Celice DU-145 - izčrpen vodnik za raziskovalce

DU-145 je celična linija človeškega karcinoma prostate, ki se pogosto uporablja v biomedicinskih raziskavah. Te celice služijo kot neprecenljiv model za preučevanje biologije raka prostate, testiranje in razvoj zdravil. Poleg tega raziskovalci uporabljajo celice DU-145 tudi za raziskovanje molekularnih mehanizmov, ki so podlaga za razvoj, rast in napredovanje raka prostate.

V tem članku boste dobili dragocen vpogled v celice raka prostate DU-145. Zlasti bo zajemal:

Splošne informacije in izvor celične linije DU-145
Gojenje celic DU-145
Celično linijo DU-145: Prednosti in omejitve
Raziskovalne aplikacije celic DU-145
Raziskovalne publikacije s celicami DU-145
Viri za celično linijo DU-145: Viri, protokoli, videoposnetki in drugo

1. Splošne informacije in izvor celične linije DU-145

Pred začetkom dela s celično linijo je treba razumeti njene temeljne lastnosti in izvor. V tem razdelku boste celovito spoznali lastnosti in izvor celične linije DU-145. Spoznali boste: Kaj so rakave celice DU145? Kakšna je morfologija celic DU145? Kakšna je razlika med PC-3 in DU145?

DU-145, človeška celična linija raka prostate, je bila pridobljena iz možganov kavkaškega moškega (69 let) z metastatskim karcinomom prostate. Te celice so leta 1978 prvič deponirali K. R. Stone in sodelavci.
Tako kot celice raka prostate PC-3 tudi DU-145 izraža androgene receptorje. Vendar pa te celice ob zdravljenju z androgenim ligandom ne kažejo nobene aktivnosti genov, ki so odzivni na androgene receptorje, zato se štejejo za androgeno neodvisne celice.
Celice DU-145 imajo epitelijsko morfologijo.
Celice DU-145 so hipotriploidne in imajo modalno število kromosomov 64. Imajo več označevalnih kromosomov, kot so del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) in del (9) (p11).

PC-3 proti DU145

Obe celični liniji raka prostate sta neodvisni od androgenih receptorjev. Razlikujeta se po tumorigenem in metastatskem potencialu. Celična linija PC-3 ob vbrizgavanju v imunsko oslabljene miši tvori zelo metastatski adenokarcinom IV. stopnje. Nasprotno pa se pri celični liniji DU-145 razvije rak prostate z zmernim metastatskim potencialom [1].

Prekinitev mikrofilamentov v celicah človeškega raka prostate PC-3.

2. gojenje celic DU-145

Celična linija DU-145 se pogosto uporablja v laboratorijih za raziskave raka prostate. Za lažje in učinkovitejše gojenje morate poznati naslednje ključne točke. V tem razdelku bodo vključene informacije o gojišču DU145, času podvojitve, pogojih gojenja celic in protokolih.

Ključne točke za gojenje celic DU-145

Čas podvojitve populacije:	Čas podvojitve populacije DU-145 je od 30 do 40 ur.
Prilepljene ali v suspenziji:	DU-145 je adherentna celična linija.
Gostota naselitve:	Celice DU-145 se sejejo pri priporočeni gostoti celic 2 x¹⁰⁴^celic/cm2. Pri tej gostoti se celice v skoraj 4 dneh povežejo v monosloj. Za naselitev celice speremo z 1 x fiziološko raztopino fosfatnega pufra in inkubiramo z raztopino za prehod, Accutase. Po 8 do 10 minutah inkubacije pri sobni temperaturi celicam dodamo sveže gojišče in jih centrifugiramo. Zbrana celična peleta se previdno resuspendira in celice se prelijejo v nove bučke za gojenje.
Gojišče za rast:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) z dodatki gojišča, tj. 10 % fetalnega govejega seruma (FBS), 2 mM L-glutamina, 2,2 g/L NaHCO3 in EBSS. Medij se obnavlja 2 do 3-krat na teden.
Pogoji rasti:	DU-145 gojijo v vlažnem inkubatorju pri 37 °C s 5-odstotnim virom CO2.
Shranjevanje:	Celice DU-145 shranjujemo v parni fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku, da ohranimo njihovo vitalnost dlje časa.
Postopek zamrzovanja in medij:	Za celice raka prostate DU-145 je priporočljivo uporabiti medije za zamrzovanje CM-1 ali CM-ACF. Za zamrzovanje celic se uporablja metoda počasnega zamrzovanja, ki omogoča postopno zniževanje temperature za 1 °C. To prepreči šok za celice in pomaga ohraniti njihovo sposobnost preživetja.
Postopek odmrzovanja:	Zamrznjene viale s celicami DU-145 se hitro odtajajo v vodni kopeli pri 37 °C od 40 do 60 sekund. Nato celicam dodamo gojišče in jih centrifugiramo, da odstranimo sestavine gojišča za zamrzovanje. Zbrane celice ponovno suspendiramo v rastnem gojišču in jih vlijemo v erlenmajerico za rast. Obnova zamrzovanja traja skoraj 24 ur.
Raven biološke varnosti:	Za gojenje celične linije DU145, ki je neodvisna od androgenih receptorjev, so potrebne nastavitve stopnje biološke varnosti 1.

Celice raka prostate DU-145 pri 10-kratni in 20-kratni povečavi.

3. celična linija DU-145: Prednosti in omejitve

Tako kot druge celične linije ima tudi celična linija raka prostate DU-145 nekaj prednosti in slabosti. Te lastnosti vam lahko pomagajo pri odločanju o njeni uporabi v vaših raziskavah. Glavne prednosti in pomanjkljivosti celic DU-145 so navedene v nadaljevanju.

Prednosti

Prednosti celic DU-145 so:

Tumorigeničnost	DU-145 je agresivna tumorigena celična linija raka prostate z zmernim metastatskim potencialom. Uporablja se za razvoj ksenografskega modela DU145 v imunsko oslabljenih miših za preučevanje biologije, razvoja in rasti raka prostate in vitro in in vivo.
Neodvisnost od androgenih receptorjev	Celice raka prostate DU-145 so neodvisne od androgenih receptorjev. Njihova rast ni odvisna od androgenov, zato se na celični in molekularni ravni ne odzivajo na zdravljenje z androgeni. Idealno za raziskovanje mehanizmov hormonsko neodvisnega raka prostate.

Omejitve

Omejitve celične linije DU-145 so naslednje:

In vitro model

DU-145 je in vitro celični model metastatskega karcinoma prostate, zato morda ne predstavlja v celoti kompleksnosti primarnih tumorjev prostate. Poleg tega morda zaradi posebnih značilnosti, kot je neodvisnost od androgenih receptorjev, ne implicira vseh tipov in podtipov raka prostate.

4. raziskovalna uporaba celic DU-145

Celična linija raka prostate DU-145 se lahko uporablja v številnih raziskavah. Tukaj je navedenih nekaj obetavnih aplikacij.

Biologija raka prostate: DU-145 je primeren model za preučevanje biologije raka prostate. Raziskovalci uporabljajo te celice za raziskovanje molekularnih mehanizmov, ki spodbujajo razvoj, napredovanje in metastaziranje raka. Poleg tega raziskujejo tudi genetske spremembe, ki so pogosto povezane z rakom prostate. Raziskave, izvedene leta 2021, so preučevale celice DU-145, da bi opredelile potencialne biomarkerje za učinkovite diagnostične in terapevtske posledice. Študija je predlagala aktin gama 1 (ACTG1) kot potencialni biomarker raka prostate, saj spodbuja proliferacijo rakavih celic in uravnava metastaziranje prek aktivacije poti MAPK/ERK [2].
Preverjanje in razvoj zdravil: Celice raka prostate DU-145 se pogosto uporabljajo za testiranje citotoksičnosti in učinkovitosti potencialnih zdravil proti raku. To raziskovalcem pomaga pri iskanju novih zdravil, razumevanju odpornosti na zdravila in osnovnih molekularnih mehanizmov. V študiji, izvedeni leta 2022, je bil raziskan citotoksični učinek mešanice smol, propolisa ali čebeljega lepila, v celičnih linijah raka prostate PC-3 in DU-145. Študija je pokazala zaviralne učinke te naravne snovi na rast v obeh celičnih linijah in predlagala njen protirakavi potencial [3]. Leta 2019 je bila izvedena še ena študija, ki je preučevala protiproliferativne učinke naravne spojine betaina v celicah raka prostate DU-145. Raziskava je pokazala, da betain deluje protiproliferativno s povišanjem celične smrti, posredovane z oksidativnim stresom, in vnetjem v celicah DU-145 [4].

430,00 €*

Vsebina: 1.5 milliliter

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300168

5.raziskovalne publikacije s celicami DU-145

V nadaljevanju je navedenih nekaj raziskovalnih publikacij o celični liniji DU-145.

Od koncentracije odvisni učinki cinkovega sulfata na celično linijo človeškega raka prostate DU-145: oksidativne, apoptotične, vnetne in morfološke analize

V tej študiji v reviji Biological Trace Element Research, 2020, je bilo predlagano, da cinkov sulfat (_ZnSo4) deluje protiproliferativno na celice DU-145 prek povzročanja apoptoze, morfoloških sprememb, oksidativnih poškodb in vnetja.

Selektivno citotoksično in antimetastatično delovanje pri celicah raka prostate DU-145, povzročeno z izvlečkom lubja Annona muricata L. in fitokemikalijo, annonacinom

Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji BMC Complementary Medicine and Therapies leta 2020. V tej študiji je bil raziskan citotoksični in antimetastatični potencial rastline, izvlečka lubja Annona muricata L., in njenega bioaktivnega annonacina v celični liniji DU-145.

Lnkrna LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFRpovezana pot uravnava odpornost celic raka prostate DU-145 na doksorubicin

V tej objavi v reviji IUBMB Life (2019) je bilo predlagano, da interakcija dolge nekodirajoče RNK LOXL1-AS1 z miR-let-7a-5p in potjo, povezano z EGFR, uravnava odpornost na doksorubicin v celicah raka prostate DU-145.

Znižanje regulacije DDR1 povzroča apoptozo in zavira EMT prek fosforilacije Pyk2/MKK7 v celičnih linijah raka prostate DU-145 in Lncap-FGC

V tem članku v reviji Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) je navedeno, da znižanje regulacije gena Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) povzroči smrt celic DU-145 in zavira prehod epitelija v mezenhim (EMT) prek aktivacije poti Pyk2/MKK7.

Kasticin zavira migracijo in invazijo celic človeškega raka prostate DU 145 prek signalnih poti Ras/Akt/NF-κB

Ta študija v reviji Journal of Food Biochemistry (2019) predlaga, da polimetoksiflavon kasticin zavira migracijo in invazijo celic DU-145 z uravnavanjem signalizacije Ras/Akt/NF-κB.

6. viri za celično linijo DU-145: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo

O celični liniji raka prostate DU-145 je na voljo veliko spletnih virov. V tem razdelku je omenjenih nekaj virov, ki pojasnjujejo ravnanje s temi celicami, njihovo vzdrževanje in protokol transfekcije:

DU-145 transfekcija: Ta video vadnica je postopen vodnik za učenje protokola za transfekcijo celic DU-145.

Tu je naveden protokol za gojenje celic DU-145.

Subkultiviranje celic DU-145: Ta povezava vam bo pomagala pri učenju protokola za subkultivacijo ali subkultiviranje celic DU-145.
Celice DU-145: Ta spletna stran vsebuje veliko koristnih informacij o celični liniji DU-145, vključno z gojiščem DU145, protokolom za subkultiviranje ter ravnanjem s proliferativnimi in kriokonzerviranimi kulturami.

Reference

Lima, A.R., et al., Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS (Razlikovanje med eksometabolomom normalnih in rakavih celic človeške prostate s pomočjo GC-MS ). Znanstvena poročila, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al., Silencing ACTG1 expression induces prostate cancer epithelial mesenchymal transition through MAPK/ERK signaling pathway. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Protikancerogeni učinki izvlečkov propolisa, pridobljenih z metodo hladnega ločevanja, na celični liniji raka prostate PC-3 in DU-145. Molekule, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betain zavira proliferacijo celic s povečanjem apoptoze, ki jo posreduje oksidativni stres, in vnetjem v celični liniji človeškega raka prostate DU-145. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.