Celice HK-2 - Raziskovanje delovanja in patologije ledvic s celicami HK-2 v raziskavah ledvic

HK-2 je imortalizirana linija epitelijskih celic človeških ledvic, ki se pogosto uporablja v toksikoloških raziskavah. Raziskovalci ocenjujejo učinke okoljskih toksinov na te ledvične celice. Poleg tega celice HK-2 uporabljajo tudi za raziskovanje bolezni ledvic in njihovih osnovnih mehanizmov.

V tem članku bodo pojasnjene skoraj bistvene informacije o celicah HK-2, vključno z njihovimi splošnimi značilnostmi, pogoji za gojenje celic, uporabo v raziskavah in še veliko več. Izvedeli boste naslednje:

Celice HK-2: Izvor in splošne značilnosti
Celična linija HK-2: Informacije o gojenju
Prednosti in omejitve celic HK-2
Uporaba celične linije HK-2 v raziskavah
Celice HK-2: Raziskovalne publikacije
Viri za celično linijo HK-2: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo

1.celice HK-2: HK-2: izvor in splošne značilnosti

Izvor in splošne značilnosti celične linije je nujno poznati za pravilno ravnanje, vzdrževanje in uporabo celične linije. V tem poglavju članka bo obravnavano naslednje: Kaj so celice HK-2 v človeški ledvici 2? Kakšna je vloga HK2? Kaj so celice HK2? Kakšen je izvor celične linije HK-2? Kakšna je velikost in morfologija celic HK-2?

Celice človeške ledvice 2 (HK-2) so vrsta proksimalnih tubularnih celic, ki izvirajo iz normalnega ledvičnega tkiva odraslega Evropejca. Celična linija HK-2 je bila ustvarjena s transfekcijo ledvičnih celic z rekombinantnim retrovirusom, ki vsebuje gene E6/E7 človeškega papiloma virusa 16. Ta poskus je povzročil imortalizacijo in vzpostavitev neprekinjeno rastoče linije epitelijskih celic ledvic HK-2.
Celice HK-2 imajo epitelijsko morfologijo.
Velikost celic HK-2 se giblje med 17,4 in 18,6 µm v premeru. Povprečni premer je 18,2 µm [1].

Človeške zdrave ledvične celice pod mikroskopom.

2.celična linija HK-2: Informacije o gojenju

Informacije o gojenju celične linije človeške ledvice 2 so vam lahko v veliko pomoč pred delom z njo. V tem delu članka so navedene nujne informacije o gojenju celic HK-2. Spoznali boste: Ali so celice HK-2 adherentne? Kakšen je čas podvojitve celic HK-2? Kakšno gojišče se uporablja za gojenje celic HK-2?

Ključne točke za gojenje celic HK-2

Čas podvojitve populacije:	Čas podvojitve celic HK-2 se giblje med 47,3 in 61,7 ure.
Prilepljene ali v suspenziji:	HK-2 je adherentna linija ledvičnih epitelijskih celic.
Razmerje subkultiviranja:	Celice HK-2 se subkultivirajo v razmerju 1:2 do 1:4. Adherentne celice HK-2 speremo z 1 x PBS in jih po dodatku raztopine akutase inkubiramo pri sobni temperaturi 8 do 10 minut. Disociiranim celicam dodamo gojišče in jih centrifugiramo. Zbrane celice previdno resuspendiramo in prelijemo v nove bučke za gojenje.
Rastno gojišče:	Gojišče za celično linijo keratinocitov, ki vsebuje 10 % fetalnega govejega seruma, 0,05 mg/ml ekstrakta goveje hipofize (BPE) in 5 ng/ml epidermalnega rastnega faktorja (EGF), je idealno gojišče za celice HK-2. Medij je treba zamenjati vsake 2 do 3 dni na teden.
Pogoji rasti:	Celične linije človeške ledvice 2 hranimo v vlažnem inkubatorju s 5-odstotnim dovajanjem CO2 pri 37 °C.
Shranjevanje:	Zamrznjene celice hranimo v parni fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C v zamrzovalniku z zelo nizko temperaturo.
Postopek zamrzovanja in medij:	CM-1 ali CM-ACF sta idealna za zamrzovanje celic HK-2. Na kratko, izbrana je metoda počasnega zamrzovanja, ki omogoča le 1 stopinjo Celzija na minuto padca temperature in ščiti celice pred kakršnim koli šokom.
Postopek odtaljevanja:	Zamrznjene celice odmrznemo v vodni kopeli, nastavljeni na temperaturo 37 stopinj Celzija. Tem celicam dodamo sveže gojišče in jih ponovno suspendiramo. Nato se celice prenesejo v novo bučko z gojiščem. Po 24 urah se gojišče zamenja, da se odstranijo sestavine zamrzovalnega gojišča.
Raven biološke varnosti:	HK-2 celične kulture se vzdržujejo v laboratorijih na 1. stopnji biološke varnosti.

Celice HK-2, ki rastejo v otočkih, pri 10-kratni in 20-kratni povečavi.

3.prednosti in omejitve celic HK-2

HK-2 je pogosto uporabljena linija epitelijskih celic človeških proksimalnih tubulov. Tako kot druge celične linije ima tudi ta nekaj prednosti in omejitev. V tem razdelku bodo obravnavane nekatere ključne prednosti in slabosti celične linije HK 2 za človeške ledvice.

Prednosti

Glavne prednosti celične linije HK-2 so:

Dobro karakterizirana	Celična linija HK-2 je podrobno opisana glede morfologije, velikosti in genoma. Na teh normalnih ledvičnih celicah so bile opravljene številne raziskave.
Imortalizirane	HK-2 je neprekinjena celična linija s podaljšano življenjsko dobo, ki omogoča razmnoževanje skozi več prehodov. Ta lastnost zagotavlja stalno oskrbo celic za laboratorijske poskuse.
Značilnosti epitelija proksimalnih kanalčkov	Celice HK-2 imajo dobro diferenciran fenotip, značilen za celice proksimalnih kanalčkov (PTC), ki jih najdemo v človeških ledvicah. Zaradi te edinstvene lastnosti so celice HK-2 dragocen in vitro model za preučevanje fiziologije ledvic, celičnih procesov in odzivov na različne dražljaje.

Omejitve

Navajamo nekaj omejitev celične linije HK-2:

In vitro model

HK-2 služi kot in vitro model normalnih ledvičnih celic, zlasti ima značilnosti epitelijskih celic proksimalnih tubulov. Vendar morda ne posnema v celoti kompleksnosti človeškega ledvičnega tkiva in mikrookolja, ki ga najdemo in vivo.

4.uporaba celične linije HK-2 v raziskavah

Celična linija HK-2 ima številne možnosti uporabe v toksikoloških raziskavah. V nadaljevanju smo obravnavali nekatere posebne in pomembne raziskovalne uporabe te linije človeških proksimalnih tubularnih celic.

Fiziologija ledvic : celice HK-2 se pogosto uporabljajo za preučevanje normalne fiziologije in delovanja ledvic. Raziskovalci uporabljajo te epitelne celice proksimalnih kanalčkov za raziskovanje ionskih kanalov, transportnih procesov in drugih celičnih mehanizmov, ki uravnavajo homeostazo ledvic. Raziskovalci so na primer preučevali vlogo kanalov TRPC6 (Transient Receptor Potential Channel 6) pri (+)-konokarpanu (CNCP), neolignanu, ki povzroči celično smrt v epitelnih celicah ledvic HK-2 [2].
Bolezni ledvic: HK 2 se uporablja za raziskovanje različnih bolezni ledvic, tj. akutne poškodbe ledvic in diabetične nefropatije, ter njihovih osnovnih celičnih in molekularnih mehanizmov. Z raziskavami je bilo na primer ugotovljeno, da so ravni metilacije beljakovine klotho povezane s poškodbo ledvic. Z zmanjšanjem metilacije promotorja gena klotho lahko povečamo njegovo izražanje in ublažimo ledvično poškodbo, povzročeno pri diabetičnih miših db/db in celicah HK-2, obdelanih z visoko vsebnostjo glukoze [3].
Toksikološke študije: Celice HK-2 so odlično raziskovalno orodje za ocenjevanje možnih učinkov različnih zdravil, kemikalij in okoljskih onesnaževalcev. Študije lahko raziskovalcem pomagajo pri ocenjevanju varnosti zdravil in stranskih učinkov na ledvične celice. Kot je študija, objavljena leta 2022, ki je ocenjevala potencialne učinke polisaharidov in vodnega izvlečka naravne rastline Polygonatumkingianum (PK) na nefrotoksičnost, povzročeno z uranom, v celicah HK-2. Ugotovili so, da ima PK zaščitne učinke in preprečuje zastrupitev z uranom v ledvičnih celicah [4].

650,00 €*

Vsebina: 1.5 milliliter

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 305021

5.celice HK-2: Raziskovalne publikacije

V nadaljevanju je navedenih nekaj zanimivih raziskovalnih publikacij, v katerih so predstavljene ledvične epitelijske celice HK-2.

CircHIPK3 ublaži toksičnost visoke glukoze za človeške ledvične tubularne epitelijske celice HK-2 z regulacijo miR-326/miR-487a-3p/SIRT1

Ta študija v reviji Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) predlaga, da lahko krožna RNK HIPK3 zmanjša zaviranje proliferacije celic HK-2, ki ga povzroči toksičnost visoke glukoze. Poleg tega lahko z uravnavanjem kaskade miR-326/miR-487a-3p/SIRT1 zavira celično smrt.

Diferencialni mehanizem toksičnosti nanodelcev zlata v celicah ledvičnih proksimalnih tubulov HK-2 in celicah karcinoma 786-0

V tej raziskovalni objavi v reviji Nanomedicine (2020) so bili ocenjeni različni mehanizmi toksičnosti zlatih nanodelcev (AuNPs) v celicah raka 786-0 in epitelijskih celicah proksimalnih kanalčkov HK-2.

Toksičnost, ki jo povzroči visoka vsebnost glukoze v celicah HK-2, je mogoče ublažiti z zaviranjem miRNA-320c

Ta članek je bil objavljen v reviji Renal Failure (2022). Ugotovitve navajajo, da lahko mikroRNA-320c zmanjša toksičnost, povzročeno z visoko glukozo, v ledvičnih celicah (HK-2) s ciljanjem na PTEN in zaviranjem signalizacije PI3K/AKT.

Eksosomi, pridobljeni iz mezenhimskih matičnih celic, omilijo epitelno-mezenhimski prehod celic HK-2

V tej študiji v reviji Tissue Engineering Part A (2022) je bilo predlagano, da eksosomi, pridobljeni iz mezenhimskih matičnih celic, preprečujejo epitelijsko-mezenhimski prehod ledvičnih celic HK-2.

Lncrna TapSAKI spodbuja vnetno poškodbo v celicah HK-2 in iz urina izpeljano sepso povzročeno poškodbo ledvic

V članku v reviji Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) je navedeno, da lncrna TapSAKI z uravnavanjem signalne poti mikroRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB povečuje vnetni odziv in celično smrt celic HK-2.

6.viri za celično linijo HK-2: Vir virov: protokoli, videoposnetki in drugo

Znana je celična linija HK-2. Tukaj je nekaj virov, ki opisujejo protokol gojenja celic HK-2.

Kultura celic HK-2: Ta spletna stran je obogatena z informacijami o celični kulturi HK-2. Na primer vsebuje recept za celično gojišče HK-2, protokol pasažiranja ter protokol za ravnanje s proliferativnimi in kriokonzerviranimi kulturami ter njihovo vzdrževanje.
Prehajanje celic: Ta videoposnetek vam bo pomagal pri učenju splošnega protokola delitve ali pasažiranja za adherentne celične linije.

Reference

Handl, J., et al., Vpliv ponavljajočega se pasažiranja na občutljivost človeških proksimalnih tubularnih celic HK-2 na toksične spojine. Physiological Research, 2020. 69(4): p. 731.
Yang, G., et al., Activation of TRPC6 channels contributes to (+)-conocarpan-induced apoptotic cell death in HK-2 cells (Aktivacija kanalov TRPC6 prispeva k apoptotični celični smrti, ki jo povzroči (+)-konokarpan). Food and Chemical Toxicology, 2019. 129: p. 281-290.
Yang, X.H., et al., EGCG attenuates renal damage via reversing klotho hypermethylation in diabetic db/db mice and HK-2 cells (EGCG omili poškodbe ledvic z odpravo hipermetilacije klotho pri diabetičnih miših db/db in celicah HK-2 ). Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020. 2020.
Li, W., et al., Protective effects of Polygonatum kingianum polysaccharides and aqueous extract on uranium-induced toxicity in human kidney (HK-2) cells. International Journal of Biological Macromolecules, 2022. 202: p. 68-79.