Celice DU-145 – izčrpen vodnik za raziskovalce
DU-145 je celična linija človeškega karcinoma prostate, ki se široko uporablja v biomedicinskih raziskavah. Te celice služijo kot neprecenljiv model za preučevanje biologije raka prostate, testiranje zdravil in razvoj. Poleg tega raziskovalci uporabljajo celice DU-145 tudi za preučevanje molekularnih mehanizmov, ki so osnova za razvoj, rast in napredovanje raka prostate.
- Rastno gojišče
- EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) z dodatki, tj. 10 % fetalnega govejega seruma (FBS), 2 mM L-glutamina, 2,2 g/l NaHCO3 in EBSS. Gojišče se obnavlja 2- do 3-krat na teden.
- Čas podvojitve
- Čas podvojitve DU-145 je med 30 in 40 urami.
- Vrsta rasti
- DU-145 je adhezivna celična linija.
- Raven biološke varnosti
- BSL-1
- Na voljo pri
- Cytion — Naroči DU-145
Splošne informacije in izvor celične linije DU-145
Pred začetkom dela s celično linijo je bistveno razumeti njene temeljne lastnosti in izvor. Ta poglavje vam bo omogočilo celovito razumevanje značilnosti in izvora celične linije DU-145. Spoznali boste: Kaj so rakave celice DU145? Kakšna je morfologija celic DU145? Kakšna je razlika med PC-3 in DU145?
- DU-145, celična linija človeškega raka prostate, izvira iz možganov belca (starega 69 let) z metastaziranim karcinomom prostate. Te celice so prvič deponirali K.R. Stone in sodelavci leta 1978.
- Podobno kot celice raka prostate PC-3 tudi DU-145 izražajo androgene receptorje. Vendar pa te celice, ko so izpostavljene zdravljenju z androgenimi ligandi, ne kažejo nobene aktivnosti genov, ki se odzivajo na androgene receptorje, zato veljajo za androgeno neodvisne celice.
- Celice DU-145 imajo epitelijsko morfologijo.
- Celice DU-145 so hipotriploide in imajo modalno število kromosomov 64. Kažejo več marker kromosomov, kot so del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) in del (9) (p11).
PC-3 proti DU145
Obe liniji celic raka prostate sta neodvisni od androgenih receptorjev. Razlikujeta se v smislu tumorigenega in metastaznega potenciala. Ko se injicira v imunokompromitirano miško, linija celic PC-3 tvori visoko metastazni adenokarcinom stopnje IV. Nasprotno pa se iz celične linije DU-145 razvije rak prostate z zmernim metastaznim potencialom [1].
Gojenje celic DU-145
Celična linija DU-145 se pogosto uporablja v raziskovalnih laboratorijih za raka prostate. Za enostavno in učinkovito gojenje celic se morate seznaniti z naslednjimi ključnimi točkami. Ta poglavje vsebuje informacije o gojišču DU145, času podvojitve, pogojih za gojenje celic in protokolih.
Ključne točke za gojenje celic DU-145
Čas podvojitve populacije:
Čas podvojitve DU-145 je med 30 in 40 urami.
Adherente ali v suspenziji:
DU-145 je adhezivna celična linija.
Gostota sejanja:
Celice DU-145 se sejejo pri priporočeni gostoti 2 x 104 celic/cm2. Pri tej gostoti celice v skoraj 4 dneh tvorijo konfluentni monosloj. Za sejanje se celice operejo z 1 x fosfatnim pufrom in inkubirajo s pasážno raztopino Accutase. Po 8 do 10 minutah inkubacije pri sobni temperaturi se celicam doda svež gojišče in se centrifugirajo. Zbrani celični pelet se previdno ponovno suspendira, celice pa se prelijejo v nove gojišče za rast.
Gojilno sredstvo:
EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) z dodatki, tj. 10 % fetalnega govejega seruma (FBS), 2 mM L-glutamina, 2,2 g/l NaHCO3 in EBSS. Gojišče se obnavlja 2- do 3-krat na teden.
Pogoji rasti:
Kulture DU-145 se hranijo v vlažnem inkubatorju pri 37 °C z 5 % CO2.
Shranjevanje:
Celice DU-145 se shranjujejo v plinski fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku, da se ohrani njihova vitalnost za daljše obdobje.
Postopek zamrzovanja in gojišče:
Za celice raka prostate DU-145 se priporočata zamrzovalna sredstva CM-1 ali CM-ACF. Za zamrzovanje celic se izbere metoda počasnega zamrzovanja, ki omogoča postopno zniževanje temperature za 1 °C. To prepreči šok celic in pomaga ohraniti njihovo vitalnost.
Postopek odmrzovanja:
Zamrznjene viale s celicami DU-145 se hitro odmrznejo v vodni kopeli pri 37 °C v času od 40 do 60 sekund. Nato se celicam doda gojišče in se centrifugirajo, da se odstranijo sestavine sredstva za zamrzovanje. Pridobljene celice se ponovno suspendirajo v gojišču in se vlijejo v kolbo za rast. Obnova po zamrzovanju traja skoraj 24 ur.
Raven biološke varnosti:
Za gojenje celične linije DU145, neodvisne od androgenih receptorjev, so potrebne nastavitve ravni biološke varnosti 1.
Celična linija DU-145: prednosti in omejitve
Tako kot druge celične linije ima tudi celična linija raka prostate DU-145 svoje prednosti in slabosti. Te lastnosti vam lahko pomagajo pri odločitvi o njeni uporabi v vaših raziskavah. Glavne prednosti in slabosti celic DU-145 so navedene spodaj.
Prednosti
Prednosti celic DU-145 so:
Tumorigenost
DU-145 je agresivna tumorigenična celična linija raka prostate z zmernim metastaznim potencialom. Uporablja se za razvoj modela ksenotransplantata DU145 pri imunokompromitiranih miših za preučevanje biologije, razvoja in rasti raka prostate in vitro in in vivo.
Neodvisnost od androgenih receptorjev
Celice raka prostate DU-145 so neodvisne od androgenih receptorjev. Za rast niso odvisne od androgenov in se na celični in molekularni ravni ne odzivajo na zdravljenje z androgeni. Idealne so za raziskovanje mehanizmov hormonsko neodvisnega raka prostate.
Omejitve
Omejitve celične linije DU-145 so:
Model in vitro
DU-145 je in vitro celični model metastatskega karcinoma prostate, zato morda ne odraža v celoti kompleksnosti primarnih tumorjev prostate. Poleg tega morda ne zajema vseh vrst in podvrst raka prostate zaradi specifičnih značilnosti, kot je neodvisnost od androgenih receptorjev.
Raziskovalne aplikacije celic DU-145
Celična linija raka prostate DU-145 ima široko paleto raziskovalnih uporab. Tukaj je navedenih nekaj obetavnih uporab.
- Biologija raka prostate: DU-145 je relevanten model za preučevanje biologije raka prostate. Raziskovalci te celice uporabljajo za preučevanje molekularnih mehanizmov, ki poganjajo razvoj, napredovanje in metastaze raka. Poleg tega se preučujejo tudi genetske spremembe, ki so pogosto povezane z rakom prostate. Raziskava, izvedena leta 2021, je preučevala celice DU-145 z namenom identificirati potencialne biomarkere za učinkovite diagnostične in terapevtske implikacije. Študija je predlagala aktin gama 1 (ACTG1) kot potencialni biomarker raka prostate, saj spodbuja proliferacijo rakavih celic in regulira metastaze prek aktivacije poti MAPK/ERK [2].
- Preskušanje in razvoj zdravil: Celice raka prostate DU-145 se pogosto uporabljajo za preskušanje citotoksičnosti in učinkovitosti potencialnih zdravil proti raku. To raziskovalcem pomaga pri odkrivanju novih zdravil, razumevanju odpornosti proti zdravilom in osnovnih molekularnih mehanizmov. Študija, izvedena leta 2022, je raziskovala citotoksični učinek smolne mešanice, propolisa ali čebeljega lepila, v celičnih linijah raka prostate PC-3 in DU-145. Študija je pokazala učinke te naravne snovi na zaviranje rasti v obeh celičnih linijah in predlagala njen protirakav potencial [3]. Leta 2019 je bila izvedena še ena študija, ki je preučevala antiproliferativne učinke naravne spojine, betaina, v celicah raka prostate DU-145. Raziskava je pokazala, da betain izvaja antiproliferativne aktivnosti s povečanjem oksidativnega stresa, ki posreduje celično smrt in vnetje v celicah DU-145 [4].
5. Raziskovalne publikacije o celicah DU-145
V nadaljevanju so navedene nekatere raziskovalne publikacije o celični liniji DU-145.
Ta študija, objavljena v reviji Biological Trace Element Research leta 2020, je pokazala, da cinkov sulfat (ZnSO4) v celicah DU-145 deluje antiproliferativno prek indukcije apoptoze, morfoloških sprememb, oksidativne poškodbe in vnetja.
Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji BMC Complementary Medicine and Therapies leta 2020. Ta študija je raziskovala citotoksični in antimetastatični potencial rastline, izvlečka lubja Annona muricata L., in njenega bioaktivnega annonacina v celični liniji DU-145.
Ta objava v reviji IUBMB Life (2019) je predlagala, da interakcija dolgega nekodirajočega RNA LOXL1-AS1 z miR-let-7a-5p in potjo EGFR uravnava odpornost na doksorubicin v celicah raka prostate DU-145.
Ta članek v reviji Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) navaja, da zmanjšanje izražanja gena Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) povzroča smrt celic DU-145 in zavira prehod iz epitelijskega v mezenhimalni tip (EMT) prek aktivacije poti Pyk2/MKK7.
Kasticin zavira migracijo in invazijo celic raka prostate DU 145 prek signalnih poti Ras/Akt/NF-κB
Ta študija v reviji Journal of Food Biochemistry (2019) je predlagala, da kasticin, polimetoksiflavon, zavira migracijo in invazijo celic DU-145 z regulacijo signalizacije Ras/Akt/NF-κB.
Viri za celično linijo DU-145: protokoli, videi in več
Na voljo je veliko spletnih virov o celični liniji raka prostate DU-145. V tem poglavju bomo navedli nekaj virov, ki pojasnjujejo ravnanje, vzdrževanje in protokol transfekcije za te celice:
- Transfekcija DU-145: Ta video vodič je podrobna navodila za učenje protokola transfekcije celic DU-145.
Protokol za gojenje celic DU-145 je naveden tukaj.
- Subkultiviranje DU-145: Ta povezava vam bo pomagala pri učenju protokola za subkultiviranje celic DU-145.
- Celice DU-145: Ta spletna stran vsebuje veliko koristnih informacij o celični liniji DU-145, vključno z medijem DU145, protokolom za subkultiviranje ter ravnanjem s proliferativnimi in krioprezerviranimi kulturami.
Sklici
- Lima, A.R., et al., Razlikovanje med eksometabolomom normalnih in rakavih celic človeške prostate z GC-MS. Znanstvena poročila, 2018. 8(1): str. 5539.
- Xiao, L., et al., Utišanje ekspresije ACTG1 inducira epitelno-mezenhimalno prehodno stanje raka prostate prek signalne poti MAPK/ERK. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): str. 1445–1455.
- Gogacz, M., et al., Protirakavi učinki izvlečkov propolisa, pridobljenih s postopkom hladne separacije, na celične linije raka prostate PC-3 in DU-145. Molecules, 2022. 27(23): str. 8245.
- Kar, F., et al., Betain zavira celično proliferacijo s povečanjem apoptoze, posredovane z oksidativnim stresom, in vnetja v človeški celični liniji raka prostate DU-145. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: str. 871–881.