Celice BEAS-2B - Celice BEAS-2B v raziskavah bolezni dihal: Celovit vodnik
BEAS-2B je imortalizirana in netumorigena linija človeških pljučnih epitelijskih celic. Je pogosto uporabljen in vitro model za preučevanje odziva pljučnih celic na različne rakotvorne in toksične snovi. Poleg tega je dragoceno raziskovalno orodje za preučevanje različnih okužb in bolezni dihal, kot so COVID-19 in pljučni karcinomi.
V tem članku bomo obravnavali skoraj vse vidike linije pljučnih celic BEAS-2B, vključno z njenim izvorom, informacijami o celični kulturi, prednostmi, pomanjkljivostmi in uporabo v raziskavah. Predvsem bomo pregledali:
- Izvor in splošne značilnosti celic BEAS-2B
- Celično linijo BEAS-2B: Informacije o gojenju
- Prednosti in slabosti celic BEAS-2B
- Uporaba celične linije BEAS-2B v raziskavah
- Celice BEAS-2B: Raziskovalne publikacije
- Protokoli za gojenje celic
1. Izvor in splošne značilnosti celic BEAS-2B
Prva stvar, ki jo iščete pri celični liniji, je njeno poreklo in splošne značilnosti. V nadaljevanju boste spoznali bistvene značilnosti in izvor človeških bronhialnih epitelijskih celic BEAS-2B. Preučili boste: Kaj je pljučna celična linija BEAS-2B? Kakšne vrste celic so celice Beas 2B? Kakšen je izvor celic BEAS-2B?
- Celično linijo bronhialnega epitelija BEAS-2B je leta 1988 razvila skupina Curtisa C. Harrisa [1] iz nerakovnega človeškega pljučnega tkiva.
- Celice BEAS-2B imajo morfologijo, podobno epitelijski.
HBEpC proti BEAS-2B
HBEpC so primarne celice človeškega bronhialnega epitelija. Podobno kot BEAS-2B so to normalne človeške bronhialne epitelijske celice. Vendar imajo v primerjavi z imortaliziranimi celicami BEAS-2B omejeno življenjsko dobo. Obe celični liniji se lahko uporabljata za preučevanje pljučne biologije, toksikologije in modeliranja bolezni.
2.celična linija BEAS-2B: Informacije o gojenju
Informacije o gojenju iz celične linije vam lahko olajšajo delo z njo. V tem razdelku članka boste izvedeli vse osnove za gojenje pljučne celične linije BEAS-2B. Predvsem bomo vedeli: Kakšen je čas podvojitve linije BEAS-2B? Kaj je medij BEAS-2B? Ali je celična linija BEAS-2B adherentna? Kako gojite celice BEAS-2B?
Ključne točke za gojenje celic BEAS-2B
|
Čas podvojitve: |
Čas podvojitve populacije BEAS-2B je približno 26 ur. |
|
Prilepljene ali v suspenziji: |
BEAS-2B je adherentna celična linija, podobna epitelijskim celicam. |
|
Gostota celic: |
Priporočena gostota celic za celično linijo BEAS-2B je 1 do 2 ×104 celic/cm2. Adherentne celice BEAS-2B se sperejo s fosfatnim pufrom fiziološke raztopine in nekaj minut inkubirajo z akutazo pri sobni temperaturi. Ko se celice disociirajo, dodamo sveže gojišče in celice zberemo s centrifugiranjem. Zbrane celice previdno resuspendiramo in prelijemo v novo erlenmajerico za rast. |
|
Gojišče za rast: |
Za gojenje pljučne celične linije BEAS-2B se uporablja medij BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium), ki vsebuje 10 % fetalnega govejega seruma. Gojišče je treba zamenjati vsake 2 do 3 dni. |
|
Pogoji rasti: |
BEAS-2B se goji pri 37 °C v vlažnem inkubatorju s stalnim dovajanjem 5 % CO2. |
|
Shranjevanje: |
Zamrznjene stekleničke s celicami BEAS-2B se lahko shranjujejo v parni fazi tekočega dušika ali v električnem zamrzovalniku pri temperaturi pod -150 °C. |
|
Postopek zamrzovanja in medij: |
Za zamrzovanje pljučne celične linije BEAS-2B se uporabljajo mediji za zamrzovanje CM-1 ali CM-ACF. Celice se zamrznejo tako, da se temperatura zniža le za 1 °C na minuto, da se zaščiti njihova vitalnost. Ta metoda se imenuje počasno zamrzovanje. |
|
Postopek odtaljevanja: |
Zamrznjene ali kriokonzervirane kulture BEAS-2B se 40 do 60 sekund odtajajo v vodni kopeli pri 37 °C, ki vsebuje protimikrobno sredstvo. Nato se celicam doda medij in se lahko neposredno gojijo v novih bučkah ali pa se centrifugirajo, da se odstranijo sestavine zamrzovalnega medija. Nato zbrane celice ponovno suspendiramo in gojimo. V prvem primeru se zamrzovalni medij odstrani po 24 urah. |
|
Raven biološke varnosti: |
Za ravnanje s kulturami BEAS-2B so potrebni laboratoriji 1. stopnje biološke varnosti. |
3.prednosti in slabosti celic BEAS-2B
Tako kot druge celične linije so tudi celice BEAS-2B povezane z nekaterimi prednostmi in slabostmi. Nekatere od njih so obravnavane v nadaljevanju.
Prednosti
Prednosti celične linije BEAS-2B so:
|
Imortalizirana celična linija |
Celična linija BEAS-2B človeškega bronhialnega epitelija je bila imortalizirana. Zato še naprej raste, ne da bi začela starati. Ta lastnost celic BEAS-2B odpravlja potrebo po ponovnem pridobivanju primarnih človeških pljučnih epitelijskih celic s krajšo življenjsko dobo. |
|
Enostavno gojenje |
Kultura BEAS-2B se zlahka vzdržuje. Celice brez težav rastejo in se razmnožujejo v standardnih pogojih gojenja. Zahteve za gojenje celic niso zahtevne ali zapletene. |
|
Človeški izvor |
Celična linija BEAS-2B je človeškega izvora in je pomembna za človeka. Zato je idealen in vitro model za preučevanje odzivov, obnašanja in procesov človeških epitelijskih celic dihalnih poti. |
Slabosti
Slabosti, povezane s pljučno celično linijo BEAS-2B, so:
|
Transformirane človeške pljučne epitelijske celice |
Celice BEAS-2B so preoblikovane z virusom Ad12-SV40 2B, kar lahko spremeni njihovo obnašanje in odzive v primerjavi z originalnimi celicami bronhialnega epitelija, pridobljenimi iz človeškega pljučnega tkiva. |
4.uporaba celične linije BEAS-2B v raziskavah
Celična linija BEAS-2B se lahko večkrat uporabi v biomedicinskih raziskavah. Nekatere pogoste uporabe celic BEAS-2B so:
- Toksikologija: Celice BEAS-2B se pogosto uporabljajo za raziskovanje genotoksičnosti in citotoksičnosti različnih toksinov, okoljskih onesnaževalcev in kemikalij. Raziskovalci uporabljajo to linijo bronhialnih epitelijskih celic za ocenjevanje škodljivih učinkov teh snovi na zdravje pljuč. Poleg tega preučujejo tudi osnovne molekularne mehanizme. V študiji iz leta 2021 je bila na primer ocenjena toksičnost kovinskega kadmija v celični liniji BEAS-2B. Rezultati raziskave so pokazali, da kadmij povzroča celično smrt in poškodbe mitohondrijev v pljučni celični liniji BEAS-2B z modulacijo signalne poti MAPK [2]. V drugi študiji je bila celična linija BEAS-2B uporabljena za oceno toksičnosti nanodelcev cinkovega oksida pod oksidativnim stresom [3].
- Modeliranje bolezni dihal: Celična linija BEAS-2B je odlično raziskovalno orodje in model in vitro za preučevanje bolezni dihal, kot so kronična obstruktivna pljučna bolezen (KOPB), astma, pljučni rak in virusne okužbe, kot je SARS-CoV-2. Raziskovalci v celični liniji BEAS-2B običajno povzročajo bolezenska stanja in preučujejo osnovne celične in molekularne mehanizme. To pomaga pri prepoznavanju potencialnih tarč za zdravila in razvoju prilagojenih terapij. V raziskavi, izvedeni leta 2022, je bila uporabljena celična linija BEAS-2B in preučena vloga estrogena in njegovih receptorjev pri okužbi s SARS-CoV-2. Ugotovitve so pokazale, da večje izražanje estrogenskega receptorja GPER1 zmanjša virusno obremenitev BEAS-2B SARS-CoV-2. Zato je lahko vpleten v virusno okužbo ali razmnoževanje SARS-CoV-2 [4].
5.celice BEAS-2B: Raziskovalne objave
V nadaljevanju je predstavljenih nekaj zanimivih in najpogosteje citiranih raziskovalnih študij s celicami BEAS-2B.
Toksičnost grafena v normalnih človeških pljučnih celicah (BEAS-2B)
Ta študija je bila objavljena leta 2011 v reviji Journal of Biomedical Nanotechnology. V raziskavi je bilo predlagano, da grafitni oksid povzroči apoptozo in citotoksičnost v normalni celični liniji bronhialnega epitelija (BEAS-2B).
Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). V tej študiji je bil raziskan terapevtski potencial naringenina, flavonoida, v celični liniji BEAS-2B. Ugotovitve kažejo, da naringenin ščiti pljučne celice BEAS-2B pred toksičnostjo ali oksidativnimi poškodbami, ki jih povzroča parakvat.
Ta študija je bila objavljena v reviji Inhalation Toxicology (2011). V njej so raziskovalci ocenili toksični učinek magnetnih nanodelcev s prevlekami iz amorfnega silicijevega dioksida na celično linijo BEAS-2B in vitro.
V tem članku v reviji Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) je bilo predlagano, da lahko ursodeoksikolna kislina ovira nenormalno migracijo epitelijskih celic dihalnih poti in prepreči poškodbe, ki jih povzročita interakcija beljakovine SARS-CoV-2 spike in ACE-2. Tako lahko pomaga obnoviti bazalno plast epitelija.
Vpliv radona na apoptozo, povzročeno z miR-34a, v celicah človeškega bronhialnega epitelija BEAS-2B
Ta študija je bila objavljena leta 2019 v reviji Journal of Toxicology and Environmental Health. Ugotovitve raziskave navajajo, da lahko kronična izpostavljenost radonu z aktiviranjem mikroRNA-34a spodbuja karcinogenezo v človeških bronhialnih epitelijskih celicah (BEAS-2B).
6.protokoli za gojenje celic
Protokol celične kulture za celice BEAS-2B je naveden tukaj.
- Subkultiviranje celic BEAS-2B: Ta dokument vam bo pomagal pri spoznavanju medijev in postopkov subkultiviranja celic BEAS-2B.
- Celična linija BEAS-2B: To spletno mesto vsebuje vse osnovne informacije, ki jih potrebujete za začetek dela s celično linijo BEAS-2B, vključno z njenimi mediji in protokoli za ravnanje s proliferacijskimi kulturami in kulturami za krioprezervacijo.
Reference
- Han, X., et al., Human lung epithelial BEAS-2B cells exhibit characteristics of mesenchymal stem cells. PLoS One, 2020. 15(1): str. e0227174.
- Cao, X., et al., Cadmium induced BEAS-2B cells apoptosis and mitochondria damage via MAPK signaling pathway. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., Toxicity of cink oxide (ZnO) nanoparticles on human bronchial epithelial cells (BEAS-2B) is accentuated by oxidative stress. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., Prekomerno izražanje estrogenskega receptorja GPER1 in zdravljenje z G1 zmanjšata okužbo s SARS-CoV-2 v bronhialnih celicah BEAS-2B. Molekularna in celična endokrinologija, 2022. 558: p. 111775.