Celice DLD-1: Uporaba in vpogled v celice DLD-1 pri raziskavah kolorektalnega raka
DLD-1 je celična linija človeškega kolorektalnega karcinoma, ki se pogosto uporablja v raziskavah raka. Je dragoceno orodje za raziskovanje različnih vidikov raka debelega črevesa, vključno z razvojem in napredovanjem tumorja, osnovnimi molekularnimi mehanizmi in odzivom na terapevtska sredstva. Zato je DLD-1 izjemna pri razumevanju bolezni in razvoju možnih strategij zdravljenja.
V tem članku so navedene pomembne informacije o celični liniji DLD-1, ki jih morate poznati, preden začnete delati z njo. Obravnaval bo:
- Splošne značilnosti in izvor celic DLD-1
- Informacije o gojenju celične linije DLD-1
- Celično linijo DLD-1: Prednosti in omejitve
- Raziskovalne aplikacije celične linije DLD-1
- Raziskovalne publikacije o celicah DLD-1
- Viri za celično linijo DLD-1: Viri, protokoli in drugo: viri, videoposnetki in drugo
1. Splošne značilnosti in izvor celic DLD-1
Pred delom s celično linijo raziskovalec najprej upošteva njeno poreklo in splošne lastnosti. V tem razdelku članka je podrobno predstavljena celična linija DLD-1. V njem so obravnavana naslednja pogosto zastavljena vprašanja: Kaj so celice DLD-1? Kaj je celična linija DLD-1? Katere so mutacije celične linije DLD-1? Kakšna je velikost celice DLD-1? Kakšna je morfologija celic DLD-1?
- DLD-1, celična linija raka debelega črevesa, izvira iz debelega črevesa 67-letnega moškega z adenokarcinomom debelega črevesa. Izolirali so jo D. L. Dexter in sodelavci v letih 1977-1979. Ta celična linija je istega izvora kot celične linije HCT-8, HCT-15 in HRT-18.
- Tako kot rak debelega črevesa imajo tudi celice DLD-1 fenotip mikrosatelitne nestabilnosti [1].
- Mutacije DLD-1 vključujejo KRAS, P53, BRAF, BRCA1 in BRCA2. Zaradi statusa DLD-1 P53, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 in DLD-1 KRAS mutacije veljajo te celice za idealne za študije raka.
- Te celice imajo epitelijam podobno morfologijo.
- Velikost celične linije DLD-1 je približno 15 µm.
- Človeška celična linija kolorektalnega raka DLD-1 ima psevdodiploidni kariotip. Približno 86 % celic ima modalno število kromosomov 46. Vendar pa je pri 17,1 % celične populacije lahko prisotna tudi poliploidija.
2.podatki o gojenju celične linije DLD-1
Pred gojenjem katere koli celične linije morate poznati njene osnovne zahteve za gojenje celic. V tem razdelku so poudarjene pomembne točke, ki jih morate poznati, preden začnete delati s celično linijo DLD-1. To vključuje: Kaj je podvojitveni čas DLD-1? Kaj je gojišče DLD-1? Kakšna je gostota naselitve celic DLD-1? Kako gojite celice DLD-1?
Ključne točke za gojenje celic DLD-1
|
Čas podvojitve: |
Čas podvojitve DLD-1 je približno 15 ur. |
|
Prilepljene ali v suspenziji: |
DLD-1 je adherentna celična linija človeškega raka debelega črevesa. Celice rastejo v enoslojne plasti. |
|
Gostota naselitve: |
Celice DLD-1 se sejejo z gostoto 1 do 2 x104 celic/cm2. Adherentne celice speremo s 1x fosfatno pufrsko fiziološko raztopino (PBS) in inkubiramo z raztopino za prehod (Accutase) pri sobni temperaturi. Po 8 do 10 minutah inkubacije odlepljene celice dodamo gojišču in centrifugiramo. Celični pelet nato previdno resuspendiramo in celice prelijemo v nove posode za gojenje z rastnim gojiščem. |
|
Rastno gojišče: |
Za gojenje celic DLD-1 se uporablja gojišče RPMI 1640 z dodatki gojišča, vključno z 10 % fetalnega govejega seruma FBS, 2,1 mM stabilnega glutamina in 2,0 g/L NaHCO3. Medij je treba zamenjati 2-3-krat na teden. |
|
Pogoji rasti: |
DLD-1 kulture vzdržujemo v vlažnem inkubatorju pri 37 °C s 5-odstotnim dovajanjem CO2. |
|
Shranjevanje: |
DLD-1 celice shranjujemo v parni fazi tekočega dušika ali v električnem zamrzovalniku za zelo nizke temperature (pri temperaturi pod -150 °C). |
|
Postopek zamrzovanja in medij: |
Za zamrznitev celic DLD-1 se lahko uporabi medij za zamrzovanje CM-1 ali CM-ACF. Vedno se priporoča počasen postopek zamrzovanja, ki omogoča postopno zniževanje temperature za 1 °C, s čimer se prepreči šok za celice in zaščiti njihova sposobnost preživetja. |
|
Postopek odtaljevanja: |
Zamrznjene celice odtajajte v vodni kopeli, nastavljeni na temperaturo 37 °C, 40 do 60 sekund, dokler ne ostane majhen ledeni skupek. Nato celice dodamo v sveže gojišče in centrifugiramo. Ta korak je potreben, da se iz celic odstranijo sestavine zamrzovalnega medija. Zbrane celice ponovno suspendiramo v rastnem gojišču in jih damo v erlenmajerico za rast. |
|
Raven biološke varnosti: |
DLD-1 celična linija se vzdržuje v laboratorijih 1. stopnje biološke varnosti. |
3.celična linija DLD-1: Prednosti in omejitve
V tem delu članka bomo pregledali prednosti in omejitve celične linije raka debelega črevesa DLD-1.
Prednosti
Glavne prednosti celične linije DLD-1 so:
|
Model raka debelega črevesa in danke |
Celice DLD-1 imajo mutacije, ki jih pogosto najdemo pri bolnikih z rakom debelega črevesa in danke, kot so mutacija DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA in DLD-1 BRCA2. Zaradi tega so klinično primeren celični model za preučevanje te bolezni. |
|
Tumorigena celična linija |
Celice DLD-1 so tumorogene. Po vbrizgavanju v gole miši lahko povzročijo tumorje. Zato raziskovalci uporabljajo te celice za razvoj ksenograftnih tumorskih modelov, ki pomagajo pri preučevanju nastanka, razvoja in napredovanja tumorjev in vivo. |
Omejitve
Omejitve, povezane s celicami DLD-1, so:
|
Heterogenost |
Populacije celic raka debelega črevesa DLD-1 so genetsko in fenotipsko heterogene. To lahko vpliva na posploševanje rezultatov raziskav. |
4.raziskovalna uporaba celične linije DLD-1
Celična linija DLD-1 se lahko uporablja pri raziskavah raka. V tem razdelku je obravnavanih nekaj pomembnih aplikacij.
- Študija raka: DLD-1 celice so dragocen in vitro model za razumevanje molekularnih mehanizmov, na katerih temeljijo rast, razvoj in napredovanje raka debelega črevesa in danke. Poleg tega se uporabljajo za preučevanje izražanja genov, signalnih poti in vpliva specifičnih genetskih mutacij na obnašanje rakavih celic. V raziskavi, opravljeni leta 2022, so ugotovili, da signalna kaskada PI3K/Akt/YAP uravnava migracijo in invazijo celične linije kolorektalnega raka DLD-1 [2].
- Razvoj zdravil: Raziskovalci uporabljajo celično linijo DLD-1 za preizkušanje učinkovitosti zdravil proti raku in ocenjevanje njihovega potenciala za zdravljenje raka debelega črevesa. To pomaga pri razvoju zdravil in učinkovitem boju proti bolezni. V študiji, izvedeni leta 2022, so uporabili rakavo celično linijo DLD-1 in raziskali protirakavo delovanje silicijevih ftalocianinov, kemično sintetiziranih spojin. Rezultati študije so pokazali, da so te spojine močna protirakava sredstva [3]. Zanimivo je, da so v drugi raziskavi ugotovili protirakavi potencial beljakovine P8, pridobljene s probiotiki, z uporabo celic DLD-1 [4].
5.raziskovalne objave o celicah DLD-1
V tem razdelku je izpostavljenih nekaj zanimivih in pogosto citiranih publikacij o celični liniji karcinoma debelega črevesa DLD-1.
Ta objava je objavljena v reviji Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). Študija je pokazala, da flavonoid diosmin povzroči celično smrt v celicah DLD-1 in povzroči tudi zastoj celičnega cikla; tako je lahko potencialno sredstvo proti raku.
Bromelain učinkovito zavira Kras-mutantnega raka debelega črevesa in danke s spodbujanjem feroptoze
Ta študija v reviji Animal Cells and Systems (2018) predlaga, da encim bromelain zavira mutacijo KRAS pri DLD-1 in ima močne citotoksične učinke.
Ta raziskovalni članek je bil objavljen leta 2019 v reviji "Environmental Toxicology". V študiji so bili raziskani protitumorski učinki naravne spojine bergapten z uporabo celične linije debelega črevesa DLD-1.
Ta študija v reviji Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) je pokazala, da so nanokompoziti kurkumin/železov oksid zelo učinkoviti proti celicam kolorektalnega raka DLD-1.
Ta raziskovalni članek je bil objavljen leta 2020 v reviji Turkish Journal of Biology. V študiji je bilo predlagano, da naravni proizvod, epibrassinolid, ki aktivira AKT v celicah DLD-1, spodbudi avtofagijo, povezano s poliamini.
6.viri za celično linijo DLD-1: DLD DLD: protokoli, videoposnetki in drugo: protokoli, videoposnetki in drugo
V nadaljevanju je navedenih nekaj virov o celicah DLD-1:
- DLD-1 transfekcija: Ta videoposnetek je izčrpen vodnik o protokolu in vitro transfekcije DLD-1.
- DLD-1 celice: Ta raziskovalni članek na kratko opisuje zahteve za gojenje celic DLD-1, vključno z mediji in pogoji gojenja. Poleg tega vam lahko pomaga pri učenju protokola transfekcije, ki se uporablja za celice DLD-1.
Naslednje povezave vsebujejo protokol za gojenje DLD-1, celic raka debelega črevesa človeškega izvora.
- Celična linija DLD-1: Ta spletna stran vsebuje osnovne informacije o celični liniji DLD-1. Pomagala vam bo spoznati različne protokole za gojenje celic DLD-1, vključno s subkultiviranjem in ravnanjem s kriokonzerviranimi in proliferacijskimi kulturami.
Reference
- Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptotični geni kot nove tarče za samostojno in kombinirano zdravljenje z resveratrolom in kurkuminom pri kolorektalnem raku. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
- Takeda, T. in drugi, Signalizacija PI3K/Akt/YAP spodbuja migracijo in invazijocelic kolorektalnega raka DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Anticancer activity of novel silicon phthalocyanines against the colorectal adenocarcinoma cell line (DLD-1) (Protirakava aktivnost novih silicijevih ftalocianinov proti celični liniji kolorektalnega adenokarcinoma (DLD-1) ). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
- An, B.C., et al., Anti-Cancer Roles of Probiotic-Derived P8 Protein in Colorectal Cancer Cell Line DLD-1 (Protirakava vloga proteina P8, pridobljenega s probiotiki, v celični liniji kolorektalnega raka DLD-1). International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.