Celice HL-60: Osnovni podatki za raziskave akutne mieloidne levkemije
HL-60 je nesmrten človeški levkemijski celični liniji. Široko se uporablja za preučevanje biologije raka in raziskovanje učinkovitosti zdravil proti raku. Poleg tega se lahko uporablja tudi za razumevanje različnih celičnih in molekularnih mehanizmov, vpletenih v proliferacijo in diferenciacijo levkemijskih celic.
- Rastno gojišče
- Glej stran izdelka
- Čas podvojitve
- Glej stran izdelka
- Vrsta rasti
- Adherenten
- Raven biološke varnosti
- BSL-1
- Na voljo pri
- Cytion — Naroči HL-60
- Celična linija HL-60: Izvor in splošne informacije
- Podatki o celični kulturi HL-60
- Celice HL-60: prednosti in slabosti
- Uporaba celične linije HL-60 v raziskavah: od raka do imunologije in še več
- Celična linija HL-60 za vaše raziskave
- Celice HL-60: Raziskovalne publikacije
- Viri o celični liniji HL-60: protokoli, videi in več
- Celična linija HL-60: Pomembna vprašanja in odgovori za raziskovalce
- Sklici
- Pogosta vprašanja
Celična linija HL-60: Izvor in splošne informacije
Celična linija HL-60 služi kot ključni model v hematoloških raziskavah in ponuja poglobljen vpogled v naravo in zdravljenje akutne promielocitne levkemije. Ta blogov prispevek se poglablja v izvor in posebne značilnosti celične linije HL-60 ter osvetljuje njeno ključno vlogo v medicinskih raziskavah in razvoju terapij.
HL-60 je bila prvič vzpostavljena iz levkemijskih celic 36-letne belke, pri kateri je bila diagnosticirana akutna promielocitna levkemija. To pionirsko delo je opravil S.J. Collins s svojo ekipo, kar je pomenilo pomemben preboj, saj je bila HL-60 prva linija celic mieloidne levkemije, ki je bila uspešno izolirana in gojena v suspenziji. Ta dosežek je omogočil številne raziskovalne priložnosti pri preučevanju levkemije in drugih sorodnih bolezni. Glede na fizikalne lastnosti imajo celice HL-60 limfoblastno morfologijo in so znane po tem, da rastejo v suspenziji ter so okrogle oblike. Velikost teh celic je različna, s premeri od 9 do 25 μm, kar odraža njihovo heterogenost. Na genomski ravni je celična linija HL-60 pretežno psevdodiploida, z modalnim številom kromosomov 43. Zanimivo je, da majhen odstotek (6,2 %) celic kaže 2S komponento, kar njihovi genetski sestavi dodaja še eno raven kompleksnosti [1].
Razumevanje teh temeljnih vidikov celic HL-60 ne le izboljšuje naše znanje o levkemiji na celični ravni, ampak podpira tudi tekoče raziskovalne prizadevanje za odkritje novih načinov zdravljenja. V naslednjih poglavjih bomo raziskali, kako so edinstvene lastnosti celične linije HL-60 prispevale k pomembnim napredkom v medicinskih raziskavah.
Podatki o gojenju celic HL-60
Kultiviranje celic HL-60 je preprosto in enostavno. V tem poglavju se boste seznanili z osnovami, kot so: Kakšen je čas podvojitve celic linije HL-60? Ali gre pri HL-60 za adhezivno ali suspenzijsko kulturo? Kakšna je gostota posevka celic linije HL-60? Kateri medij se uporablja za rast HL-60?
Čas podvojitve:
Čas podvojitve za celice HL-60 je približno 36 do 48 ur.
Adhezivna ali suspenzijska:
Celice HL-60 rastejo kot suspenzijske kulture.
Gostota sejanja:
Te celice se pri subkultiviranju posejejo v gostoti 1 x 106 celic/ml, pri začetku nove kulture pa v gostoti 2 x 105 celic/ml.
Rastno gojišče:
Za gojenje celic HL-60 se uporablja gojišče RPMI 1640, ki mu je dodanih 10 % FBS in 2,5 mM L-glutamina. Gojišče je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.
Pogoji rasti:
Celice HL-60 se gojijo v vlažnem inkubatorju pri temperaturi 37 °C in 5 % CO2.
Shranjevanje:
Celice HL-60 se shranjujejo pri temperaturi pod -150 °C ali v plinski fazi tekočega dušika, da se ohrani čim večje število živih celic.
Medij in postopek zamrzovanja:
Za zamrzovanje celic HL-60 se uporabljata zamrzovalna sredstva CM-1 ali CM-ACF. Za zamrzovanje celic HL-60 je priporočljiva metoda počasnega zamrzovanja.
Postopek odmrzovanja:
Zamrznjeno vialo celic HL-60 se hitro premeša v vodni kopeli, nastavljeni na temperaturo 37 °C. Nato se celice centrifugirajo, da se odstrani sredstvo za zamrzovanje. Dodajo se nova gojišča in celice se ponovno suspendirajo, da se jih lahko razporedi v kolbo za rast.
Raven biološke varnosti:
Za ravnanje s kulturami HL-60 se priporoča raven biološke varnosti 1.
Celice HL-60: prednosti in slabosti
Preden začnete delati s katero koli celično linijo, vas morda zanima, kakšne so njene prednosti in slabosti. V tem delu članka bomo obravnavali nekaj prednosti in slabosti uporabe celic HL-60.
Prednosti
Nekaj pomembnih prednosti celične linije HL-60 so:
- Vsestranskost: Celice HL-60 se lahko v ustreznih rastnih pogojih diferencirajo v več vrst celic, vključno z monociti, makrofagi in granulociti. Zaradi tega so primerne za preučevanje celične diferenciacije in drugih celičnih procesov.
- Enostavna gojitev: Celice HL-60 je enostavno gojiti in vzdrževati v suspenzijskih kulturah, kar jih naredi priročno orodje za preučevanje številnih celičnih procesov.
- In vitro model levkemije: Te celice so bile pridobljene od bolnika z akutno mieloidno levkemijo, zato imajo genetske in molekularne značilnosti, podobne tej bolezni.
Slabosti
Pomanjkljivosti celične linije HL-60 so:
- Omejen potencial diferenciacije: HL-60 se lahko v odzivu na dražljaje diferencirajo v nekatere mieloidne linije, vendar je njihov potencial diferenciacije omejen v primerjavi s primarnimi celicami.
Uporaba celične linije HL-60 v raziskavah: od raka do imunologije in še dlje
Celična linija HL-60, pridobljena od bolnika z akutno promielocitno levkemijo, je postala temelj medicinskih raziskav zaradi svoje vsestranskosti in enostavnosti gojenja. Te kulture, ki zahtevajo malo vzdrževanja, so ključne v številnih raziskovalnih aplikacijah, zato želimo raziskati nekatere najpomembnejše med njimi in vključiti širok spekter raziskovalnih ključnih besed, da bi zagotovili celovit pregled.
Raziskave raka
Na področju onkologije je celična linija HL-60 odločilno prispevala k razvoju zapletenosti signalizacije rakavih celic, napredku razumevanja izražanja onkogenov in spodbujanju odkritja novih terapevtskih ciljev. Ta celična linija je del panela celičnih linij levkemije, ki se uporablja za presejanje novih kemoterapevtskih sredstev. Zgovoren primer je uporaba celic HL-60 za ugotavljanje protileukemičnih lastnosti spojin, ekstrahiranih iz morskih organizmov, ki so razkrile tako antiproliferativne kot proapoptotične učinke [2]. Poleg tega je ta celična linija olajšala preučevanje ključnih signalnih poti, kot je JAK/STAT, in njihovega vpliva na proliferacijo levkemijskih celic, hkrati pa omogočila oceno terapevtskega potenciala bioaktivnih spojin, kot je timokinon [3].
Imunologija
Celice HL-60 so robusten in vitro sistem za preučevanje različnih imunskih odzivov, vključno s kompleksnim procesom kemotaksije in regulacijo izražanja ključnih imunskih posrednikov. Te celice se lahko diferencirajo v mieloidne celice, podobne makrofagom in nevtrofilom, kar služi kot vsestranski model za preučevanje vnetnih poti. Na primer, celice, podobne makrofagom, pridobljene iz HL-60, so bile uporabljene za raziskovanje protivnetnega potenciala fitokemikalij iz rodu Brassica [4]. V drugi študiji je diferenciacija celic HL-60 v celice, podobne nevtrofilom, omogočila raziskovalcem, da so identificirali gene, ključne za celično diferenciacijo in povezane imunološke funkcije [5].
Odkrivanje zdravil
Zmožnosti mieloidne diferenciacije HL-60 so bile izkoriščene tudi pri odkrivanju zdravil, zlasti pri identificiranju kandidatov, ki bi lahko potencialno modulirali pot diferenciacije, kar je ključnega pomena pri zdravljenju levkemije. To ponazarjajo študije, ki so uporabile celično linijo HL-60 za oceno protirakavega potenciala naravnih produktov [6].
Poleg tega se celična linija HL-60 uporablja za preučevanje različnih vidikov biologije mieloidnih celic, kot je razumevanje, kako lahko zdravljenje z zdravili, kot je retinoinska kislina, vodi do monocitne diferenciacije, ali kako te celice posnemajo primarne nevtrofile pri ustvarjanju ekstracelularnih pasti. Uporaba modela pri razlagi molekularnih dogodkov hematoloških malignomov se še dodatno razširja z njegovo uporabo v študijah panelov mutacijskih celic, zlasti v okviru analize p53-hotspotov pri levkemiji.
Za tiste, ki raziskujejo celično mehaniko, čas podvojitve HL-60 in njihov odziv na elektroporacijo v mikrofluidnih kanalih, celična linija ponuja zanesljivo platformo za raziskovanje.
Celična linija HL-60 za vaše raziskave
Celice HL-60: Raziskovalne publikacije
Na voljo je več raziskovalnih študij o celicah HL-60. Tukaj smo navedli nekaj pomembnih primerov:
Ta raziskovalni članek predlaga protitumorski učinek spojine Stigmast-5-en-3-ol na celice levkemije HL-60 in celice raka dojke MCF7.
Ta študija opisuje vlogo signalizacije JAK/STAT pri proliferaciji celic HL-60. Poleg tega raziskovalci preučujejo terapevtski potencial spojine timokinona z uporabo te linije levkemijskih celic. Spojina zavira celično proliferacijo in inducira celično smrt z oživljanjem izražanja negativnih regulatorjev kaskade JAK/STAT.
Ta študija je uporabila celice HL-60 za pridobitev modela celic, podobnih makrofagom, za preučevanje protivnetne aktivnosti rastlinskih spojin iz rastlin rodu Brassica.
Ta študija, objavljena v reviji International Immunopharmacology, je z uporabo dimetilsulfoksida razvila posnemovalce nevtrofilnih celic iz celične linije HL-60. Študija je ugotovila, da je gen ERK vpleten v diferenciacijo teh celic.
Ta raziskovalni članek preučuje protirakav potencial rastlinskih polifenolnih spojin, tj. galne kisline in elaginske kisline, na zdravilom občutljive in odporne celice levkemije HL-60.
Celična linija HL-60 Viri: protokoli, videi in več
Na voljo je več spletnih izobraževalnih virov o celični liniji HL-60. Ta razdelek zajema nekaj virov, ki opisujejo gojenje in transfekcijo te celične linije.
Protokoli za gojenje celic
Viri, ki opisujejo metode gojenja celic HL-60, so:
- Razmnoževanje HL-60: Ta dokument vsebuje informacije o subkultiviranju celic HL-60.
- Celična linija HL-60: Ta spletna stran vsebuje osnovne informacije o celicah HL-60 in protokolih, vključno z gojenjem, zamrzovanjem in odmrzovanjem celic.
Protokoli transfekcije
Tukaj je nekaj virov, ki opisujejo metode transfekcije, izbrane za celice HL-60.
- Transfekcija celic HL-60: Ta povezava vsebuje podrobni postopek transfekcije za levkemijske celice HL-60.
- Prehodna transfekcija celic HL-60: Ta dokument vsebuje koristne informacije o celični liniji in podaja podrobni protokol za prehodno transfekcijo celic HL-60.
Videoposnetki v zvezi s celično linijo HL-60
Viri videoposnetkov o celicah HL-60 so zelo omejeni.
- Prenos celic HL-60: Ta video posnetek pojasnjuje protokol za subkultiviranje celic HL-60.
Upamo, da vam bo ta članek zagotovil osnovne informacije o gojenju in vzdrževanju celične linije HL-60. Poleg tega lahko poglobi vaše znanje o prednostih uporabe teh levkemijskih celic v raziskavah. Če nameravate uporabiti to celično linijo, jo naročite pri nas.
Celična linija HL-60: najpomembnejša vprašanja in odgovori za raziskovalce
Celična linija HL-60 je celična linija promielocitne levkemije, pridobljena iz bolnika z akutno promielocitno levkemijo. Ta celična linija se pogosto uporablja v raziskavah za preučevanje diferenciacije mieloidnih celic in izražanja onkogenov.
Retinoinska kislina sproži diferenciacijo v celični liniji HL-60, pri čemer spodbudi celice, da se razvijejo v celice, podobne granulocitom. Ta proces je ključnega pomena za preučevanje mehanizmov, na katerih temelji mieloidna diferenciacija.
Serum je ključna sestavina gojišča za hematopoetske celice, saj zagotavlja bistvene rastne faktorje in hranilne snovi, potrebne za razmnoževanje in ohranjanje celic HL-60 v kulturi.
Da, celična linija HL-60 je sposobna kemotaksije, kar pomeni gibanje celic v odziv na kemične dražljaje. Zaradi tega so primerne za preskuse kemotaksije in razumevanje migracije celic.
Celična linija HL60, ki kaže izražanje celičnih onkogenov, služi kot modelni sistem za raziskovanje regulacije izražanja onkogenov in njihove vloge pri nastanku levkemije.
Celična linija HL-60 je neprecenljiva pri raziskavah na področju celične biologije, zlasti pri preučevanju celičnega cikla, procesov celične diferenciacije in molekularnih dogodkov, ki vodijo v levkemijo.
Nizi levkemijskih celičnih linij omogočajo primerjalne študije različnih levkemijskih celičnih linij, vključno z njihovo genetsko sestavo, profili mutacij, odzivom na zdravila ter molekularnimi potmi, vpletenimi v nastanek levkemije, kot je na primer pot MAPK.
Analitična poročila in potrdila o poreklu je običajno mogoče prenesti s spleta ali zahtevati pri dobavitelju ali v zbirki, ki ponuja celično linijo HL-60, s čimer se raziskovalcem zagotovi, da za svoje raziskave prejmejo preverjene celice brez onesnaževalcev.
Celično linijo HL-60 je mogoče diferencirati, da pridobi lastnosti, podobne primarnim nevtrofilom, vključno z zmožnostjo tvorjenja ekstracelularnih pasti, kar raziskovalcem omogoča, da jo uporabijo kot nadomestni model za preučevanje vedenja in delovanja nevtrofilov.
Celice HL-60 se uporabljajo kot in vitro model za preučevanje akutne promielocitne levkemije, biologije mieloidnih celičnih linij ter vpliva različnih spojin na diferenciacijo in proliferacijo. Uporabljajo se tudi v poskusih, ki preučujejo celične odzive, kot so kemotaksija, izražanje onkogenov in vpliv mutacij na celične procese.
Kratica »HL-60« pomeni »Human Leukemia 60«. Označuje 60. celično linijo, ki je bila ob njenem razvoju vzpostavljena iz bolnikov z levkemijo. »HL« pomeni, da gre za človeške levkemijske celice.
Čas podvojitve celic HL-60 v optimalnih rastnih pogojih znaša približno 36 do 48 ur. Vendar se ta čas lahko spreminja glede na pogoje gojenja in število pasaz celic.
Ko se celice HL-60 obdelajo s forbolom 12-miristatom 13-acetatom (PMA), se običajno diferencirajo v celice, ki spominjajo na makrofage ali monocite. Ta diferenciacija je del raziskovanja poti monocitne diferenciacije in razumevanja mehanizmov diferenciacije mieloidnih celic.
Viri
- Fleck, R., S. Romero-Steiner in M. Nahm, Uporaba celične linije HL-60 za merjenje opsonične sposobnosti protipnevmokoknih protiteles. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): str. 19–27.
- Fernando, I.S. in sod., Apoptotični in antiproliferativni učinki Stigmast-5-en-3-ola iz Dendronephthya gigantea na človeške levkemijske celice HL-60 in človeške celice raka dojke MCF-7. Toxicology in Vitro, 2018. 52: str. 297–305.
- Almajali, B., et al., Timokinon zavira celično proliferacijo in poveča apoptozo levkemijskih celic HL60 prek ponovne ekspresije negativnih regulatorjev JAK/STAT. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): str. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Analiza protivnetnega potenciala bioaktivnih spojin iz rodu Brassica v modelu človeških makrofagom podobnih celic, pridobljenih iz celic HL-60. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: str. 112804.
- Wang, D., et al., ERK sodeluje pri diferenciaciji in delovanju dimetilsulfoksidom induciranih celic, podobnih nevtrofilom HL-60, ki posnemajo vnetne nevtrofile. International Immunopharmacology, 2020. 84: str. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Proti-levkemijska aktivnost bioaktivnih spojin, pridobljenih iz Brassica, v celicah mieloidne levkemije HL-60. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): str. 13400.