Celice HL-60: Osnove raziskav akutne mieloične levkemije

HL-60 je nesmrtna linija človeških levkemičnih celic. Pogosto se uporablja za preučevanje biologije raka in raziskovanje učinkovitosti zdravil proti raku. Poleg tega se lahko uporablja tudi za razumevanje različnih celičnih in molekularnih mehanizmov, ki sodelujejo pri proliferaciji in diferenciaciji levkemičnih celic.

Celična linija HL-60: Izvor in splošne informacije

Celična linija HL-60 služi kot ključni model v hematoloških raziskavah, saj omogoča globok vpogled v naravo in zdravljenje akutne promelične levkemije. V tem prispevku so opisani izvor in posebnosti celične linije HL-60 ter osvetljena njena ključna vloga v medicinskih raziskavah in terapevtskem razvoju.

HL-60 je bila prvič ustvarjena iz levkemičnih celic 36-letne belopolte ženske z diagnozo akutne promelične levkemije. To pionirsko delo je opravil S. J. Collins s svojo ekipo, kar je pomenilo pomemben preboj, saj je bila HL-60 prva celična linija mieloične levkemije, ki so jo uspešno izolirali in gojili v suspenziji. Ta dosežek je omogočil številne raziskovalne možnosti pri preučevanju levkemije in drugih sorodnih bolezni. Kar zadeva fizične značilnosti, imajo celice HL-60 limfoblastno morfologijo in so znane po tem, da rastejo v suspenziji ter so videti okrogle oblike. Velikost teh celic je različna, njihov premer se giblje od 9 do 25 μm, kar kaže na njihovo heterogenost. Na genomski ravni je celična linija HL-60 pretežno pseudodiploidna, z modalnim številom kromosomov 43. Zanimivo je, da ima majhen odstotek celic (6,2 %) komponento 2S, kar njihovi genetski sestavi dodaja še eno raven kompleksnosti [1].

Razumevanje teh temeljnih vidikov celic HL-60 ne le izboljšuje naše znanje o levkemiji na celični ravni, temveč tudi podpira tekoča raziskovalna prizadevanja za odkrivanje novih načinov zdravljenja. V naslednjih razdelkih bomo raziskali, kako so edinstvene lastnosti celične linije HL-60 prispevale k pomembnemu napredku v medicinskih raziskavah.

Tkivo monocelularne levkemije pod mikroskopom.

Informacije o celični kulturi HL-60

Kultivacija celic HL-60 je preprosta in enostavna. V tem razdelku boste spoznali osnove, kot so: Kakšen je čas podvojitve celične linije HL-60? Ali je HL-60 adherentna ali suspenzijska kultura? Kakšna je gostota naselitve celične linije HL-60? Kakšno gojišče se uporablja za rast HL-60?

Čas podvojitve:	Čas podvojitve celic HL-60 je približno 36 do 48 ur.
Adherentne ali v suspenziji:	Celice HL-60 rastejo kot suspenzijske kulture.
Gostota naselitve:	Pri subkulturah se te celice sejejo z gostoto 1 x¹⁰⁶ celic/ml, pri novih kulturah pa z gostoto 2 x¹⁰⁵ celic/ml.
Gojišče za rast:	Za gojenje celic HL-60 se uporablja rastno gojišče RPMI 1640 z dodatkom 10 % FBS in 2,5 mM L-glutamina. Gojišče je treba obnavljati 2 do 3-krat na teden.
Pogoji rasti:	Celice HL-60 gojimo v vlažnem inkubatorju pri temperaturi 37 °C in 5 %_CO2.
Shranjevanje:	HL-60 celice shranjujemo pri temperaturi pod -150 °C ali v parni fazi tekočega dušika, da ohranimo čim večje število celic, ki so sposobne preživetja.
Gojišče za zamrzovanje in postopek:	Za zamrzovanje celic HL-60 se uporabljajo mediji za zamrzovanje CM-1 ali CM-ACF. Za zamrzovanje celic HL-60 je najprimernejša metoda počasnega zamrzovanja.
Postopek odtaljevanja:	Zamrznjeno vialo s celicami HL-60 hitro premešamo v vodni kopeli, nastavljeni na temperaturo 37 °C. Nato celice centrifugiramo, da odstranimo medij za zamrzovanje. Dodamo novo gojišče in celice ponovno suspendiramo ter jih razporedimo v erlenmajerico za rast.
Raven biološke varnosti:	Za ravnanje s kulturami HL-60 se priporoča raven biološke varnosti 1.

Suspenzijske celice HL-60 pri 10-kratni in 20-kratni povečavi.

Celice HL-60: Prednosti in slabosti

Preden začnete delati s katero koli celično linijo, se boste morda želeli seznaniti z njenimi prednostmi in slabostmi. V tem poglavju članka bo predstavljenih nekaj prednosti in slabosti uporabe celic HL-60.

Prednosti

Nekaj pomembnih prednosti celične linije HL-60 je:

Vsestranskost: celice HL-60 se lahko pod ustreznimi pogoji rasti diferencirajo v več vrst celic, vključno z monociti, makrofagi in granulociti. Zato so uporabne za preučevanje celične diferenciacije in drugih celičnih procesov
Enostavno gojenje: HL-60 je enostavno gojiti in vzdrževati v suspenzijskih kulturah, zato so priročno orodje za preučevanje več celičnih procesov
In vitro model levkemije: Te celice so bile pridobljene od bolnika z akutno mieloično levkemijo, zato imajo genetske in molekularne značilnosti, podobne tej bolezni

Slabosti

Pomanjkljivosti celične linije HL-60 so:

Omejen diferenciacijski potencial: HL-60 se lahko diferencirajo v nekatere mieloidne linije kot odgovor na dražljaje, vendar je njihov diferenciacijski potencial v primerjavi s primarnimi celicami omejen.

Uporaba celične linije HL-60 v raziskavah: Od raka do imunologije in še dlje

Celična linija HL-60, pridobljena od bolnika z akutno promelično levkemijo, je zaradi svoje vsestranskosti in enostavnosti gojenja postala temelj medicinskih raziskav. Te kulture, ki ne potrebujejo veliko vzdrževanja, so ključne za številne raziskovalne aplikacije, mi pa želimo raziskati nekatere najpomembnejše in vključiti širok spekter ključnih raziskovalnih besed, da bi zagotovili izčrpen pregled.

Raziskave raka

Na področju onkologije je celična linija HL-60 odločilno prispevala k razkrivanju zapletenosti signalizacije rakavih celic, napredku našega razumevanja izražanja onkogenov in k odkrivanju novih terapevtskih ciljev. Ta celična linija je del panela levkemičnih celičnih linij, ki se uporablja za preverjanje novih kemoterapevtikov. Eden od pomenljivih primerov je uporaba celic HL-60 za ugotavljanje protilevkemičnih lastnosti spojin, pridobljenih iz morskih organizmov, ki so razkrile tako antiproliferativne kot proapoptotične učinke [2]. Poleg tega je celična linija omogočila preučevanje ključnih signalnih poti, kot so JAK/STAT, in njihovega vpliva na proliferacijo levkemičnih celic ter oceno terapevtskih obetov bioaktivnih spojin, kot je timokinon [3].

Imunologija

Celice HL-60 so zanesljiv in vitro sistem za preučevanje različnih imunskih odzivov, vključno s kompleksnim procesom kemotaksije in uravnavanjem izražanja ključnih imunskih mediatorjev. Te celice se lahko diferencirajo v mieloične celice, podobne makrofagom in nevtrofilcem, in služijo kot vsestranski model za raziskovanje vnetnih poti. Makrofagom podobne celice, pridobljene iz HL-60, so bile na primer uporabljene za raziskovanje protivnetnega potenciala fitokemikalij iz rodu Brassica [4]. V drugi študiji je diferenciacija celic HL-60 v nevtrofilom podobne celice raziskovalcem omogočila identifikacijo genov, ki so ključni za celično diferenciacijo in z njo povezane imunske funkcije [5].

Odkrivanje zdravil

Sposobnost mieloidne diferenciacije celic HL-60 je bila uporabljena tudi pri odkrivanju zdravil, zlasti pri iskanju kandidatov, ki bi lahko modulirali pot diferenciacije, ki je ključna pri zdravljenju levkemije. To ponazarjajo študije, ki so celično linijo HL-60 uporabile za oceno protirakavega potenciala naravnih proizvodov [6].

Poleg tega se celična linija HL-60 uporablja za preučevanje različnih vidikov biologije mieloidnih celičnih linij, na primer za razumevanje, kako lahko zdravljenje s sredstvi, kot je retinojska kislina, privede do diferenciacije monocitov ali kako te celice posnemajo primarne nevtrofilce pri ustvarjanju zunajceličnih pasti. Uporaba modela pri pojasnjevanju molekularnih dogodkov pri hematoloških malignomih se je še razširila z njegovo uporabo v študijah mutacijskih celičnih panelov, zlasti v okviru analize vročih točk levkemije p53.

Za tiste, ki raziskujejo celično mehaniko, čas podvojitve HL-60 in njihov odziv na elektroporacijo v mikrofluidnih kanalih, ta celična linija ponuja zanesljivo platformo za raziskave.

Celična linija HL-60 za vaše raziskave

430,00 €*

Vsebina: 1.5 milliliter

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300209

Celice HL-60: Raziskovalne objave

Na voljo je več raziskovalnih študij o celicah HL-60. V nadaljevanju navajamo nekaj pomembnih primerov:

Apoptotični in antiproliferacijski učinki stigmast-5-en-3-ola iz Dendronephthya gigantea na celice človeške levkemije HL-60 in človeškega raka dojke MCF-7

V tem raziskovalnem članku je bil predlagan protitumorski učinek spojine Stigmast-5-en-3-ol na celice levkemije HL-60 in celice raka dojke MCF7.

Timokinon zavira proliferacijo celic in povečuje apoptozo levkemičnih celic HL60 s ponovno ekspresijo negativnih regulatorjev JAK/STAT

Ta študija opisuje vlogo signalizacije JAK/STAT pri proliferaciji celic HL-60. Poleg tega raziskovalci raziskujejo terapevtski potencial spojine timokinon z uporabo te celične linije levkemije. Spojina zavira proliferacijo celic in povzroča celično smrt z oživitvijo izražanja negativnih regulatorjev kaskade JAK/STAT.

Analiza protivnetnega potenciala bioaktivnih spojin Brassica v modelu človeških makrofagom podobnih celic, pridobljenih iz celic HL-60

V tej študiji so bile celice HL-60 uporabljene za izpeljavo makrofagom podobnega celičnega modela, iz katerega je bilo raziskano protivnetno delovanje rastlinskih spojin Brassica.

ERK sodeluje pri diferenciaciji in delovanju nevtrofilom podobnih celic HL-60, ki posnemajo vnetne nevtrofilce in so inducirane z dimetilsulfoksidom

V tej študiji, objavljeni v reviji International Immunopharmacology, so iz celične linije HL-60 z uporabo dimetilsulfoksida razvili nevtrofilom podobne celice. Študija je pokazala, da je pri diferenciaciji teh celic vključen gen ERK.

Protitumorski učinki izbranih rastlinskih polifenolov, galične in elagične kisline, na občutljive in večkratno odporne celice levkemije HL60

Ta raziskovalna naloga raziskuje protirakavi potencial rastlinskih polifenolnih spojin, tj. galne in elagične kisline, na celice levkemije HL-60, občutljive na zdravila in odporne proti njim.

Celična linija HL-60 Viri: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo

O celični liniji HL-60 je na voljo več spletnih izobraževalnih virov. V tem razdelku je zajetih nekaj virov, ki opisujejo gojenje in transfekcijo te celične linije.

Protokoli za gojenje celic

Viri, ki opisujejo metode gojenja celic HL-60, so:

Razmnoževanje HL-60: v tem dokumentu so na voljo informacije o subkultiviranju celic HL-60.
Celična linija HL-60: HL-60: - celična linija HL-60: - celična linija HL-60: Ta spletna stran vsebuje osnovne informacije o celicah HL-60 in protokolih, vključno s kultivacijo, zamrzovanjem in odmrzovanjem celic.

Protokoli za transfekcijo

Tukaj je nekaj virov, ki opisujejo metode transfekcije, uporabljene za celice HL-60.

Transfekcija celic HL-60: Ta povezava vsebuje podroben postopek transfekcije celic levkemije HL-60.
Prehodna transfekcija celic HL-60: Ta dokument vsebuje koristne informacije o celični liniji in podroben protokol za prehodno transfekcijo celic HL-60.

Videoposnetki, povezani s celično linijo HL-60

Video viri o celicah HL-60 so zelo omejeni.

Prehajanje celic HL-60: V tem videoposnetku je pojasnjen protokol za subkultiviranje celic HL-60.

Pričakujemo, da vam bo ta članek zagotovil osnovne informacije o gojenju in vzdrževanju celične linije HL-60. Poleg tega lahko izboljša vaše znanje o prednostih uporabe teh levkemičnih celic v raziskavah. Če nameravate uporabiti to celično linijo, jo naročite pri nas.

Celična linija HL-60: Pogosta vprašanja in odgovori za raziskovalce

Reference

Fleck, R., S. Romero-Steiner in M. Nahm, Uporaba celične linije HL-60 za merjenje opsonske sposobnosti pnevmokoknih protiteles. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
Fernando, I.S., et al., Apoptotični in antiproliferativni učinki stigmast-5-en-3-ola iz Dendronephthya gigantea na celice človeške levkemije HL-60 in človeškega raka dojke MCF-7. Toxicology in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
Almajali, B., et al., Thymoquinone suppresses cell proliferation and enhances apoptosis of HL60 leukemia cells through re-expression of JAK/STAT negative regulators. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
Ruiz-Alcaraz, A.J., et al. analiza protivnetnega potenciala bioaktivnih spojin Brassica v modelu človeških makrofagom podobnih celic, pridobljenih iz celic HL-60. Biomedicina in farmakoterapija, 2022. 149: p. 112804.
Wang, D., et al., ERK je vključen v diferenciacijo in delovanje nevtrofilom podobnih celic HL-60, ki posnemajo vnetne nevtrofilce, induciranih z dimetilsulfoksidom. Mednarodna imunofarmakologija, 2020. 84: p. 106510.
Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Anti-Leukemic Activity of Brassica-Derived Bioactive Compounds in HL-60 Myeloid Leukemia Cells. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.