Celice BEAS-2B – Celice BEAS-2B v raziskavah bolezni dihal: celovit vodnik
BEAS-2B je nesmrtena in netumorigena linija človeških pljučnih epitelnih celic. Gre za široko uporabljen in vitro model za preučevanje odziva pljučnih celic na različne rakotvorne in strupene snovi. Poleg tega je dragoceno raziskovalno orodje za preučevanje različnih okužb in bolezni dihal, kot so COVID-19 in pljučni karcinomi.
- Rastno gojišče
- Za gojenje linije pljučnih celic BEAS-2B se uporablja gojišče BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium), ki vsebuje 10 % fetalnega govejega seruma. Gojišče je treba zamenjati vsakih 2 do 3 dni.
- Čas podvojitve
- Čas podvojitve populacije BEAS-2B je približno 26 ur.
- Vrsta rasti
- BEAS-2B je epitelna adhezivna celična linija.
- Raven biološke varnosti
- BSL-1
- Na voljo pri
- Cytion — Naroči BEAS-2B
V tem članku bomo obravnavali skoraj vse vidike pljučne celične linije BEAS-2B, vključno z njenim izvorom, informacijami o celični kulturi, prednostmi, slabostmi in uporabo v raziskavah. Zlasti bomo obravnavali:
- Izvor in splošne značilnosti celic BEAS-2B
- Celična linija BEAS-2B: Informacije o gojenju
- Prednosti in slabosti celic BEAS-2B
- Uporaba celične linije BEAS-2B v raziskavah
- Celice BEAS-2B: raziskovalne publikacije
- Protokoli za gojenje celic
1. Izvor in splošne značilnosti celic BEAS-2B
Prva stvar, ki jo iščete v celični liniji, je njen izvor in splošne značilnosti. Tukaj boste spoznali glavne značilnosti in izvor človeških bronhialnih epitelnih celic BEAS-2B. Spoznali boste: Kaj je pljučna celična linija BEAS-2B? Kakšna vrsta celic je BEAS-2B? Kakšen je izvor celic BEAS-2B?
- BEAS-2B, linija bronhialnih epitelnih celic, je bila razvita iz nerakavega človeškega pljučnega tkiva leta 1988 s strani skupine Curtisa C. Harrisa [1].
- Celice BEAS-2B imajo epitelijsko morfologijo.
HBEpC v primerjavi z BEAS-2B
HBEpC so primarne človeške bronhialne epitelne celice. Podobno kot BEAS-2B so to normalne človeške bronhialne epitelne celice. Vendar imajo v primerjavi z nesmrtnimi celicami BEAS-2B omejeno življenjsko dobo. Obe celični liniji se lahko uporabljata za preučevanje pljučne biologije, toksikologije in modeliranja bolezni.
Celična linija BEAS-2B: Navodila za gojenje
Informacije o gojenju celične linije vam lahko olajšajo delo z njo. V tem delu članka boste spoznali vse osnovne informacije o gojenju pljučne celične linije BEAS-2B. Zlasti bomo izvedeli: Kakšen je čas podvojitve celic BEAS-2B? Kaj je gojišče BEAS-2B? Ali je celična linija BEAS-2B adhezivna? Kako gojiti celice BEAS-2B?
Ključne točke za gojenje celic BEAS-2B
Čas podvojitve:
Čas podvojitve populacije BEAS-2B je približno 26 ur.
Adhezivna ali v suspenziji:
BEAS-2B je epitelijska adhezivna celična linija.
Gostota celic:
Priporočena gostota celic za celično linijo BEAS-2B je 1 do 2 × 104 celic/cm2. Adherentne celice BEAS-2B se speremo s fosfatnim pufrom in inkubiramo z Accutase pri sobni temperaturi nekaj minut. Ko se celice razkrojijo, se doda svež medij, celice pa se zbirajo s centrifugiranjem. Zbrane celice se previdno ponovno suspendirajo in prelijejo v novo kolbo za rast.
Gozdno gojišče:
Za gojenje pljučne celične linije BEAS-2B se uporablja gojišče BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium), ki vsebuje 10 % fetalnega govejega seruma. Gojišče je treba zamenjati vsakih 2 do 3 dni.
Pogoji rasti:
Kultura BEAS-2B se vzdržuje pri 37 °C v vlažnem inkubatorju s stalnim dovajanjem 5 % CO2.
Shranjevanje:
Zamrznjene viale s celicami BEAS-2B se lahko shranjujejo v plinski fazi tekočega dušika ali v električnem zamrzovalniku pri temperaturi pod -150 °C.
Postopek zamrzovanja in gojišče:
Za zamrzovanje pljučne celične linije BEAS-2B se uporabljata zamrzovalna sredstva CM-1 ali CM-ACF. Celice se zamrzujejo tako, da se temperatura znižuje le za 1 °C na minuto, da se ohrani njihova vitalnost. Ta metoda se imenuje počasno zamrzovanje.
Postopek odmrzovanja:
Zamrznjene ali krioprezervirane kulture BEAS-2B se odmrzujejo v vodni kopeli s temperaturo 37 °C, ki vsebuje protimikrobno sredstvo, za 40 do 60 sekund. Nato se celicam doda gojišče in se lahko neposredno gojijo v novih kolbah ali se centrifugirajo, da se odstranijo sestavine sredstva za zamrzovanje. Nato se zbrane celice ponovno suspendirajo in gojijo. V prvem primeru se sredstvo za zamrzovanje odstrani po 24 urah.
Raven biološke varnosti:
Za ravnanje s kulturami BEAS-2B so potrebni laboratoriji stopnje biološke varnosti 1.
Prednosti in slabosti celic BEAS-2B
Tako kot druge celične linije imajo tudi celice BEAS-2B svoje prednosti in slabosti. Nekatere od njih so opisane v nadaljevanju.
Prednosti
Prednosti celične linije BEAS-2B vključujejo:
Imortalizirana celična linija
Človeška bronhialna epitelna celična linija BEAS-2B je bila imortalizirana. Zato se še naprej razmnožuje, ne da bi vstopila v senescenco. Ta lastnost celic BEAS-2B odpravlja potrebo po ponavljajočem se pridobivanju primarnih človeških pljučnih epitelnih celic s krajšo življenjsko dobo.
Enostavna gojitev
Kulture BEAS-2B so enostavne za vzdrževanje. Celice brez težav rastejo in se razmnožujejo v standardnih pogojih gojenja. Ni zahtevnih ali zapletenih pogojev za gojenje celic.
Človeški izvor
Celična linija BEAS-2B je človeškega izvora in pomena. Zato je idealen in vitro model za preučevanje odzivov, vedenja in procesov človeških epitelnih celic dihalnih poti.
Pomanjkljivosti
Pomanjkljivosti, povezane s pljučno celično linijo BEAS-2B, so:
Transformirane človeške pljučne epitelne celice
Celice BEAS-2B so transformirane z virusom Ad12-SV40 2B, kar lahko spremeni njihovo vedenje in odzive v primerjavi z originalnimi bronhialnimi epitelnimi celicami, pridobljenimi iz človeškega pljučnega tkiva.
Uporaba celične linije BEAS-2B v raziskavah
Celična linija BEAS-2B ponuja več uporab v biomedicinskih raziskavah. Nekatere pogoste uporabe celic BEAS-2B so:
- Toksikologija: Celice BEAS-2B se pogosto uporabljajo za preučevanje genotoksičnosti in citotoksičnosti različnih toksinov, onesnaževalcev okolja in kemikalij. Raziskovalci uporabljajo to linijo bronhialnih epitelnih celic za oceno škodljivih učinkov teh snovi na zdravje pljuč. Poleg tega preučujejo tudi osnovne molekularne mehanizme. Na primer, študija, izvedena leta 2021, je ocenila toksičnost kadmijevega kovine v celični liniji BEAS-2B. Rezultati raziskave so pokazali, da je kadmij povzročil celično smrt in poškodbe mitohondrijev v pljučni celični liniji BEAS-2B prek modulacije signalne poti MAPK [2]. Druga študija je uporabila celično linijo BEAS-2B za oceno toksičnosti nanodelcev cinkovega oksida pod oksidativnim stresom [3].
- Modeliranje bolezni dihal: Celična linija BEAS-2B je odlično raziskovalno orodje in in vitro model za preučevanje bolezni dihal, kot so kronična obstruktivna pljučna bolezen (KOPB), astma, pljučni rak in virusne okužbe, kot je SARS-CoV-2. Raziskovalci pogosto v celični liniji BEAS-2B povzročajo bolezenske stanje in preučujejo osnovne celične in molekularne mehanizme. To pomaga pri prepoznavanju potencialnih ciljev za zdravila in razvoju personaliziranih terapij. Raziskava, izvedena leta 2022, je uporabila celično linijo BEAS-2B in preučevala vlogo estrogena in njegovih receptorjev pri okužbi s SARS-CoV-2. Ugotovitve so pokazale, da višja ekspresija estrogenskega receptorja GPER1 zmanjša virusno obremenitev BEAS-2B SARS-CoV-2. Zato je lahko vpleten v virusno okužbo ali replikacijo SARS-CoV-2 [4].
5. Celice BEAS-2B: Raziskovalne publikacije
V nadaljevanju so navedene nekatere zanimive in najpogosteje citirane raziskovalne študije, ki obravnavajo celice BEAS-2B.
Toksičnost grafena v normalnih človeških pljučnih celicah (BEAS-2B)
Ta študija je bila objavljena leta 2011 v reviji Journal of Biomedical Nanotechnology. Raziskava je pokazala, da grafitni oksid povzroča apoptozo in citotoksičnost v normalni liniji bronhialnih epitelnih celic (BEAS-2B).
Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Ta študija je raziskovala terapevtski potencial naringenina, flavonoida, v celični liniji BEAS-2B. Ugotovitve so nakazovale, da naringenin ščiti pljučne celice BEAS-2B pred toksičnostjo, ki jo povzroča paraquat, ali oksidativno škodo.
Ta študija je bila objavljena v reviji Inhalation Toxicology (2011). V njej so raziskovalci ocenili toksični učinek magnetnih nanodelcev z amorfnimi silicijevimi prevlekami v celični liniji BEAS-2B in vitro.
Ta članek v reviji Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) predlaga, da lahko ursodeoksiholna kislina ovira nenormalno migracijo epitelnih celic dihalnih poti in prepreči poškodbe, ki jih povzroča interakcija med beljakovino spike SARS-CoV-2 in ACE-2. Tako lahko pomaga obnoviti bazalni sloj epitelija.
Učinki radona na miR-34a-inducirano apoptozo v človeških bronhialnih epitelnih celicah BEAS-2B
Ta študija je bila objavljena leta 2019 v reviji Journal of Toxicology and Environmental Health. Rezultati raziskave kažejo, da lahko kronična izpostavljenost radonu spodbuja karcinogenezo v človeških bronhialnih epitelnih celicah (BEAS-2B) z aktiviranjem mikroRNA-34a.
Protokoli za celično kulturo
Tukaj je naveden protokol za gojenje celic BEAS-2B.
- Subkultiviranje BEAS-2B: Ta dokument vam bo pomagal spoznati medije BEAS-2B in postopke subkultiviranja.
- Celična linija BEAS-2B: Ta spletna stran vsebuje vse osnovne informacije, ki jih potrebujete za začetek dela s celično linijo BEAS-2B, vključno z gojišči in protokoli za ravnanje s proliferativnimi in krioprezerviranimi kulturami.
Sklici
- Han, X., et al., Človeške pljučne epitelne celice BEAS-2B kažejo značilnosti mezenhimalnih matičnih celic. PLoS One, 2020. 15(1): str. e0227174.
- Cao, X., et al., Kadmij je prek signalne poti MAPK povzročil apoptozo celic BEAS-2B in poškodbo mitohondrijev. Chemosphere, 2021. 263: str. 128346.
- Heng, B.C., et al., Toksicnost nanodelcev cinkovega oksida (ZnO) na človeške bronhialne epitelne celice (BEAS-2B) je poudarjena z oksidativnim stresom. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): str. 1762–1766.
- Costa, A.J., et al., Prekomerna ekspresija estrogenskega receptorja GPER1 in zdravljenje z G1 zmanjšata okužbo s SARS-CoV-2 v bronhialnih celicah BEAS-2B. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: str. 111775.