Celična linija HT-29

HT-29 je človeška celična linija za raka debelega črevesa in danke s širokim spektrom uporabe v raziskavah raka in toksikologije. Te celice so na primer občutljive na standardna kemoterapevtska zdravljenja raka debelega črevesa in danke. Poleg tega je celična linija HT-29 dobro opredeljen in vitro model za preučevanje odziva črevesnega epitelija na bakterijsko okužbo. Celice HT-29 posnemajo značilnosti zrelih črevesnih celic, tj. enterocitov, in so zato primerne za študije adhezije in mehanizmov.

Celice HT-29: Izvor in splošne informacije

Preden začnete uporabljati katero koli celično linijo, se morate seznaniti z njenimi splošnimi značilnostmi in izvorom. V tem poglavju boste izvedeli: Kaj so celice HT-29? Ali je HT-29 celična linija kolorektalnega raka? Kakšna je morfologija celic HT-29?

Kaj je celična linija HT-29? HT-29 je celična linija kolorektalnega adenokarcinoma, ki sta jo leta 1964 vzpostavila Trempe in Fogh. Celice so bile prvotno pridobljene iz primarnega tumorja belopolte ženske (stare 44 let) z adenokarcinomom debelega črevesa [1]. Od vzpostavitve se ta celična linija uporablja za preučevanje biologije raka.

Morfologija celic HT-29: Celična linija HT-29 ima na splošno epitelijsko morfologijo. Diferencirane celice rastejo v monoslojih, tvorijo tesne celično-celične stike in imajo apikalni ščetkast rob. Če se te celice gojijo v gojišču z manj glukoze ali se jim dodajo induktorji, kot sta butirat ali kislina, kažejo značilnosti, podobne enterocitom.

Velikost celic: Premer celic linije HT-29 za kolorektalnega raka je 11 μm.

Genom in ploidija: Modalno število kromosomov za celično linijo HT-29 je 71. Lahko se giblje med 68 in 72. Poleg tega je poenostavljeno število kromosomov za celice HT-29 hipertriploidno, pri čemer se komponenta 2S pojavlja v 2,4-odstotnem deležu.

Kaj je HT29 MTX? HT29 MTX je celična linija, odporna na metotreksat, izolirana iz originalne celične linije človeškega raka debelega črevesa HT-29 s prilagoditvijo na 10 µM metotreksata. Te celice kažejo značilnosti zrelih čašastih celic, ki izločajo sluz.

Celice HT-29: prednosti in omejitve

Vsaka celična linija ima svoje prednosti in slabosti, ki jo ločujejo od drugih celičnih linij. V tem poglavju bomo obravnavali glavne prednosti in omejitve, povezane s celicami HT-29.

Prednosti

Glavne prednosti celic HT-29 so:

• Enostavno gojenje

  Celična linija HT-29 je enostavna za ravnanje in vzdrževanje, brez zapletenih zahtev za gojenje. Široko se goji v raziskovalnih laboratorijih.

• In vitro model črevesnih celic

  Celice HT-29 se lahko v določenih pogojih gojenja diferencirajo v zrele črevesne celice (enterocite in celice, ki proizvajajo sluz). Uporabljajo se kot celični model za preučevanje prebave hrane in biološke razpoložljivosti.

• Visoka učinkovitost transfekcije

  Celice raka debelega črevesa HT-29 ponujajo visoko učinkovitost transfekcije, zaradi česar so primerne za študije genske ekspresije in regulacije. Z različnimi metodami je mogoče izvajati tako prehodne kot stabilne transfekcijske poskuse.

• Občutljivost na zdravila

  Celice HT-29 so občutljive na kemoterapevtska zdravila, kot sta fluorouracil in oksaliplatin, ki se pogosto uporabljata pri zdravljenju raka debelega črevesa. Uporabljajo se za preučevanje odpornosti na zdravila in presejanje potencialnih terapevtskih zdravil za kolorektalni karcinom.

Omejitve

• Heterogenost

  Celice HT-29, podobno kot druge rakave celične linije, kažejo heterogenost in morda ne tvorijo enotne celične populacije. To lahko vpliva na ponovljivost rezultatov v nekaterih testih in vodi do manjših odstopanj v eksperimentalnih izidih.

• Omejena diferenciacija

  Celice HT-29 imajo omejen potencial diferenciacije. Ne diferencirajo se v celoti v črevesne ali debelega črevesa celice, ampak kažejo le nekaj značilnih lastnosti. Ta omejitev lahko omeji njihovo uporabo pri preučevanju bolj zapletenih bioloških procesov.

Celice HT-29: Uporaba

Celična linija HT-29 se zaradi širokega spektra uporabe obsežno goji v raziskovalnih laboratorijih. V tem poglavju bomo obravnavali le nekaj pomembnih uporab celic HT-29.

Raziskave raka: HT-29 je celična linija kolorektalnega adenokarcinoma, zato se uporablja za preučevanje napredovanja raka, njegovega razvoja in osnovnih molekularnih mehanizmov. V študiji, izvedeni leta 2018, so uporabili celično linijo HT-29 za preučevanje celičnih molekul, odgovornih za metastaze. Ta študija je ugotovila, da geni vimentin in CXCR4 uravnavajo metastaze celic. Transfekcija mimika mikroRNA-193a-5p pa lahko zmanjša ravni mRNA teh genov in uspešno zmanjša metastaze rakavih celic [2].

Toksikološke raziskave: Celična linija HT-29 se pogosto uporablja v toksikoloških raziskavah. Te celice kolorektalnega karcinoma se uporabljajo za oceno toksičnosti različnih kandidatov za zdravila z uporabo različnih testov. Na primer, v eni od študij so raziskovali potencialno toksičnost etanolnega izvlečka rastline Syzygium cumini na celični liniji HT-29. Rezultati so pokazali znatno zaviranje rasti celic HT-29, kar kaže na obetavne protirakave lastnosti izvlečka [3].

Mikrobiologija: HT-29 se lahko uporablja kot sistem gostiteljskih celic za preučevanje patogeneze potencialnih mikroorganizmov, tj. bakterij in virusov. Raziskovalci lahko celice HT-29 okužijo z mikroorganizmi, da preučijo njihovo virulenco in odziv gostitelja. V eni takšni študiji so celice HT-29 uporabili za preučevanje probiotičnih lastnosti mlečnokislinskih bakterij [4]. V drugi študiji so celice HT-29 uporabili za oceno učinkovitosti in varnosti zdravljenja z bakteriofagi [5].

5. Raziskovalne publikacije o celicah HT-29

V tem poglavju bomo predstavili nekaj pomembnih publikacij o celicah HT-29, ki vam bodo v pomoč pri načrtovanju vaše raziskave.

Ocena protirakavega učinka etanolnega izvlečka Syzygium cumini na kolorektalno celično linijo HT-29

Ta študija je predlagala etanolni ekstrakt Syzygium cumini kot potencialno sredstvo proti raku na celicah kolorektalnega raka HT-29. Ekstrakt je znatno zaviral rast rakavih celic.

Tetrandrine zavira rast celic kolonskega karcinoma HT-29 prek poti Bcl-2/Caspase 3/PARP in faze G1/S

Ta publikacija v reviji Bioscience Reports je preizkusila protirakovo aktivnost spojine tetrandrina na celicah HT-29. Rezultati so pokazali, da tetrandrin zavira proliferacijo in rast rakavih celic prek regulacije celičnih signalnih poti.

mikroRNA-193a-5p zavira migracijo človeških celic raka debelega črevesa HT-29 prek zaviranja poti metastaziranja

Ta študija je predlagala, da lahko miRNA-193a-5p potencialno regulira metastaze celic HT-29 z regulacijo genov, povezanih z metastazami.

Bakteriofagi so bolj virulentni do bakterij v človeških celicah kot v bakterijski kulturi; spoznanja iz celic HT-29

Ta članek je bil objavljen v reviji Nature Scientific Reports leta 2018. Ta študija je uporabila tumorigeno celično linijo HT-29 kot črevesni celični model za oceno učinkovitosti predlaganega zdravljenja z bakteriofagi.

Probiotične lastnosti laktobacilov in njihova sposobnost zaviranja adhezije enteropatogenih bakterij na celice Caco-2 in HT-29

V tej študiji so raziskovalci uporabili celice HT-29 za preučevanje probiotičnih dejavnosti mlečnokislinskih bakterij. Zanimivo je, da je študija pokazala, da laktobacili preprečujejo adhezijo patogenih bakterij na celice debelega črevesa.

Celice HT-29 Viri: protokoli, videi in več

V tem poglavju bomo obravnavali nekaj spletnih virov o celicah HT-29, ki vam bodo v pomoč pri učenju protokolov za njihovo vzdrževanje, gojenje in transfekcijo.

Protokoli za gojenje celic

Naslednji viri vam bodo v pomoč pri subkultiviranju celic HT-29.

• Gojenje celic HT-29: Ta povezava vam bo zagotovila osnovno znanje o gojišču, odmrzovanju in subkultiviranju celic HT-29.
• Vzdrževanje kultur HT-29: Ta članek vsebuje vse koristne informacije o gojenju in vzdrževanju celic HT-29.

Protokoli transfekcije

Celična linija HT-29 ima odlično učinkovitost transfekcije in se pogosto uporablja v študijah genske ekspresije. Naslednji viri opisujejo možne protokole transfekcije za te celice.

• Transfekcija HT-29: Ta povezava na spletno stran vsebuje podrobni protokol za transfekcijo celic HT-29.
• Transfekcija celične linije HT-29: Ta dokument opisuje protokol transfekcije celične linije HT-29 s plazmidno DNK.

Videoposnetki v zvezi s celično linijo HT-29

Tukaj je nekaj videoposnetkov o gojenju in vzdrževanju te tumorogene celične linije.

• Prenos celic: Ta video prikazuje protokol prenosa celic za adhezivne celične linije.
• Transfekcija celic HT-29: Ta video vas bo vodil skozi metodo transfekcije, ki se uporablja za celice HT-29.

Upamo, da so informacije v tem članku koristne in zadostne za ravnanje s celično linijo HT-29 in njeno vzdrževanje. Če nameravate v svoji študiji uporabiti celice HT-29, jih naročite pri nas.

Sklici

1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles in I. Recio, celična linija HT29. Vpliv bioaktivnih snovi v hrani na zdravje: modeli in vitro in ex vivo, 2015: str. 113–124.
2. Shirafkan, N. et al., mikroRNA-193a-5p zavira migracijo človeških celic raka debelega črevesa HT-29 prek zaviranja poti metastaziranja. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): str. 8775–8783.
3. Khodavirdipour, A., R. Zarean in R. Safaralizadeh, Ocena protirakavega učinka etanolnega izvlečka Syzygium cumini na celično linijo HT-29 debelega črevesa. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: str. 575–581.
4. Fonseca, H.C., et al., Probiotične lastnosti laktobacilov in njihova sposobnost zaviranja adhezije enteropatogenih bakterij na celice Caco-2 in HT-29. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: str. 102–112.
5. Shan, J., et al., Bakteriofagi so bolj virulentni do bakterij v človeških celicah kot v bakterijski kulturi; spoznanja iz celic HT-29. Znanstvena poročila, 2018. 8(1): str. 5091.