Pojdi na domačo stran
Nakupovalna košarica 0,00 €*
Prikaži vse kategorije Celična linija A549: Ključni kamen v raziskavah pljučnega raka Nazaj

Objavljeno: 2023 | Zadnji pregled: maj 2026

Celična linija A549: ključni element raziskav pljučnega raka

Celična linija A549, ki je značilna za nepljučnega raka pri človeku, izvira iz podtipa adenokarcinoma v alveolnih epitelnih celicah. Te celice ponujajo vsestranski model za široko paleto raziskav na področju biologije raka, toksikologije in imunoonkologije. Namen tega članka je podati podroben pregled celic A549, vključno z njihovim izvorom, značilnimi lastnostmi in ključno vlogo v znanstvenih raziskavah, s čimer raziskovalcem zagotoviti znanje za učinkovito uporabo te celične linije na različnih področjih raziskav.

📋 Celična linija A549 — kratki podatki
Rastno gojišče
Glej stran izdelka
Čas podvojitve
Glej stran izdelka
Vrsta rasti
Adherenten
Raven biološke varnosti
BSL-1

Izvor in celični profil A549

Rakova celična linija A549, ki je bila prvič izolirana leta 1972 iz tkiva pljučnega raka 58-letnega belca, je bila vzpostavljena s strani D. J. Giarda in sodelavcev. Zanje je značilen adhezivni vzorec rasti, pri čemer tvorijo monosloje z epitelijsko podobno morfologijo, ki spominja na celice pljučnega skvamoznega tkiva. Tipični premer celic A549 je med 10 µm in 15 µm. Zlasti je treba omeniti, da ima celična linija A549 hipotriploidno število kromosomov, kar odstopa od normalnega števila kromosomov v človeških celicah. Modalno število kromosomov v približno 24 % celic je 66, pri čemer imajo posamezne celice (0,4 %) 64 ali 67 kromosomov, kar kaže na njihovo genomsko nestabilnost.

Raziskovalne aplikacije celic A549

Celice A549 so postale nepogrešljive v molekularni biologiji in terapevtskih raziskavah, zlasti pri razvoju adenovirnih vektorjev za gensko terapijo in uporabo v cepivih. Njihova sposobnost podpiranja proizvodnje adenovirusa brez potrebe po onkogenu E1A jih naredi idealni model za preučevanje ekspresije in replikacije adenovirnih genov. Ta lastnost je še posebej pomembna v okviru terapevtskih strategij in strategij za cepiva na osnovi adenovirusov, ki so v fazi kliničnih preskušanj. Poleg tega se celice A549 pogosto uporabljajo kot kontrolna skupina v testih za oceno sposobnosti replikacije adenovirnih konstruktov brez E1A, kar poudarja njihovo široko uporabnost pri napredku kliničnih raziskav.

Proizvodnja adenovirusov

A549 je primeren vir za proizvodnjo adenovirusov, saj ti virusni konstrukti za transkripcijo virusnega gena ne potrebujejo dodatnih virusnih onkogenov (E1A ali zgodnje regije 1A). Terapije in strategije cepljenja na osnovi adenovirusov uporabljajo te konstrukte v kliničnih preskušanjih. Poleg tega se celična linija A549 uporablja v testih kot kontrolna skupina za merjenje replikacije adenovirnih konstruktov z okvaro gena E1A [1].

Presejanje in razvoj zdravil

Celična linija A549 je dragocen model za presejanje zdravil, kot so pokazale nedavne raziskave. Na primer, v letu 2021 je študija uporabila celice A549 za presejanje 65 rastlin, zbranih v zahodni Andaluziji v Španiji, za selektivno protirakovo aktivnost [2]. Poleg tega je druga študija raziskala protirakav potencial zelenih nanodelcev z uporabo celične linije A549 [3].

A549 kot model bolezni

Zaradi svojega izvora so epitelne celice A549, pridobljene iz pljučnega karcinoma, postale priljubljen model bolezni za raziskave pljučnega raka [4]. Na primer, v nedavni študiji so celice A549 uporabili za razvoj modela pljučnega karcinoma na osnovi celične linije za preučevanje rasti tumorja in metastaz [5]. Poleg tega je celična linija A549 zanesljiva imitacija alveolarnega epitelija tipa II [6]. To jo naredi za dragoceno orodje za preučevanje presnovnih procesov v pljučnem tkivu in preučevanje dostave zdravil v pljučno tkivo.

Subkonfluentne (levo) in konfluentne (desno) celice A549.

A549: Rast celic in regulacija celičnega cikla

Rast celic A549 je ključno področje raziskav, zlasti za razumevanje poteka celičnega cikla teh celic. Raziskave genov celičnega cikla in vpliva zaviralcev celičnega cikla na celice A549 ponujajo vpogled v mehanizme proliferacije rakavih celic. Tehnike, kot sta sortiranje celic in oblikovanje celičnih peletov, so bistvene v teh študijah, saj omogočajo raziskovalcem izolacijo in analizo specifičnih celičnih populacij. Elektronska mikroskopija ponuja podrobne slike, ki dodatno pojasnjujejo celične strukture in procese, ki potekajo.

Alternativni modeli tkivne kulture in študije genske ekspresije

Kot alternativni model tkivne kulture celice A549 posnemajo fenotip celic ATII in kažejo značilnosti diferenciacije ATII. Zaradi tega so še posebej uporabne za preučevanje človeških celic ATII in genov za površinsko aktivne beljakovine. Napredne tehnike, kot so analiza genetske ekspresije z mikromrežami in analiza ekspresije RNA z ATP, omogočajo celovite primerjave genetske ekspresije med celicami A549 in primarnimi človeškimi pljučnimi celicami, vključno z endotelijskimi celicami. Te primerjave so ključne za razumevanje raka na molekularni ravni in za razvoj ciljnih terapij.

Odpornost na kemoterapijo in učinkovitost zdravljenja

Vloga celic A549 v raziskavah odpornosti na kemoterapijo pri NSCLC je pomembna, zlasti v zvezi z zdravili, kot sta cisplatin in pemetrexed. Študije se pogosto osredotočajo na mehanizme, ki stojijo za odpornostjo na kemoterapijo, s posebnim poudarkom na kasetnih lipidnih transporterjih in vplivu genetskih dejavnikov na učinkovitost zdravil. V tem kontekstu se raziskuje tudi učinkovitost alternativnih oblik zdravljenja, kot so estri glutationa in potencialna uporaba mehanizmov botulinskega nevrotoksina.

Vodnik za gojenje celične linije A549

Ta poglavje združuje bistvene parametre in prakse gojenja celic linije A549 ter ponuja izčrpno viro za optimalne pogoje gojenja. Obravnava ključne vidike, kot so čas podvojitve populacije, lastnosti adhezije, optimalne gostote sejanja, priporočene sestave gojišč in standardna gojišča.

Parametri gojenja

  • Čas podvojitve populacije: približno 28 ur, kar pomeni čas, potreben za podvojitev števila celic v populaciji.

  • Lastnosti adhezije: A549 je adhezivna celična linija, ki tvori monosloje, kar olajšuje neposredno opazovanje in manipulacijo.

  • Gostota sejanja: Priporoča se začetna gostota sejanja 1 x 10^4 celic/cm^2, da se zagotovijo optimalni pogoji rasti in konfluenca celic.

  • Rastno gojišče: Hranljiva mešanica gojišč DMEM in Ham's F12 (1:1), obogatena z 10 % fetalnim govejim serumom (FBS) in dopolnjena z L-glutaminom, podpira močno rast celic.

  • Pogoji gojenja: Kulture uspevajo v vlažnem okolju pri 37 °C, z 5 % CO2, kar posnema fiziološke pogoje.

  • Protokol shranjevanja: Celice se najbolje ohranijo v plinski fazi tekočega dušika, kar zagotavlja dolgoročno vitalnost.

  • Krioprezervacija in obnovitev: Uporaba metode zamrzovanja s kontrolirano hitrostjo z gojiščema CM-ACF ali CM-1 zagotavlja celično integriteto med krioprezervacijo. Odtaljevanje vključuje hitro segrevanje v vodni kopeli pri 37 °C, čemur sledi centrifugiranje za odstranitev krioprotektanta in ponovna suspenzija v svežem gojišču.

Biološka varnost in nadzor kontaminacije

  • Razvrstitev glede na biološko varnost: Celice A549 so razvrščene v razred biološke varnosti 1, zato je za njihovo varno ravnanje potrebno upoštevati standardne mikrobiološke prakse.

  • Zmanjšanje kontaminacije: Čeprav so celice A549, tako kot druge kulture, nagnjene k mikrobiološki kontaminaciji, upoštevanje strogih aseptičnih tehnik to tveganje zmanjša na minimum. Spremembe v pH in motnosti gojišča lahko kažejo na prisotnost bakterij, medtem ko okužbe z mikoplazmo, ki so bolj zahrbtne, zahtevajo redno testiranje zaradi njihovega potenciala, da ogrozijo celično fiziologijo in rezultate poskusov.

Izkoristite potencial svojih raziskav z našimi visokokakovostnimi celicami A549

Prednosti in pomembni vidiki pri uporabi celične linije A549

Celična linija A549 je pomemben model v raziskavah pljučnega raka, ki je priljubljen zaradi svojega dobro dokumentiranega biološkega obnašanja in preprostih zahtev za gojenje. Vendar je, kot pri vseh in vitro modelih, nujna previdnost pred mikrobno kontaminacijo. Zlasti tveganje okužbe z mikoplazmo poudarja potrebo po rednem diagnostičnem pregledovanju. Poleg tega je za ohranjanje celične integritete in ponovljivosti eksperimentalnih rezultatov priporočljivo omejiti kulture A549 na največ 20 pasaz.

Celice A549: raziskovalne publikacije

V tem poglavju si lahko ogledate izbor pomembnih publikacij o celicah pljučnega karcinoma A549, ki lahko navdihnejo nove raziskovalne ideje v zvezi s to celično linijo.

  1. Študija, izvedena leta 2020, je imela za cilj razvoj suspenzijskih kultur celic A549 za povečanje proizvodnje onkolitičnih adenovirusov, ki se uporabljajo za zdravljenje raka.
  2. V tej študiji so uporabili celično linijo A549 za oceno protirakavega potenciala zelenih nanodelcev, obogatenih z morsko algo Hypnea valentiae.
  3. Ta publikacija v reviji Bioengineered predlaga T-celice s C-met-specifičnim himernim antigennim receptorjem kot neposredno terapijo za celice nepljučnega pljučnega karcinoma A549.
  4. Celice A549 so bile uporabljene za presejanje protirakavih zdravil, zlasti vloge galne kisline, naravne spojine, pri indukciji celične smrti in preprečevanju napredovanja pljučnega raka.
  5. Ta raziskovalni članek je uporabil celično linijo A549 za potrditev protitumorske aktivnosti kombiniranih nanoformulacij paklitaksela in kurkumina.
  6. Ta publikacija v reviji Cancer Management and Research je uporabila celice A549 kot model nedrobnoceličnega pljučnega raka in proučila mehanizem odpornosti na cisplatin.
  7. Ta študija je raziskovala različne učinke izoform beljakovin zgodnjega območja (E1A) človeškega adenovirusa na aerobno glikolizo z uporabo celične linije A549 kot celičnega modela.

Viri za celično linijo A549

Celična linija A549, znana po tem, da izvira iz epitelnih celic pljučnega karcinoma, je v znanstveni skupnosti obširno dokumentirana. Na voljo je veliko informacij, ki vključujejo podrobne protokole za gojenje, tehnike transfekcije in druge ključne eksperimentalne postopke, kar jo naredi dragocen vir za raziskovalce na področju biologije raka in sorodnih disciplin.

A549: Protokoli transfekcije

Protokol transfekcije: Ta stran ponuja vse potrebne informacije za transfekcijo celic A549.

Transfekcija celic A549: Ta povezava vodi do protokola transfekcije DNA za celično linijo A549.

Protokol transfekcije: V tem videu je prikazan splošni protokol transfekcije DNA za linije sesalskih celic.

Videi o celični liniji A549

Protokol za gojenje celic A549: Ta video prikazuje gojenje celične linije A549 človeškega pljučnega karcinoma.

Splošne informacije o A549: Ta video posnetek vsebuje nekaj osnovnih informacij o celični liniji A549.

Pogosto zastavljena vprašanja o celicah A549

Celice A549 so celična linija, pridobljena iz tkiva človeškega pljučnega karcinoma. So podobne epitelijskim celicam in so bile prvotno razvite kot model za preučevanje pljučnega raka, zlasti adenokarcinomov
V kontekstu celic A549 se "bazalne celice" običajno nanašajo na celice, ki imajo bazalne značilnosti, kot so tiste, ki jih najdemo v bazalni plasti epitelijskih tkiv. Vendar so celice A549 predvsem alveolarne epitelijske celice in ne predstavljajo posebej bazalnih celic pljuč
Da, celična linija A549 izhaja iz človeškega pljučnega karcinoma in se uporablja kot model za nedrobnocelični pljučni rak (NSCLC), zlasti adenokarcinom
DMEM: Ham's F12, w: 3,1 g/L glukoze, w: 1,6 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a), dopolnjen z 10% FBS
Za gojenje celic A549 jih hranite v gojišču DMEM:Ham's F12, dopolnjenem z 10 % fetalnega govejega seruma, pri 37 °C v vlažnem ozračju s 5 % CO2. Podkulture izvajajte, ko celice dosežejo 70-80-odstotno konfluenco, da preprečite prekomerno rast
Celična linija A549 se pogosto uporablja pri raziskavah raka, saj zagotavlja dosleden in ponovljiv model za preučevanje molekularne biologije pljučnega raka, testiranje kemoterapevtikov, razumevanje mehanizmov odpornosti na zdravila in raziskovanje izražanja genov, povezanih s pljučnim adenokarcinomom
Ne, A549 ni primarna celična linija. Gre za imortalizirano celično linijo, pridobljeno iz človeškega pljučnega karcinoma. Primarne celične linije so neposredno izolirane iz tkiv in imajo omejeno življenjsko dobo v kulturi
Celična linija A549 je bila pridobljena iz tumorja z značilnostmi adenokarcinoma, vendar v večini raziskav ni posebej kategorizirana kot metastatska. Kljub temu je bila uporabljena za preučevanje mehanizmov, povezanih z metastaziranjem raka
Da, celice A549 izvirajo iz človeškega pljučnega adenokarcinoma, vrste NSCLC
Celice A549 izražajo več beljakovin, značilnih za pljučne epitelijske celice, med drugim beljakovine surfaktanta (pomembne za delovanje pljuč), različne epitelijske označevalce in beljakovine, vključene v poti pljučnega raka
Celice A549 je mogoče vzdrževati v številnih fazah, pogosto do 20-30, vendar je pomembno spremljati genetsko stabilnost in fenotipske spremembe skozi čas. Za dosledne rezultate mnogi raziskovalci raje uporabljajo celice v razmeroma nizkem razponu prehodov (npr. pod prehodom 20)
Hitrost rasti celic A549 se lahko spreminja glede na pogoje gojenja, vendar se v optimalnih pogojih običajno podvojijo v približno 22-24 urah

S tem izčrpnim vodnikom po celični liniji A549 imate na voljo vse potrebne informacije za uporabo tega zmogljivega orodja v svojih raziskavah. Ne glede na to, ali raziskujete raka, toksikologijo ali imunoonkologijo, celice A549 ponujajo zanesljiv in dobro opredeljen model. Če ste pripravljeni začeti, se brez obotavljanja obrnite na nas ali danes oddajte naročilo na naši spletni strani. Komaj čakamo, da bomo videli revolucionarne odkritja, ki jih boste naredili s celicami A549.

Sklici

  1. Moreira, A.S., et al., Vzpostavitev suspenzijskih celičnih kultur za izboljšano proizvodnjo onkolitičnega adenovirusa. Biotechnology Journal, 2020, 15(4): str. 1900411.
  2. Calderón-Montaño, J.M., et al., Screening za selektivno protirakovo aktivnost 65 izvlečkov rastlin, zbranih v zahodni Andaluziji, Španija. Plants, 2021, 10(10): str. 2193.
  3. Viswanathan, S., et al., Protirakova aktivnost zlatih nanodelcev, obogatenih z morsko algo Hypnea valentiae, prek signalne poti EMT v celicah A549. Biochemical Systematics and Ecology, 2023, 107, str. 104606.
  4. Garcia-de-Alba, C., Ponovna uporaba celic adenokarcinoma A549: nove možnosti za odkrivanje zdravil. 2021, American Thoracic Society, str. 405–406.
  5. Qi, L., et al., Preskusi rasti tumorja in spontanih metastaz in vivo z uporabo celic pljučnega raka A549. Bio-protocol, 2020. 10(7): str. e3579-e3579.
  6. Khan, P., et al., Kultura človeških alveolarnih epitelnih celic tipa II s pomočjo kalitve. Respiratory research, 2018. 19(1): str. 1-7.
To spletno mesto uporablja piškotke, da vam zagotovi najboljšo izkušnjo na našem spletnem mestu... Več informacij.
- Imprint

Ugotovili smo, da ste v drugi državi ali uporabljate drug jezik brskalnika, kot je trenutno izbran. Ali želite sprejeti predlagane nastavitve?

Zapri