Celice B16 - temeljni vodnik po celicah melanoma B16 v onkoloških raziskavah

B16 je celična linija kožnega raka (melanoma) mišjega izvora. Ta celična linija je učinkovit in vitro model za preučevanje človeških kožnih rakov. Pogosto se uporablja za preučevanje nastanka solidnih tumorjev in metastaziranja rakavih celic.

Ta članek vam bo pomagal razumeti osnove melanomske celične linije B16. Natančneje, opisano bo naslednje:

1.splošne značilnosti in izvor celične linije B16

V tem delu članka bodo opisane značilnosti melanomske celične linije B16. Izvedeli boste odgovore na naslednja pogosto zastavljena vprašanja. Na primer: Kaj je celična linija B16 za nastanek raka? Od kod izvirajo celice B16? Kakšna je velikost celic B16?

Celična linija B16 je bila ustvarjena leta 1954. Te celice so bile pridobljene iz miši C57BL/6J, ki so v Jacksonovih laboratorijih v Mainu spontano dobile tumor na koži.
To so epitelijske celice, ki proizvajajo melanin in imajo sposobnost metastaziranja v vranico, jetra in pljuča.
Melanomske celice B16 rastejo kot monolajere in imajo epitelijsko in vretenasto morfologijo celic.
Velikost celične linije B16 je približno 15,4 μm.
Obstajajo različni podkloni celic B16, vključno z B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 in B16F10. Te podlije se razlikujejo od matičnih celic B16 in ohranjajo nekatere posebne značilnosti. Tako se razlikujejo v morfologiji, velikosti celic in drugih lastnostih. B16F10 ima visoko sposobnost metastaziranja v pljuča, B164A5 pa je najbolj agresivna celična linija kožnega raka v primerjavi z B16F10, B16-GMCSF in B16FLT3 [1].

3D animacija bližnjega prikaza rastočega kožnega raka, na primer malignega melanoma, ki vname okoliško tkivo.

2.podatki o gojenju celične linije B16

Pred vzdrževanjem ali gojenjem celične linije lahko poiščete ključne informacije o času podvojitve, vrsti celic, rastnih medijih, pogojih gojenja itd. V tem razdelku so navedene vse potrebne informacije za gojenje celic B16.

Ključne točke za gojenje celic B16

Čas podvojitve populacije:	Povprečni čas podvojitve populacije celic B16 je ocenjen na 24 ur.
Prilepljene ali v suspenziji:	Celice B16 so adherentne in rastejo v monoslojih.
Gostota naselitve:	Celice B16 je priporočljivo posejati z gostoto 1 do 2 x¹⁰⁴ ^celic/cm2. Pritrjene celice B16 speremo z 1 x PBS in jih z raztopino akutase ločimo od površine. Celice centrifugiramo in celično peleto ponovno suspendiramo v rastnem gojišču. Pozneje se te celice razporedijo v novo bučko za rast.
Rastno gojišče:	Celice B16 gojimo v gojišču EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium), ki vsebuje 10 % fetalnega govejega seruma (FBS). Rastno gojišče je treba obnavljati 2-3-krat na teden.
Pogoji rasti:	Za gojenje celične linije B16 se uporablja vlažen inkubator s 5 %_CO2 in temperaturo 37 °C.
Shranjevanje:	Te celice shranjujemo pri temperaturi pod -150 °C ali v parni fazi tekočega dušika, da zaščitimo njihovo vitalnost.
Postopek zamrzovanja in medij:	CM-1 ali CM-ACF se uporablja za zamrzovanje celic B16 s postopkom počasnega zamrzovanja.
Postopek odtaljevanja:	Zamrznjene celice B16 odmrznemo pri 37 °C v vodni kopeli, ki vsebuje protimikrobno sredstvo. Odtajane celice lahko neposredno gojimo tako, da jih razporedimo v erlenmajerice z rastnim gojiščem. Poleg tega lahko te celice centrifugiramo, da odstranimo sestavine zamrzovalnega medija, in jih nato gojimo v novem mediju.
Raven biološke varnosti:	Celično linijo B16 je treba obdelovati ali vzdrževati v laboratoriju prve stopnje biološke varnosti.

Polkonfluentna plast celic melanoma B16 pod 10-kratno in 20-kratno povečavo.

3. celična linija B16: Prednosti in slabosti

Tako kot druge celične linije ima tudi linija B16 edinstveno mešanico prednosti in slabosti. V tem razdelku so navedene nekatere pomembne prednosti in slabosti te melanomske celične linije.

Prednosti

B16 je prvo učinkovito mišje orodje, ki se zaradi svojih prednosti pogosto uporablja pri raziskavah metastaz. Nekatere prednosti te celične linije kožnega raka so:

Enostavna za gojenje	Celično linijo B16 je enostavno gojiti v raziskovalnih laboratorijih. Široko se uporablja za preučevanje biologije rakavih celic, signalnih poti in drugih področij.
Hitra rast	Celična linija melanoma B16 ima visoko stopnjo razmnoževanja, zato je primerna za preučevanje procesov delitve in rasti celic.
Tumorigenost	B16 je tumorigena celična linija s tumorjem podobnimi lastnostmi, kot so invazija, migracija in proliferacija. Uporabna je za preučevanje nastanka, napredovanja in metastaziranja tumorjev.

Slabosti

Slabosti, povezane s celično linijo B16, so:

Pomanjkanje ustreznosti za človeka	Ker je B16 mišja celična linija melanoma, morda ne predstavlja natančno biologije človeškega kožnega raka, kar omejuje prenosljivost rezultatov raziskav.
Heterogenost	Celice B16 so heterogene, saj imajo v isti kulturi različne genetske in fenotipske lastnosti. To lahko vpliva na zanesljivost in ponovljivost rezultatov.

4. uporaba celic B16

Celična linija B16 se pogosto uporablja v raziskovalnih študijah. Nekaj obetavnih aplikacij te celične linije je:

Biologija tumorjev: Ta celična linija mišjega kožnega raka je tumorigena in se pogosto uporablja za razumevanje biologije tumorjev. Izvedenih je bilo več študij za raziskovanje celičnih mehanizmov za rast, razmnoževanje in metastaziranje tumorskih celic z uporabo celic B16. V raziskovalni študiji, izvedeni leta 2020, so bile celice B16 uporabljene za raziskovanje vloge dolge nekodirajoče RNK, LncRNA MEG3, pri nastanku, rasti in metastaziranju melanoma. Ta raziskava je pokazala, da nekodirajoča RNA modulira os miRNA-21/E-Cadherin in tako spodbuja te celične dogodke [2]. Podobno je bila izvedena raziskava, v kateri so na celicah B16 raziskali morebitno vlogo signalizacije Notch1 pri imunosupresiji, povzročeni s tumorjem [3].
Odkrivanje zdravil: Celice B16 se uporabljajo za preverjanje in testiranje potencialnih terapevtskih učinkov kandidatov za zdravila. V študiji je bil ocenjen protitumorski učinek neogambogove kisline, naravne spojine, z uporabo celične linije B16. Rezultati študije so pokazali, da ta spojina modulira signalno pot PI3K/Akt/mTOR in povzroči smrt rakavih celic [4]. V drugi študiji so proučevali protimelanomski učinek saponina ginsenozida Rg3 na celični liniji B16. Raziskava je predlagala, da ta naravna spojina povzroča protitumorsko delovanje z zniževanjem regulacije poti ERK in Akt [5].

430,00 €*

Vsebina: 1.5 milliliter

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 305154

5.raziskovalne publikacije s celicami B16

Tukaj je nekaj pomembnih raziskovalnih publikacij, ki vključujejo celično linijo melanoma B16.

LnkRNA MEG3 spodbuja rast, metastaziranje in nastanek melanoma z modulacijo osi miR-21/E-kadherin

V tej objavi v reviji Cancer Cell International (2020) je bilo predlagano, da dolga nekodirajoča RNK MEG3 z modulacijo osi miRNA-21/E-kaderin pospešuje nastanek, rast in metastaziranje celic melanoma B16.

Nov derivat psoralena-MPFC krepi melanogenezo prek aktivacije signalnih poti p38 MAPK in PKA v celicah B16

Ta članek je bil objavljen v reviji International Journal of Molecular Medicine leta 2018. V tej študiji so preučevali melanogeni učinek in mehanizme derivata psoralena - 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g] kromen-2-ona (MPFC) v celicah B16. Študija je predlagala, da ta derivat spodbuja melanogenezo s spodbujanjem celične signalizacije PKA in p38 MAPK.

Signalizacija Notch1 v melanomskih celicah spodbuja imunosupresijo, ki jo povzroča tumor, prek regulacije TGF-β1

Ta raziskava je bila objavljena leta 2018 v reviji Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Ugotovitve študije kažejo, da lahko aktivacija signalizacije Notch1 v celicah B16 prepreči protitumorsko imunost s povečanjem izražanja gena TGF-β1.

Neogambogova kislina povzroča apoptozo celic melanoma B16 prek signalne poti PI3K/Akt/mTOR

To študijo je leta 2020 izvedel Chunlan Wu s sodelavci in jo objavil v reviji Acta Biochimica Polonica. Ta raziskava navaja, da lahko neogambogova kislina, naravna spojina, povzroči smrt celic melanoma B16 z modulacijo signalne kaskade PI3K/Akt/mTOR.

Kompleks iridija (III) kot močno protirakavo sredstvo povzroča apoptozo in avtofagijo v celicah B16 z zaviranjem poti AKT/mTOR

To raziskovalno delo je bilo objavljeno v reviji European Journal of Medicinal Chemistry leta 2018. V tej študiji so raziskovalci raziskali protirakavo delovanje spojine, kompleksa iridija (III), z uporabo celic melanoma B16.

Ailanton povzroči zastoj celičnega cikla in apoptozo v celicah melanoma B16 in A375

Ta študija predlaga, da ima rastlinska bioaktivna snov, ailanton, protirakavi potencial, saj lahko povzroči apoptozo in zastoj celičnega cikla v celicah melanoma B16 in A375. Ta članek je bil objavljen v reviji Biomolecules leta 2019.

6. viri za celično linijo B16: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo

Viri o celični liniji B16, ki pojasnjujejo njene protokole gojenja in transfekcije, so omejeni.

Kultivacija melanomskih celic: Ta videoposnetek vsebuje dragocene nasvete za gojenje melanomskih celičnih linij.
Subkultiviranje celične linije: Ta videoposnetek pojasnjuje splošni protokol subkultivacije za celično linijo.
Transfekcija celične linije B16F10: Ta videoposnetek pojasnjuje protokol transfekcije za podlinijo melanomskih celic B16. Pomaga vam lahko pri optimizaciji protokola transfekcije za celice B16.

V nadaljevanju je navedenih nekaj protokolov za celične kulture za celice B16.

Kultivacija celic B16: Ta spletna stran vsebuje vse potrebne informacije za gojenje celic B16, vključno z rastnimi mediji, subkulturami, odmrzovanjem in zamrzovanjem celic.

Reference

Danciu, C., et al., Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines: C57 BL/6J. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LnkRNA MEG3 spodbuja rast, metastaziranje in nastanek melanoma z modulacijo osi miR-21/E-kadherin. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Signalizacija Notch1 v melanomskih celicah spodbuja imunosupresijo, ki jo povzroča tumor, prek regulacije TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Neogambogova kislina povzroča apoptozo melanomskih celic B16 prek signalne poti PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al. protitumorsko delovanje ginsenozida Rg3 pri melanomu prek znižanja regulacije poti ERK in Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.