.1 ter njenim ravnanjem v celični kulturi.

• Jurkat E6.1 je imortalizirana celična linija človeških T-limfocitov. Ta klonirana celična linija je derivat celične linije Jurkat, pridobljene iz periferne krvi 14-letnega dečka, ki je leta 1976 trpel za akutno limfoblastno levkemijo. Po izolaciji iz krvi je bila ta celična linija sprva poimenovana JM, saj JM in Jurkat nakazujeta, da sta ti celični liniji izolirani iz istega pacienta. Celična linija Jurkat E6.1 je bila klonirana iz celičnih derivatov, znanih kot Jurkat-FHCRC.
• Celične linije E6.1 izvirajo iz levkemije; te celične linije se uporabljajo za povečanje ekspresije IL-2 prek stimulacije z monoklonskimi protitelesi ali lektinom. Izražajo receptorje za antigene T-celic; zato se te celične linije lahko uporabljajo pri preučevanju motenj imunskega sistema in v raziskavah na področju imunoonkologije.
• Celična morfologija celic Jurkat E6.1: Celice Jurkat E6.1 so bile izolirane iz bolnika z levkemijo in imajo spremenjeno morfologijo v primerjavi s T-limfociti, kar jih naredi za nesmrne celične linije. Limfoblastna celica nastane, ko se naivne limfocite aktivirajo s predstavitvijo antigena s strani celic, ki predstavljajo antigen. To povzroči povečano rast jedra, citoplazme, mRNA in beljakovin.
• Velikost celic: Celične linije Jurkat E6.1 so klonirane in nesmrne, njihov premer pa običajno znaša od 10 do 16 μm (premer se lahko razlikuje glede na vrsto suspenzije). Te celične linije imajo izrazito sferično obliko celic.
• Genom in število kromosomov: Te celične linije so psevdodiploide celične linije človeških T-limfocitov, pri katerih je modalni kromosom kromosom 46. Raziskave so pokazale, da je modalni kromosom prisoten v približno 74 % primerov, stopnja poliploidije pa znaša približno 5,3 %. Študije kariotipa so pokazale kariotip 46, X, Y, -2, -18, del (2) (p21p23), del (18) (p11.2). Kromosomi X in Y imajo v večini celičnih linij običajno eno kopijo.
• Celične linije Jurkat v primerjavi s celičnimi linijami E6.1 Jurkat: Celične linije Jurkat so primarne matične celične linije, ki so bile prvotno izolirane iz bolnika z akutno limfoblastno levkemijo. Celične linije E6.1 Jurkat pa so klonirani derivati celičnih linij Jurkat-FHCRC.

Objavljeno: 2023 | Zadnji pregled: maj 2026

Uporaba celičnih linij Jurkat E6.1

Celična linija Jurkat E6.1 se najpogosteje uporablja v raziskavah in študijah motenj, povezanih z imunskim sistemom, ter z njim povezanih rakavih obolenj. Poleg tega je primerna za preučevanje nekaterih zapletenih pojavov, povezanih z okužbo s HIV, saj je receptor CD4 T-celic nujen za vstop retrovirusa v celico.

Nekatera ključna področja, na katerih se te celične linije uporabljajo, so opisana v nadaljevanju:

Modelni sistem za signalizacijo T-celic in poti apoptoze: Ta celična linija, pridobljena iz T-celične levkemije, se obsežno uporablja v raziskavah, ki vključujejo signalno kaskado TCR. Jurkat E6.1 sprošča več IL-2 in IL-8, ki nato pomagata pri aktivaciji T-celic in sprožita vnetne poti. Ta celična linija je znana tudi po hiperfosforiliranem Pyk2 in povečani produkciji Vav1, kar ključno vpliva na preureditev aktinove citoeskeletne mreže v T-celicah. Segregacijo TCR v celični liniji Jurkat E6-1 je mogoče izboljšati tudi z močno ekspresijo LFA-1, kar posledično okrepi signalizacijo TCR in ekspresijo IL-2. Na celičnih linijah Jurkat E6.1 se izvajajo tudi študije celične proliferacije in celičnega cikla. Te linije so bile prednostno izbrane za preučevanje apoptičnih poti in indukcije poškodb DNK s spojinami, pridobljenimi iz morskih in rastlinskih virov. V študiji iz leta 2013 so z uporabo teh celičnih linij ocenili vpliv epigonalnih kondicioniranih medijev morskih psov na človeške celice. Podobno so v celičnih linijah Jurkat E6.1 preučevali zaviralni vpliv hirsutina rastlinskega izvora na celično proliferacijo. Pogosto se Jurkat E6.1 uporablja tudi v protirakavih študijah za oceno izbranih ciljnih molekul. Na teh celičnih linijah so preučevali tudi vpliv morskih nevrotoksinov, kot so brevetoksini (PbTx).

Študije HIV: Ena najpomembnejših uporab celičnih linij Jurkat E6.1 je njihova sposobnost, da služijo kot primeren model za študije HIV zaradi njihove lastnosti, da izbirajo različne signalne dogodke, ki inducirajo TCA. Celične linije Jurkat E6.1 se ne uporabljajo le za razumevanje aktivacije HIV, temveč tudi za raziskovanje mehanizmov, ki stojijo za latentnostjo HIV. Replikacija in okužba z virusom HIV sta bili obširno raziskani v teh celičnih linijah, kjer jih je mogoče podvreči genskemu urejanju in izklopu genov, kot je bilo storjeno v študiji iz leta 2021. Vpliv dajanja zdravil na okužbo z virusom HIV, kot so hibridne polimerno-lipidne nanodelce (PLN) z dolgotrajnim delovanjem, ki vsebujejo efavirenz (Efa) in enfuvirtid (Enf), na vstop virusa, je bil preučen z uporabo celičnih linij Jurkat E6.1. Jurkat E6.1, spremenjen s tehnologijo CRISPR/Cas9, je bil večkrat uporabljen za preučevanje mehanizmov, vpletenih v vstop, replikacijo in okužbo s HIV.

Raziskovalne publikacije

Tukaj je nekaj pomembnih primerov iz obsežne zbirke raziskav, vključno s celičnimi linijami Jurkat E6.1.

Metilselenol, metabolit selena, uravnava izražanje ligandov, ki sprožijo imunsko aktivacijo prek limfocitnega receptorja NKG2D

Z uporabo celic Jurkat E6.1, inkubiranih v različnih selenovih spojinah, so proučevali izražanje ligandov in površinsko izražanje MICA/B.

Karakazinska kislina, ent-3,4-seco-kauren, spodbuja apoptozo in celično diferenciacijo prek zaviranja signalne poti NFkB v levkemijskih celicah.

Razumevanje citotoksičnosti, ki jo povzroča karakasinska kislina, v človeških linijah T-celic, kot sta Jurkat E6.1 in HL-60.

Dokazi o in vitro razvoju odpornosti na azidotimidin v celičnih linijah T-limfocitne levkemije (Jurkat E6–1/AZT-100) in pri pediatričnih bolnikih z okužbo s HIV-1

Za preučevanje odpornosti proti azidotimidinu (AZT) pri bolnikih, okuženih z virusom HIV-1, je bila uporabljena celična linija Jurkat E6.1, ki je bila dalj časa inkubirana z zdravilom AZT.

Študije celične linije Jurkat E6.1 o vplivih nekaterih bioindolov na fluidnost celične membrane

V tej raziskavi smo uporabili sistem polarizirane fluorescenčne analize, da bi razumeli vpliv bioindolov, vključno s serotoninom, triptofanom in melatoninom, na fluidnost celične membrane v celičnih linijah Jurkat E6.1.

Molekularni mehanizem indukcije apoptoze v celicah Jurkat E6-1 z izvlečkom alkaloidov iz Tribulus terrestris

Izvleček alkaloidov iz rastline Tribulus terrestris je v celicah Jurkat E6.1 povzročil apoptozo, kar je omogočilo razumevanje osnovnega mehanizma delovanja.

Povečana ekspresija LFA-1 izboljša arhitekturo imunskih sinaps in signalizacijo receptorjev T-celic v celicah Jurkat E6.1

Signalizacija receptorjev T-celic v celicah Jurkat E6.1 se je okrepila z močnim povečanjem izražanja LFA-1.

Prednosti in omejitve

Tako kot druge celične linije ima tudi Jurkat E6.1 svoje prednosti in omejitve.

Prednosti

Obstaja veliko razlogov, zakaj se ta linija prednostno uporablja v teh aplikacijah:

• Način rasti

  Jurkat E6.1 je suspenzijska in neadhezivna celična linija, kar pomeni, da raste v suspenziji in se ne prilepi na površino kulture.

• Ekspresija genov

  Celična linija Jurkat E6.1 izraža gene, ki kodirajo interleukin-2 (IL-2) in CD3. Po stimulaciji z monoklonskimi protitelesi, lektini ali forbol estri proti antigenskemu kompleksu T3 je bilo dokazano, da te celice proizvajajo povečano količino IL-2.

• Ekspresija antigenov

  Celična linija Jurkat E6.1 izraža antigen CD3, povezan z aktivacijo in signalizacijo T-celic.

• Markerji izražanja

  Celična linija izraža markerje receptorja za antigene T-celic (TCR), ki so ključni za prepoznavanje T-celic in imunski odziv.

• Primernost za transfekcijo

  Celična linija klona Jurkat E6.1 je primerna za poskuse transfekcije gostitelja, kar omogoča vnos eksogenega genetskega materiala v celice za različne raziskovalne namene.

Omejitve

Po prednostih si oglejmo omejitve, povezane z uporabo celičnih linij Jurkat E6.1:

• Transfekcija celic z virusnim vektorjem

  Transfekcija celic Jurkat E6.1 je zahtevna zaradi njihovega izvora iz T-celic. Za gensko modifikacijo so običajno potrebni dragi in časovno zamudni virusni vektorji. Nevirusni vektorji so v celicah Jurkat pokazali nizko učinkovitost transfekcije in znatno toksičnost.

• Bakterijska kontaminacija

  Celične kulture Jurkat E6.1 je treba spremljati zaradi morebitne bakterijske kontaminacije, da se zagotovi integriteta eksperimentalnih rezultatov.

• Virusne kontaminacije

  Celične linije Jurkat E6.1 izražajo različne kemokin receptorje in nizke ravni CD4, kar olajšuje vstop virusov. Zaradi tega so dovzetne za viruse, ki okužujejo T-celice, kot sta HTLV in HIV.

6. Viri: protokoli, videoposnetki in drugo

V tem poglavju bomo obravnavali metode in protokole za gojenje celic in transfekcijo ter izobraževalne videoposnetke, povezane s to celično linijo:

Protokoli za gojenje celic

Tukaj je nekaj osnovnih postopkov gojenja, ki jih je treba upoštevati pri tej celični liniji:

• Standardni operativni postopek (SOP) za gojenje celic, razmnoževanje Jurkat: Univerza v Kaliforniji je v svojem brskalniku USCS Genome objavila tudi metodo za gojenje klona Jurkat E6-1.
• Kultura in ravnanje s klonom E6-1 Jurkat: Podjetje Elabscience je na svoji spletni strani z opisom izdelkov vključilo protokol za ravnanje s kulturo.

Protokoli transfekcije

Tukaj je seznam različnih protokolov transfekcije, ki so na voljo:

• Protokol transfekcije celic Jurkat z reagentom Lipofectamine LTX: Protokol transfekcije celic Jurkat z uporabo reagenta Lipofectamine LTX podjetja ThermoFisher. 
• Protokol Amaxa™ 4D-Nucleofector™ za klon Jurkat E6.1 [ATCC®]: Družba Lonza Group AG je zagotovila protokol transfekcije za klon Jurkat E6.1 iz ATCC z uporabo naprave 4D-Nucleofector® X.

Videoposnetki o Jurkat E6.1

Na voljo je več odličnih videoposnetkov, ki obravnavajo koncepte celičnih kultur, postopke, proliferacijo, sejanje in druge teme.

• Prenos celic: Osnove celične kulture: To je odličen videoposnetek podjetja ThermoFisher, ki predstavlja osnovni vodnik za prenos človeških celičnih linij.
• Odtaljevanje celic: Osnove celične kulture: Ta videoposnetek podaja osnovna navodila za gojenje in odtaljevanje celic, ki ga je pripravilo podjetje ThermoFisher.
• Protokol transfekcije plazmidne DNK: Ta videoposnetek se osredotoča na protokol transfekcije plazmidne DNK z reagentoma Lipofectamine® LTX in Plus™, ki ga je pripravilo podjetje ThermoFisher.
• Merjenje apoptoze z uporabo Jurkatovih celic v suspenziji, obdelanih s 3 mikromolarnim staurosporinom: Ta video prikazuje, kako izvesti test apoptoze na slikovnem citometru Celigo z uporabo reagentov Hoechst in kaspaza 3/7, ki jih je pripravilo podjetje Nexcelom Bioscience.