Celice Hep3B: Raziskave in odkritja hepatocelularnega karcinoma

HEP3B je imortalizirana celična linija hepatoceličnega karcinoma, ki izvira iz človeških celic. Pogosto se uporablja pri raziskavah hepatotoksičnosti in presnove zdravil. Učinkovitost transfekcije HEP3B je precejšnja, zato se te celice pogosto uporabljajo za preučevanje razvoja, napredovanja in terapevtskih posegov pri jetrnem raku. Ta članek zajema vse potrebne informacije o celični liniji HEP3B, ki vam bodo pomagale pri delu z njo. Vsebuje predvsem:

Splošne značilnosti in izvor celic HEP3B
Informacije o gojenju celične linije HEP3B
Celično linijo HEP3B: Prednosti in omejitve
Uporabo celic HEP3B v raziskavah
Objave o celični liniji HEP3B
Viri za celično linijo HEP3B: Viri, protokoli, videoposnetki in drugo: Viri, protokoli in drugo

1.splošne značilnosti in izvor celic HEP3B

Glavne informacije, ki jih potrebujete o celični liniji, so njen izvor in splošne značilnosti. To vam lahko pomaga pri odločanju o njeni uporabi v raziskavi in pri ravnanju z njo. Ta razdelek članka zajema vse bistvene informacije o izvoru in značilnostih HEP3B. Tu boste izvedeli: Kaj je celična linija Hep 3B? Kakšen je izvor celic Hep3B? Kakšna je morfologija celic HEP3B?

HEP3B, kontinuirana celična linija človeškega hepatoma, izvira iz jetrnega tkiva osemletnega afriškega dečka s hepatocelularnim karcinomom (HCC). Leta 1979 so jo ustvarili Aden in sodelavci v laboratoriju Barbare B. Knowles, Wistar Institute, Philadelphia, ZDA [1].
Celice HEP3B imajo v svoj kromosom integriran genom virusa hepatitisa B (HBV).
Te celice hepatocitnega karcinoma imajo epitelijsko morfologijo.
Celice HEP3B imajo modalno število kromosomov 60. Za razliko od celic HepG2 nimajo preurejenega kromosoma 1.

Kakšna je razlika med HepG2 in Hep3B?

HepG2 in HEP3B se razlikujeta po številu kromosomov na celico. HEP3B vsebuje 60 kromosomov, medtem ko imajo celice HepG2 v povprečju 55 kromosomov. Poleg tega je HepG2 netumorigen in negativen na hepatitis B, medtem ko je HEP3B tumorigen in pozitiven na HBV.

Karcinom jeter pri veliki povečavi pod mikroskopom.

2.informacije o gojenju celične linije HEP3B

Poznavanje informacij o gojenju celične linije vam lahko olajša delo z njo. V tem razdelku so zajete vse ključne točke za gojenje celične linije HEP3B HBV, vključno z: Kakšen je čas podvojitve celic HEP3B? Kakšni so pogoji gojenja HEP3B? Kako gojite celice HEP3B HCC?

Ključne točke za gojenje celic HEP3B

Čas podvojitve:	Čas podvojitve celic HEP3B je približno 36 ur.
Prilepljene ali v suspenziji:	Ta celična linija hepatoma je adherentna.
Razmerje delitve:	HEP3B celice se gojijo v razmerju 1:2 do 1:4. Adherentne celice HEP3B se sperejo z 1 x PBS in nato inkubirajo z disociacijsko raztopino Accutase. Po 8 do 10 minutah dodamo sveže gojišče in celice centrifugiramo. Zbrane celice nato previdno resuspendiramo in prelijemo v bučke z gojiščem v priporočenem razmerju delitve.
Rastno gojišče:	Za gojenje celic HEP3B se uporablja gojišče EMEM, ki vsebuje 10 % FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-glutamina in Earlejevo uravnoteženo raztopino soli (EBSS).
Pogoji rasti:	Celice HEP3B se gojijo v vlažnem inkubatorju pri 37 °C s stalnim dovajanjem 5 % CO2.
Shranjevanje:	Zamrznjene celice HEP3B shranjujemo pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku ali v parni fazi tekočega dušika.
Postopek zamrzovanja in medij:	Priporočeno gojišče za zamrzovanje celic HEP3B je CM-1 ali CM-ACF. Celice se zamrznejo s počasnim postopkom zamrzovanja, ki omogoča znižanje temperature le za 1 °C na minuto, da se zaščiti vitalnost celic.
Postopek odtaljevanja:	Zamrznjene celice odtalimo v vodni kopeli, ki je nastavljena na 37 °C, za 40 do 60 sekund. Pozneje te celice dodamo v sveže rastno gojišče in jih centrifugiramo, da odstranimo elemente zamrzovalnega gojišča. Zbrane celice ponovno suspendiramo in jih razporedimo v nove erlenmajerice za rast.
Raven biološke varnosti:	Za gojenje celic HEP3B je potreben laboratorij 1. stopnje biološke varnosti.

Adherentna polkonfluentna plast celic Hep3B pri 10-kratni in 20-kratni povečavi.

3.celična linija HEP3B: Prednosti in omejitve

HEP3B je pogosto uporabljena celična linija hepatocelularnega karcinoma. V tem poglavju se bomo osredotočili na nekatere ključne prednosti in omejitve teh hepatomskih celic.

Prednosti

Glavne prednosti celic HEP3B so:

Enostavne za gojenje	Celice HEP3B nimajo zahtev glede gojenja celic, zato jih je enostavno obdelovati in vzdrževati v raziskovalnem laboratoriju. To poenostavlja eksperimentalne postopke.
Visoka učinkovitost transfekcije	Celice HEP3B imajo izjemno učinkovitost transfekcije, zato se pogosto uporabljajo pri genetskih manipulacijah in študijah, povezanih z izražanjem genov.
Tumorigenost	HEP3B je tumorigena celična linija hepatocelularnega karcinoma, ki lahko tvori tumorje, če jo vbrizgamo imunsko oslabljeni miši. To pomaga pri preučevanju napredovanja in razvoja raka z uporabo ksenografskih modelov HEP3B.
Status HEP3B P53	Celice HEP3B imajo mutacijo gena P53, podobno kot pri hepatocelularnem karcinomu (HCC) in drugih vrstah raka, zato so primerne za preučevanje vpliva mutacije P53 na rast, razvoj in napredovanje raka.

Omejitve

Omejitev, povezana s celično linijo HEP3B, je:

In vitro celični model

Celična linija HEP3B služi kot in vitro model celic hepatocelularnega karcinoma (HCC). Vendar pa morda ne predstavlja v celoti kompleksnosti HCC, kot ga najdemo v živih organizmih. Zato se lahko rezultati poskusov in vitro razlikujejo od tistih, ki jih opazimo in vivo.

4.uporaba celic HEP3B v raziskavah

Celična linija HEP3B ponuja več možnosti uporabe v biomedicinskih raziskavah. Nekatere ključne raziskovalne aplikacije celic HEP3B vključujejo:

Biologija raka: HEP3B je celična linija človeškega hepatocelularnega karcinoma. Je neprecenljiv celični model za raziskovanje celičnih in molekularnih mehanizmov, ki so podlaga za razvoj in napredovanje HCC. Raziskovalci te celice uporabljajo za preučevanje genetskih mutacij, celičnih procesov in celičnih signalnih poti, povezanih z rakom jeter. V študiji, v kateri so uporabili celice HEP3B, so ugotovili, da mikroRNA-223-3p uravnava komponente inflammasoma NLRP3, zavira proliferacijo in povečuje apoptozo celic hepatokarcinoma HEP3B [2].
Preverjanje in razvoj zdravil: Celično linijo HEP3B uporabljamo tudi za testiranje, presejanje in razvoj novih zdravil proti jetrnemu karcinomu. Poleg tega se uporablja za ocenjevanje toksičnosti in učinkovitosti različnih protirakavih zdravil in načinov zdravljenja. Raziskovalci so te hepatomske celice uporabili tudi za preučevanje presnove zdravil. Raziskovalci so uporabili celice HEP3B in ocenili citotoksični potencial rastlinskega izvlečka Cotinus coggygria na HEP3B celicah hepatocitnega karcinoma [3].
Virusne okužbe: HEP3B je celična linija, pozitivna na virus hepatitisa B, zato se uporablja za preučevanje virusnih okužb, ki lahko povzročijo razvoj raka jeter, tj. HBV in HCV. To lahko pripomore k boljšemu razumevanju virusnih okužb in razvoju morebitnih protivirusnih zdravil. V študiji so na primer uporabili celice raka hepatocitov HEP3B in raziskali pomen ubikvitinacije za razmnoževanje virusa hepatitisa c. Ugotovitve kažejo, da je ubikvitinu specifična proteaza 15 (USP15) vključena v širjenje HCV prek uravnavanja za hepatocite specifičnih funkcij, vključno z nastajanjem lipidnih kapljic in prevajanjem RNK HCV [4].

430,00 €*

Vsebina: 1.5 milliliter

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 305141

5.objave o celični liniji HEP3B

V tem poglavju članka bo predstavljenih nekaj zanimivih raziskovalnih publikacij o celicah HEP3B.

Regulacija apoptoze in avtofagije z luteolinom v celicah človeškega hepatocelularnega raka Hep3B

V tej objavi v reviji Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) je bilo predlagano, da lahko spojina luteolin, ki povzroči stres endoplazemskega retikuluma, deluje protitumorsko v celicah HEP3B, ki so P53-null, na način, ki ni odvisen od P53.

Potencialno ciljanje jetrnih rakavih celic Hep3B z lupeolom, izoliranim iz Avicennia marina

Ta študija v reviji Archiv der Pharmazie (2021) predlaga pentaciklični triterpenoid, lupeol, kot potencialno protirakavo sredstvo proti celicam HEP3B.

Etanolni izvleček iz Cnidium monnieri (L.) Cusson povzroči zastoj celičnega cikla in apoptozo prek regulacije od p53 neodvisne poti v celicah hepatocelularnega karcinoma HepG2 in Hep3B

Članek je objavljen v reviji Molecular Medicine Reports (2017). Ugotovitve študije navajajo, da etanolni izvleček Cnidium monnieri (L.) Cusson povzroči celično smrt (apoptozo) in zastoj celičnega cikla v celicah hepatokarcinoma HepG2 in HEP3B prek regulacije p53 in signalne poti Akt/GSK-3β.

Auranofin poveča apoptozo, ki jo posreduje sulforafan, v celicah hepatocelularnega karcinoma Hep3B z inaktivacijo signalne poti PI3K/Akt

Ta raziskava, objavljena v reviji Biomolecules and Therapeutics (2020), predlaga, da ima auranofin sinergistično delovanje in spodbuja apoptozo celic HEP3B, posredovano s sulforafanom, prek aktivacije poti PI3K/AKT.

Krožna RNA-0072309 ima protitumorske učinke v celični liniji Hep3B s ciljanjem na mikroRNA-665

V tem raziskovalnem članku v reviji BioFactors (2023) je bilo predlagano, da krožna RNA-0072309 deluje protitumorsko na celice hepatocelularnega karcinoma HEP3B prek usmerjanja miRNA-665.

6.viri za celično linijo HEP3B: Vir: protokoli, videoposnetki in drugo

V nadaljevanju je na voljo nekaj virov o celicah HEP3B:

HEP3B transfekcija: V tem videoposnetku je pojasnjen protokol transfekcije celic HEP3B.
Učinkovitost transfekcije HEP3B: Ta povezava vam bo pomagala spoznati sestavo gojišča HEP3B DMEM, pasažiranje celic in protokol transfekcije za celice HEP3B. Poleg tega vsebuje informacije za optimizacijo reagenta HEP3B lipofectamine 3000 v vašem protokolu transfekcije.

Naslednja povezava vsebuje protokol gojenja celic HEP3B:

Pogoji gojenja HEP3B: Ta povezava vam bo pomagala spoznati protokol za ravnanje s kulturami Huh7 in HEP3B ter njihovo vzdrževanje.
Celice HEP3B: Ta spletna stran vsebuje veliko informacij o celicah HEP3B, vključno z mediji HEP3B, protokolom za delitev celic, odtaljevanjem ter ravnanjem s proliferacijskimi in kriokonzerviranimi kulturami.

Reference

Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
Wan, L., et al., miRNA-223-3p uravnava NLRP3 za spodbujanje apoptoze in zaviranje proliferacije celic hep3B. Eksperimentalna in terapevtska medicina, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
Danjolli-Hashani, D. in S. Selen-Isbilir, Cytotoxic effect of Cotinus coggygria extract on Hep3B cancer cell line. Natural Product Research, 2022: str. 1-4.
Kusakabe, S., et al., USP15 sodeluje pri razmnoževanju virusa hepatitisa C z uravnavanjem prevajanja virusne RNK in tvorbe lipidnih kapljic. Journal of Virology, 2019. 93(6): str. 10.1128/jvi. 01708-18.